脱细胞异种(猪)真皮基质临床应用与研究进展

　　doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.06.008� 　　doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.06.008� 　　创面处理贯穿烧伤治疗的全过程，皮肤移植是覆盖烧伤创面的重要手段，但严重烧伤常致自体皮源不足。寻找永久的真皮替代品成为研究的热点。1995年Wainwright研制出无细胞真皮基质(ADM)充当永久性真皮替代物并成功应用临床［1］。近年来脱细胞异种(猪)真皮在临床开始广泛应用并取得一定成效。本文将就脱细胞异种(猪)真皮基质的临床应用与研究进展作一综述。　　创面处理贯穿烧伤治疗的全过程，皮肤移植是覆盖烧伤创面的重要手段，但严重烧伤常致自体皮源不足。寻找永久的真皮替代品成为研究的热点。1995年Wainwright研制出无细胞真皮基质(ADM)充当永久性真皮替代物并成功应用临床［1］。近年来脱细胞异种(猪)真皮在临床开始广泛应用并取得一定成效。本文将就脱细胞异种(猪)真皮基质的临床应用与研究进展作一综述。 　　脱细胞异种(猪)真皮基质的研制方法　　脱细胞异种(猪)真皮基质的研制方法 　　国内目前使用的基本是由江苏启东生物材料研究所提供的，已形成较规范的制备方法。具体过程如下：用50kg左右无皮肤疾患的健康小白猪，活杀后剃毛，取下大张皮肤，用电动劈皮机制成0.3～0.5mm的断层皮片，用洗必泰溶液消毒后，用无菌高渗盐水(30g/L)浸泡24小时，脱去表皮，经戊二醛(2g/L浸泡10分钟)交联后，以含有胰蛋白酶为主要原料的脱细胞液进行处理，生理盐水冲洗，再制成网状包装保存备用。　　国内目前使用的基本是由江苏启东生物材料研究所提供的，已形成较规范的制备方法。具体过程如下：用50kg左右无皮肤疾患的健康小白猪，活杀后剃毛，取下大张皮肤，用电动劈皮机制成0.3～0.5mm的断层皮片，用洗必泰溶液消毒后，用无菌高渗盐水(30g/L)浸泡24小时，脱去表皮，经戊二醛(2g/L浸泡10分钟)交联后，以含有胰蛋白酶为主要原料的脱细胞液进行处理，生理盐水冲洗，再制成网状包装保存备用。 　　脱细胞异种(猪)真皮基质生物学特性　　脱细胞异种(猪)真皮基质生物学特性 　　猪与人类在生物种属上具有较高同源性，异种猪皮在结构上接近于人皮肤。异种或异体皮肤移植后出现排异反应多是因为细胞成分的存在，包括表皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等。而脱细胞异种(猪)真皮基质在制作中经脱细胞和交联处理除去了可被宿主识别的细胞成分，只保留非细胞成分的细胞外基质、蛋白胶原等，抗原性大大减弱甚至无免疫�原性�。　　猪与人类在生物种属上具有较高同源性，异种猪皮在结构上接近于人皮肤。异种或异体皮肤移植后出现排异反应多是因为细胞成分的存在，包括表皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等。而脱细胞异种(猪)真皮基质在制作中经脱细胞和交联处理除去了可被宿主识别的细胞成分，只保留非细胞成分的细胞外基质、蛋白胶原等，抗原性大大减弱甚至无免疫�原性�。 　　真皮在皮肤移植和创面稳定性上有很重要的作用，创面愈合后的质量及瘢痕形成情况与移植皮片中真皮含量有关，含量越高，创面瘢痕形成量越少，挛缩程度越轻［2］。脱细胞异种(猪)真皮基质能为创面提供大量的真皮组织，且其胶原纤维排列规则，能够减少瘢痕形成和挛缩畸形发生率。　　真皮在皮肤移植和创面稳定性上有很重要的作用，创面愈合后的质量及瘢痕形成情况与移植皮片中真皮含量有关，含量越高，创面瘢痕形成量越少，挛缩程度越轻［2］。脱细胞异种(猪)真皮基质能为创面提供大量的真皮组织，且其胶原纤维排列规则，能够减少瘢痕形成和挛缩畸形发生率。 　　脱细胞异种(猪)真皮基质的临床应用　　脱细胞异种(猪)真皮基质的临床应用 　　对烧伤创面的重建作用：烧伤创面处理是烧伤治疗的主要内容。