总胆固醇检测试剂盒(邻苯二甲醛比色法)
北京雷根生物技术有限公司www.leagene.com
总胆固醇(TC)检测试剂盒(邻苯二甲醛比色法)
简介:
胆固醇(Cholesterol)又称胆甾醇,是一种环戊烷多氢菲的衍生物,分子式C 27H 46O,分子量为3860.65。胆固醇广泛存在于动物体内,其中脑、神经组织最丰富,在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也较高。
Leagene 总胆固醇(TC)检测试剂盒(邻苯二甲醛比色法)检测原理是胆固醇及其脂,在强酸存在下与邻苯二甲醛反应,产生紫红色化合物,该化合物在550nm 波长处有最大吸收峰,分光光度计在550nm 处进行比色测定,胆固醇含量在4mg/ml之内与吸光度呈良好线性关系。本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的总胆固醇含量定量测定。
组成:
编号
名称
TC119860T 1ml 100ml 2×10mg 30ml
Storage
试剂(A):胆固醇标准(1mg/ml)试剂(B):TC assay buffer 试剂(C):邻苯二甲醛粉剂试剂(D):邻苯二甲醛稀释液使用说明书
4℃避光RT 4℃避光RT 1份
操作步骤(仅供参考):
1、样本处理:
①血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用生理盐水稀释后检测。②细胞样本:
a、取适量的细胞(一般推荐>106以上),离心,弃上清,留取沉淀。b、用PBS 或生理盐水清洗1~2次,离心,弃上清,留取沉淀。
c、加入PBS 或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率300W,每次3~5s,间隔30s,重复3~5次。
③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水=的比例,加入生理盐水,冰浴条件下手动或机械匀浆。离心,取上清待用。
2、配制胆固醇标准工作液:按胆固醇标准(1mg/ml):TCassay buffer=的比例准确混合,即为胆固醇标准工作液(0.1mg/ml),然后按下表依次稀释胆固醇标准工作液。加入试剂(ml)/管号
胆固醇标准工作液(0.1mg/ml)
00
10.06
20.12
30.18
40.24
TC assay buffer 总胆固醇浓度(mg/ml)
0.240
0.181
0.122
0.063
04
3、配制邻苯二甲醛工作液:取1瓶(10mg)邻苯二甲醛粉剂的准确加入邻苯二甲醛稀释液1,充分混匀,即为邻苯二甲醛工作液。4℃避光保存,2周有效。
4、配制强酸工作液:取适量的TC assay buffer 和浓硫酸等量混合,即为强酸工作液。注意:本试剂盒不提供浓硫酸,需用户自备。二者混合时,一定小心操作,以免误伤自己。配制好的强酸工作液工作液中的硫酸含量应准确,否则有可能影响显色效果。5、分光光度计胆固醇测定操作:①按下表依次加入试剂:
加入试剂(ml)蒸馏水
系列胆固醇标准工作液待测血清或其他样本TC assay buffer 邻苯二甲醛工作液强酸工作液
②充分混匀,静置。
③以分光光度计,1cm比色杯测定550m 吸光度,以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
0.240.122.4
0.240.122.4
空白管0.006
0.006
0.0060.240.122.4
标准管
待测管
计算:以吸光度为纵坐标,以胆固醇浓度为横坐标,作标准曲线。对照标准曲线即知待
测样本的浓度。
注意事项:
1、上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。
2、本法可直接用于检测脑脊液中的TC 含量,也可直接检测尿液中的TC 含量。3、待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。
4、如果样本TC 浓度过高,结果可能呈假性降低,应用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀
释倍数。
有效期:6个月有效。
相关产品:
产品编号
产品名称
DC0032DM0007NR0001PS0013TE0002
Masson 三色染色液瑞氏-姬姆萨复合染色液DEPC 处理水(0.1%)RIPA 裂解液(强)
碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(PNP微板法)