华农蛋白质的生物合成
第16章 蛋白质的合成单元自测题 (一)、名词解释 1、 无细胞翻译系统 2、 密码子(codon)
3、 摆动配对(wobblepairing) 4、 核糖体循环(ribosomecycle) 5、 多核糖体(polyribosome) 6、 操纵子(operon)
7、 顺式作用元件(cis element) 8、 反式作用因子(trans factor) 9、 锌指(zincfinger)
10、亮氨酸拉链(1eudnezipper)
11、螺旋—环—螺旋(helix-loop-helix) 12、跳跃翻译(jump translation) 13、蛋白质内含子
(二)填空题
1、在64个密码子中,终止密码子是 、 、 ,编码Met兼作翻译起始信号的密码子是 ,编码Trp的密码子是 。
2、反密码子第 位碱基和密码子第 碱基的配对允许有一定的摆动,称为变偶
3、在原核细胞翻译起始时,小亚基16SrRNA的3’端与mRNA5’端的 之间互补配对,确定读码框架,fMet-tRNAf占据核糖体的 位置,
4、在肽链延伸时,由核糖体大亚基的 酶催化核糖体P位置的 与A位置的 形成肽键。
5、每一次延伸循环掺入一个氨基酸的同时,消耗 分子的GTP,核糖体沿 的方向解读mRNA的编码序列,肽链从 延伸,直到A位置出现终止密码子时, 结合到核糖体上,新生的肽链被释放。
6、在真核细胞中,已合成的蛋白质通过内质网膜运输时有 、 、 和 等参与了识别和运送作用。 7、内质网膜表面附着的大量核糖体是 的场所,内质网膜腔内是 的场所。高尔基体的重要功能是 和 。 8、蛋白质磷酸化是可逆的。蛋白质磷酸化时,需要 酶,而蛋白质去磷酸化需要 酶。
9、在蛋白质的生物合成中,需要起始tRNA,在原核中为 ,在真核中为 ,最后合成的蛋白质N端不含有甲硫氨酸,因为 。
10、肽基转移酶在蛋白质生物合成中的作用是 。
11、氨酰tRNA合成酶在ATP和Mg2
+存在下选择正确的氨基酸加到tRNA的3'末端,使之氨酰化的过程,取决于 。 12、蛋白质生物合成过程中,核糖体内需能步骤都与 水解为 和无机磷有关。
13、为保证蛋白质合成的正确性,氨酰tRNA合成酶除了对特定氨基酸有很强 之外,还能对“错误”氨基酸的氨酰化腺苷酸复合物进行 。
14、现在普遍认为核糖体上存在 个tRNA结合位点。
15、与正确和有效翻译作用相关的mRNA结构原件有 , 和 。 16、在原核细胞中新生肽链N端的第一个氨基酸是 ,必须由相应的酶切除。 17、当每个肽键形成终止时,增长的肽链以肽酰-tRNA的形式留在核糖体的 位。 18、在 过程中水解ATP的两个高能磷酸酯键释放出的能量足以驱动肽键的合成。 19、在原核细胞中蛋白质合成的第一步是形成 ,而在真核细胞中是形成 。 20、嘌呤霉素是蛋白质合成的抑制剂,抑制的机制是 。
21、蛋白质生物合成的新生肽链从 端开始,在mRNA上阅读密码子是从 到 端。 22、肽键的形成是由 催化,该酶在合成终止时的作用是 。
23、在形成氨酰-tRNA时,由氨基酸的 基与tRNA3′-末端的 基形成酯键。
24、氨基酸与tRNA的连接反应是由 合成酶催化进行的,此酶能识别 和 中的微细结构上的差别,以
高度的专一性进行连接,所产生的 与mRNA相配对时,只与 上的 有关,而与氨基酸无关。
25、植物细胞中蛋白质合成的全过程能在 、 和 三种细胞器中进行。 (三)选择题
1. 蛋白质生物合成的方向是( ):
A . 从C端到N端 B. 从N端到C端 C. 定点双向进行 D. 从5’端到3’端 2.蛋白质的糖基化是翻译后的调控之一,肽链中糖基化的氨基酸残基是:
A . 谷氨酸 B. 赖氨酸 C. 色氨酸 D. 丝氨酸
3.测定蛋白质在DNA上的结合部位常用( )方法。
A . Western印迹 B. PCR
C. 限制性图谱分析D. DNaseI保护足印分析
4. 翻译是从mRNA的( )方向进行的。
A . 3' 端向5' 端 B. 5' 端向3' 端
C. N 端向C 端 D. 非还原端向还原端 5. 在蛋白质的生物合成过程中,( )的说法是正确的。
A . tRNA帮助氨基酸固定在mRNA上 B. tRNA的分子数与mRNA的一样多 C. ρ因子识别启动子
D.σ因子识别终止密码子
6. 蛋白质生物合成的部位是( ):
A . 核小体 B. 线粒体 C. 核糖体 D. 细胞核 7. 蛋白质所含的天冬酰胺和谷氨酰胺两种残基是( ):
A . 生物合成时直接从模板中译读而来
B. 蛋白质合成以后经专一的酶经转酰胺作用形成的 C. 蛋白质合成以后经专一的酶氨解而成
D. 蛋白质合成以后经专一的酶脱羧作用形成的 8. 氨酰tRNA 合成酶的底物数为( ):
A . 1 B. 2 C. 3 D. 4
9. 嘌呤霉素抑制蛋白质生物合成是由于它是( ):
A . 核糖体失活蛋白 B. 核糖核酸酶
C. 氨酰tRNA的类似物 D. RNA聚合酶的抑制剂
10. 为核糖体上的蛋白质生物合成提供能量的分子是( ):
A. ATP B. GTP C. UTP D. CTP
11.利用基因工程的手段包括基因定点突变改造蛋白质使其符合人的要求,这种技术和学科被称为( ):
A. 遗传工程 B. 蛋白质工程 C. 细胞工程 D. 染色体工程
12.引起人获得性免疫缺陷症的病毒(HIV)是( ):
A. 单链DNA B. 双链DNA C. 链RNA D. 双链RNA 13.用[a-32p]dATP标记一个DNA片段需要用( ):
A. DNA聚合酶 B. DNA连接酶 C. 逆转录酶 D. 多核苷酸激酶
14.在蛋白质的生物合成过程中,下列哪一步没有mRNA参与( )
A. 氨酰tRNA识别密码子 B. 翻译的模板与核糖体结合 C. 起始因子的释放 D. 催化肽键的形成 15.氨酰tRNA合成酶可以( )
A. 识别密码子 B. 识别反密码子 C. 识别mRNA D. 识别氨基酸
16.下列除哪个外都是原核细胞中蛋白质生物合成的必要步骤( ):
A. tRNA与核糖体的30S亚基结合 B. tRNA与核糖体的70S亚基结合
C. 氨酰tRNA合成酶催化氨基酸与核糖体结合 D 70S的核糖体分离形成30S和50S两个亚基 17.下列叙述正确的是( ):
A. tRNA与氨基酸通过反密码子相互识别。
B. 氨酰tRNA合成酶催化氨基酸与mRNA结合。
C. tRNA的作用是携带相应的氨基酸到核糖体上,参与蛋白质的合成 D. 蛋白质的生物合成
发生在线粒体内。 18. 在哺乳动物体内能够合成的氨基酸是( ):
A. Ite B. Leu C. Net D. Pro 19. 对蛋白质合成过程中的理解正确的是( ):
A. 氨基酸随机地连接到tRNA上去 B. 新生肽链从C-端开始合成
C. 通过核糖核蛋白体的收缩,mRNA不断移动 D. 合成的肽链通过一个tRNA连接到核糖核蛋白上 20. tRNA的作用是( ):
A. 将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上 B. 把氨基酸带至mRNA的特定位置上 C. 增加氨基酸的有效浓度
D. 将mRNA接到核糖体上 21. 氨基酸与tRNA的键是( ):
A. 糖苷键 B. 酯键 C. 氢键 D. 酰胺键 22. 正常出现肽链终止,是因为( ):
A. 一个与链终止三联体相应的tRNA不能带氨基酸 B. 不具有与链终止三联体相应的反密码子tRNA C. mRNA在链终止三联体处停止合成 D. 由于tRNA上出现终止密码
23. 在蛋白质生物合成的全过程中下列不需要的物质是( ):
A. 有意义链 B. tRNA C. 核糖体 D. mRNA 24. 真核细胞核糖体大小亚基结合之后,沉降系数为( ):
A. 40S+60S=80S B. 30S+50S=80S C. 40S+60S=100S D. 30S+50S=70S 25. 核糖体不含( ):
A. 起始因子结合部位 B. 脱甲酰基酶结合部位 C. 氨酰基部位(A部位) D. 肽基部位(P部位) 26. 能够识别UAA、UAG和UGA的是( ):
A. 释放因子 B. 延长因子 C. 核糖体 D. 转肽 27. 下列酶不是原核生物蛋白质合成所需要的酶是( ):
A. 转肽 B. DNA聚合酶(Ⅰ) C. 氨酰tRNA合成酶 D 甲酰化酶 28. 下列反应不属于肽链合成的后加工处理的是( ):
A. 肽链的部分水解 B. 磷酸酯键的形成 C. 二硫键的形成 D. 甲基化反应 29. 蛋白质生物合成中多肽的氨基酸排列顺序取决于( ):
A. 相应tRNA专一性 B. 相应氨酰tRNA合成酶的专一性 C. 相应mRNA核苷酸排列顺序 D. 相应tRNA的反密码子 30. 蛋白质合成所需的能量来自( ):
A. GTP B. ATP和GTP C. ATP D. CTP 31. 多肽生物合成后经化学修饰而获得的氨基酸残基有( ):
A. 酪氨酸 B. 丝氨酸 C. 苏氨酸 D. 羟脯氨酸 32. 下列反应形成具有起动功能的起始复合物的步骤是( ):
A. 30S+mRNA→30S·mRNA
B. 30S·mRNA+fMet-tRNA+GTP→30S·mRNA·fMet-tRNA·GTP
C. 30S·mRNA·fMet-tRNA·GTP+50S→70S·mRNA·fMet-tRNA+GDP+Pi D. tRNA+Met→Met-tRNA 33. 核糖体A位点的作用是( ):
A. 接受新的氨酰-tRNA到位 B. 含肽基转移酶活性,催化肽键的形成 C. 可水解肽酰-tRNA释放多肽链 D. 合成多肽的起始点
34、美国洛克菲勒大学的Blobel因提出什么学说而获得1999年的诺贝尔医学生理学奖?( ) (A)信号肽学说 (B)氧化磷酸化学说 (C)第二信使学说 (D)分子伴侣学说
(四)是非题
1. 丝氨酸是蛋白质的磷酸化位点,因此蛋白质中含有的丝氨酸残基均能被磷酸化。多肽链中的氨基酸序列包含着翻译后加
工、分拣、转运以及折叠成天然构象所需要的信息。 2. 凡有锌指结构的蛋白质均有与DNA结合的功能。
3. 在所有病毒中,迄今为止还没有发现既含有RNA,又含有DNA的病毒。
4. 因为丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸都是蛋白质磷酸化的位点,因此所有蛋白质激酶均能使蛋白质中这三种氨基酸磷酸化。 5. tRNA只在蛋白质生物合成中起作用。
6. 从生物体内分离获得的蛋白质和让该蛋白质基因用遗传工程技术在细菌中表达的产物,它们的化学结构是完全相同的。 7. 嘌呤霉素因其结构与氨酰tRNA3'末端的AMP残基结构十分相似,而抑制蛋白质的生物合成。 8. 细胞中三种主要的多聚核苷酸tRNA、mRNA和rRNA都参与蛋白质生物合成。 9. 一条新链合成开始时,fMet-tRNAfMet与核糖体的A位结合。
10. 每一个相应的氨酰-tRNA与A位点结合,都需要一个延伸因子参加并需要消耗GTP。 11. 蛋白质合成时从mRNA的5′→3′端阅读密码子,肽链的合成从氨基端开始。 12. 氨酰-tRNA上的反密码子与mRNA的密码子相互识别,以便把它所携带的氨基酸连
接在正确位置上。
13. 多肽或蛋白质分子中一个氨基酸被另一个氨基酸取代是由于基因突变的结果。
14. 蛋白质正确的生物合成取决于携带氨基酸的tRNA与mRNA上的密码子正确识别。 15. 生物遗传信息的流向,只能由DNA→RNA,而不能由RNA→DNA。
16. 线粒体和叶绿体的蛋白质生物合成起始过程和原核生物相同。
17. 通过氨基酰-tRNA合成酶的催化并从ATP获得能量,使氨基酸和tRNA相连接成的氨基酰-tRNA是合成蛋白质的直接
原料。
18. 在核糖核蛋白体上合成蛋白质时,由于tRNA能识别mRNA的三联体密码,从而使氨基酸正确定位。 19. 溶酶体无选择地降解蛋白质。
20. 线粒体和叶绿体的核糖体在大小、组成和对蛋白质合成抑制剂的敏感性等方面类似于细菌核糖体。 21. 多肽连中的氨基酸序列包含着翻译后加工、分拣、转运、以及折叠所需要的信息。
(五)简答与计算
1. 请说明三种tRNA在蛋白质生物合成中的作用?
2. 为什么某种氨基酸的变化不影响蛋白质的活性,而另一种氨基酸的变化影响其活性?最容易产生突变的是哪类氨基酸? 3. 在多顺反子的mRNA中,mRNA所编码的各种蛋白质常常是不等量的,请回答:
(1)一般来说,多顺反子所合成的各种蛋白质数量,从mRNA的5’端到3’端逐渐减少,这种现象被称之为极性。对于极性的最好解释是什么?
(2)多顺反子所合成的各种蛋白质数量在不同的细胞中都不一样。所产生各种蛋白质的相对数量通常精确地按最经济要求的比例,这叫做翻译控制。请问翻译控制的机制是什么?
4、解释下列诱变剂引起突变的基础:5—氟尿嘧啶;2—氨基嘌吟;亚硝酸;丫啶橙。并指出它们是换同(如:由GC对置换AT对,或反之)、换异(如:TA对置换AT对,或其它) 还是移码突变? 5、基因内点突变引起该基因编码的蛋白质功能丧失必须具备哪两个条件? 6. 参与蛋白质生物合成的主要组分及辅助因子有哪些?各起什么作用? 7. 蛋白质合成的加工修饰有哪些内容?
8. 氨基酸在蛋白质生物合成过程中是怎样被活化和运载的? 9 简要说明真核生物编码蛋白质基因的表达调节的特点?
10 蛋白质的氨基酸排列顺序和核酸的核苷酸排列顺序、生物功能有怎样的关系?蛋白质的氨基酸顺序和它们的立体结构有
什么关系?
11. 简介信号肽及识别信号肽的信号识别体的结构特征? 12. 泛肽怎样标记选择降解的蛋白质?
六、参考答案 (一)、名词解释
1、 无细胞翻译系统是指具有蛋白质生物合成能力的细胞抽取物,比如大肠杆菌无细胞翻译系统、兔网织红细胞无细胞翻译系统、麦胚无细胞翻译系统等,一个无细胞系统必须包含以下成分:核糖体、各种tRNA、各种氨酰-tRNA合成酶、起始因子和延伸因子以及终止释放因子、GTP、ATP、20种基本的氨基酸。
2、 mRNA上由三个相邻的核苷酸组成一个密码子,代表某种氨基酸或肽链合成的起始或终止信号。 3、 密码子第3位碱基与反密码子第1位碱基配对时不一定完全遵循A--T、G--C的配对原则,称为不稳定配对或摆动配对。 4、 是指已活化的氨基酸由tRNA转运到核蛋白体合成多肽链的过程。
5、 是指一条mRNA链上同时有多个核蛋白体与之结合,它们以不同进度进行多肽链合成。
6、 是由功能相关的一组结构基因加上其上游的启动子和操纵基因等组成的原核生物的转录单位。 7、 .真核生物DNA的转录启动子和增强子等序列,合称顺式作用元件。 8、 调控转录的各种蛋白质因子总称反式作用因子。
9、 是调控转录的蛋白质因子中与DNA结合的一种基元,它由大约30个氨基酸残基的肽段与锌螯 合形成的指形结构,锌以4个配位键与肽链的Cys或His残基结合,指形突起的肽段含12—13个氨基酸残基,指形突起嵌入DNA的大沟中,由指形突起或其附近的某些氨基酸侧链与DNA的碱基结合而实现蛋白质与DNA的结合。
10、 这是真核生物转录调控蛋白与蛋白质及与DNA结合的基元之一。两个蛋白质分子近C端肽段各自形成两性α-螺旋,α-螺旋的肽段每隔7个氨基酸残基出现一个亮氨酸残基,两个α-螺旋的疏水面互相靠拢,两排亮氨酸残基疏水侧链排列成拉链状形成疏水键使蛋白质结合成二聚体,α-螺旋的上游富含碱性氨基酸(Arg、Lys)肽段借Arg、Lys侧链基团与DNA的碱基互相结合而实现蛋白质与DNA的特异结合。
11、 这种蛋白质基元由两个两性α-螺旋通过一个肽段连结形成螺旋—环—螺旋结构,两个蛋白质通过两性螺旋的疏水面互相结合,与DNA结合则依靠此基元附近的碱性氨基酸侧链与DNA碱基结合而实现。
12、 跳跃翻译,也称翻译水平的内含子,是指某些蛋白质在翻译的时候,其阅读框架(ORF)中的一段核苷酸被忽略,由核糖体在转位反应中直接跳过,而接着翻译后面的核苷酸序列的现象。被跳过的这段核苷酸序列由于在翻译过程中并不决定任何氨基酸,因此被称为翻译水平的内含子。
13、 蛋白质内含子(intein)是指某些蛋白质在后加工反应中,被剪接去除的肽段。 (二)填空题
1、 UAA、UAG、UGA,AUG,UGG 2、 一,三
3、 SD序列,P位点
4、 肽酰基转移酶,肽酰基,氨酰基
5、 2个,5’→3’,N端向C端,释放因子 6、 (信号肽),(信号识别颗粒/SRP),(停泊蛋白),(信号肽酶) 7、 (肽链合成),(新生肽链的折叠和糖基化),(对糖蛋白的肽链进行修饰),(对肽链进行分类 并运送到细胞特定部位) 8、 . (蛋白激),(蛋白磷酸酯酶) 9、 . (甲酰甲硫氨酸tRNA),(甲硫氨酸tRNA),(被剪切去除) 10、 (形成肽键)
11、(合成酶识别正确的tRNA) 12、(GTP),(GDP) 13、(专一性),(水解) 14、(3)
15、(核糖体结合位点),(起始密码子),(终止密码子) 16、(fMet) 17、(P)
18、(氨酰tRNA形成)
19、(70S起始复合物) (80S起始复合物) 20、 (干扰氨基酸与tRNA结合), 21、(氨基端) (5′) (3′) 22、(肽酰转移酶) (肽酰水解酶) 23、(羧羟)
24、(氨酰-tRNA) (氨基酸和tRNA) (氨酰-tRNA) (核糖体A位) ( 密码子) 25、(核糖体) (线粒体) (叶绿体)
(三)选择题
1. B 2. D 3. D 4. B 5. A 6. C 7. A 8. C 9. C 10. B 11. B 12. C 13. D 14. D 15. D 16. C
17. C 18. D 19. D 20. B 21. B 22. A 23. A 24. A 25. B 26. A 27. B 28. B 29. C 30. A 31. D
32. C 33. A 34 A
(四)是非题
1. 错。 2. 错。3. 对。 4. 错。5. 错。6. 错。7. 对。8. 对。9. 错。 10 对。 11 对。12. 对。13. 对。 14. 对。
15. 错。16. 错。 17. 对。 18. 对。 19. 对。 20 对 21 对
(五)问答与计算
1.mRNA在蛋白质合成中的作用:携带遗传信息,根据碱基配对的原则DNA将遗传信息转录给mRNA,带有蛋白质合成信息的mRNA在核糖体上指导蛋白质的生物合成。
tRNA在蛋白质合成中的作用:由于遗传密码具有简并性,大多数氨基酸具有两个以上个密码子,所以每个氨基酸有不止一个tRNA。氨酰tRNA合成酶催化氨基酸与相应的tRNA生成氨酰tRNA,到达核糖体由tRNA上的反密码子与mRNA上的密码子相互识别,使其所携带的氨基酸,参加蛋白质的合成。
rRNA在蛋白质合成中的作用:rRNA和与蛋白质合成有关的蛋白质因子结合形成核糖体,成为蛋白质合成的场所,在许多核糖体上同时翻译一个蛋白质时,一条mRNA上结合许多核糖体形成多聚核糖体。
2.不在蛋白质或酶活性区的氨基酸改变或被取代,不影响蛋白质或酶的构象和生物活性,在蛋白质或酶活性区的氨基酸改变或被取代,特别是极性和非极性氨基酸的互换,不影响蛋白质或酶的构象和生物活性,引起这种变化的基因改变被称为突变。
3.(1)一般来说,多顺反子mRNA合成的各种蛋白质的数量是根据细胞内的需要决定的,产生极性现象是由于某种突变体产生依赖因子的转录终止位点,在大多数情况下不会发生这种现象。
(2)多顺反子mRNA上有若干个对核糖体亲和性不同的结合位点,而且,多顺反子mRNA上的若干个起始密码子起始效率不同,它们取决于相邻的顺序。
4.5—氟尿嘧啶是取代胸腺嘧啶的类似物,可以与鸟嘌呤配对,引起换同。2—氨基嘌吟是取代腺嘌呤和鸟嘌吟的类似物,可以与胸腺嘧啶和胞嘧啶配对,引起换同。亚硝酸引起脱氨,使鸟嘌呤成为黄嘌呤,腺嘌呤成为次黄嘌呤,胞嘧啶成为尿嘧啶。次黄嘌呤与胞嘧啶配对,尿嘧啶与腺嘌呤配对,引起换同,黄嘌呤不能与任何碱基配对。丫啶橙嵌入DNA分子导致移码。
5.两个必要条件是:(1)变化必须在被转录的DNA分子内;(2)变化必须在变异氨基酸的密码子内。
6. 蛋白质合成的主要组分有:三种不同的RNA,其作用是:mRNA是蛋白质合成的模板,tRNA是转运AA的工具,rRNA为蛋白质的合成提供场所。蛋白质合成的辅因子及其作用有:起始因子,帮助蛋白质合成起始和起始复合物的定位;延伸因子,参与肽链延伸;释放因子,其作用是终止肽链合成并从核糖体上释放出来。
7. 蛋白质合成后的加工修饰内容有:①水解剪切:包括N-端Met的除去,切除信号肽,切除蛋白质前体中不必要的肽段。②氨基酸侧链的修饰,如:磷酸化、糖基化、甲基化等。③二硫键的形成。④加辅基。
8. 氨基酸的活化是在氨酰-tRNA合成酶的作用下,AA与ATP作用生成氨基酰-AMP酶复合物,活化的氨基酸与tRNA作用,在氨基酰-tRNA合成酶的催化下生成氨酰-tRNA,由tRNA将氨
基酸带到核糖体上进行蛋白质的合成。
9. 真核基因的表达在多层次和受多种因素的协同调节,包括:染色质结构的变化,转录和转录后加工,翻译和翻译后加工等过程的调节。
10. 蛋白质的一级结构是由基因编码的。蛋白质的氨基酸排列顺序总体而言是由基因中的核苷酸排列顺序所决定的。然而,在有相当数量的基因在转录成mRNA以后,以及在转译为肽链以后,在这两个不同的水平上都还存在着后加工,包括转录后加工和翻译后加工,因此成熟蛋白质中的氨基酸顺序和基因中的核苷酸顺序不一定是对应的。 蛋白质的立体结构在很大程度上是由氨基酸的序列所决定的,但是也不能忽略环境因素对蛋白质立体结构的影响。例如疯牛病的发生时,相同的氨基酸顺序的肽链却产生了不同的立体结构。
蛋白质的生物功能和蛋白质的立体结构密切相关。在通常的生理条件下,可认为蛋白质的氨基酸顺序决定了蛋白质的立体结构,进而决定了蛋白质的生物功能。
11. 目前通常所说的信号肽是指翻译产物,新生肽链N端引导新生肽链进入内质网的肽段。这种信号肽一般含有约20个氨基酸残基,从其结构看,中间集中了较多的疏水性残基,两端是一些极性的残基。识别信号的识别体,也称为信号肽识别颗粒(SRP)。它是7SRNA和6条不同分子量的肽链组成复合物。除了和信号肽结合外,识别颗粒还可以和其它一些帮助新生肽穿越内质网膜的蛋白质(或复合物)结合,后者为停靠蛋白和核糖体受体等。
12. 泛肽标记选择降解的蛋白质分三步进行:①参与的反应中,泛肽的羧基在ATP水解的推动下,末端通过硫酯键与泛肽-活化酶(E1)偶联。②活化的泛肽随即与泛肽-携带蛋白(E2)的巯基上相连。③第三步,泛肽-蛋白连接酶(E3),将泛肽从E2转移到宣布无用的蛋白质的赖氨酸ε-氨基上。这样,形成了一个异肽键。在选择蛋白质发生降解的过程中,泛肽-蛋白连接酶起着关键的作用。