传统包扎治疗烧伤创面换药次数多，增加了患者痛苦和医生工作量，因此寻求一种能够覆盖创面而中间不需要太多换药的外用敷料是临床医生追求的目标。既往曾应用同种异体皮进行移植覆盖创面，但面临排异反应，传播疾病的潜在风险，且来源有限，价格昂贵，不利于临床推广。胡泉等通过临床上应用脱细胞异种(猪)真皮基质与人脱细胞真皮基质的对比研究发现脱细胞异种(猪)真皮基质加自体刃厚皮与人脱细胞真皮基质加自体刃厚皮移植修复效果无明显差异［3］。且脱细胞异种(猪)真皮基质来源广泛，价格低廉，因而近年来学者更倾向于用脱细胞异种(猪)真皮基质治疗烧伤创面的研究。阮树斌等用该真皮基质早期一次性包扎大面积浅Ⅱ度和深Ⅱ度偏浅创面实验研究证实［4］，应用猪脱细胞真皮基质后创面愈合时间较传统聚维酮碘换药时间短，患者治疗过程中疼痛感轻，创面感染率低，愈合时间短。冯祥生等研究发现该基质对于深Ⅱ度创面具有良好的黏附性和保湿性(保湿时间8～10天)能够促进创面上皮化［5］，愈合时间缩短减少瘢痕增生。脱细胞异种(猪)真皮基质含有丰富的脯氨酸和锌，能够供应创面修复所需的营养因而能够促进创面的快速愈合。　　对烧伤创面的重建作用：烧伤创面处理是烧伤治疗的主要内容。传统包扎治疗烧伤创面换药次数多，增加了患者痛苦和医生工作量，因此寻求一种能够覆盖创面而中间不需要太多换药的外用敷料是临床医生追求的目标。既往曾应用同种异体皮进行移植覆盖创面，但面临排异反应，传播疾病的潜在风险，且来源有限，价格昂贵，不利于临床推广。胡泉等通过临床上应用脱细胞异种(猪)真皮基质与人脱细胞真皮基质的对比研究发现脱细胞异种(猪)真皮基质加自体刃厚皮与人脱细胞真皮基质加自体刃厚皮移植修复效果无明显差异［3］。且脱细胞异种(猪)真皮基质来源广泛，价格低廉，因而近年来学者更倾向于用脱细胞异种(猪)真皮基质治疗烧伤创面的研究。阮树斌等用该真皮基质早期一次性包扎大面积浅Ⅱ度和深Ⅱ度偏浅创面实验研究证实［4］，应用猪脱细胞真皮基质后创面愈合时间较传统聚维酮碘换药时间短，患者治疗过程中疼痛感轻，创面感染率低，愈合时间短。冯祥生等研究发现该基质对于深Ⅱ度创面具有良好的黏附性和保湿性(保湿时间8～10天)能够促进创面上皮化［5］，愈合时间缩短减少瘢痕增生。脱细胞异种(猪)真皮基质含有丰富的脯氨酸和锌，能够供应创面修复所需的营养因而能够促进创面的快速愈合。 　　瘢痕整形中的应用：异种脱细胞真皮基质能够提供大量的真皮组织，且胶原纤维束排列规则，是覆盖瘢痕切除后创面较理想的真皮替代物。冯祥生、陈晓东等对瘢痕增生患者切除瘢痕后在脂肪层或深筋膜层上运用一步法［6］、二步法进行脱细胞异种(猪)真皮基质进行复合移植，术后90天两组均愈合较好，无明显瘢痕增生挛缩畸形。表明脱细胞异种(猪)真皮基质作为真皮替代物有利于基底膜重建，能发挥真皮性支架作用并起“真皮模板”作用［7］。　　瘢痕整形中的应用：异种脱细胞真皮基质能够提供大量的真皮组织，且胶原纤维束排列规则，是覆盖瘢痕切除后创面较理想的真皮替代物。冯祥生、陈晓东等对瘢痕增生患者切除瘢痕后在脂肪层或深筋膜层上运用一步法［6］、二步法进行脱细胞异种(猪)真皮基质进行复合移植，术后90天两组均愈合较好，无明显瘢痕增生挛缩畸形。表明脱细胞异种(猪)真皮基质作为真皮替代物有利于基底膜重建，能发挥真皮性支架作用并起“真皮模板”作用［7］。 　　肉芽创面中的应用：肉芽创面应用脱细胞异种(猪)真皮基质亦能收到很好的效果，能够减少瘢痕增生，减轻色素沉着等。刮除肉芽组织和纤维板，充分清洗和完全止血后进行自体微粒皮和脱细胞异种猪真皮基质复合移植，复合皮成活率达到90%以上，观察数月创面瘢痕增生少，触之柔软，肤色黄白，表面亦光滑［8］。徐俊赐等对11例关节处的瘢痕切除后移植异种(猪)脱细胞真皮基质［9］，再植自体薄皮片，10例创面皮片成活，创面表面光滑，平整，无挛缩，关节功能正常。　　肉芽创面中的应用：肉芽创面应用脱细胞异种(猪)真皮基质亦能收到很好的效果，能够减少瘢痕增生，减轻色素沉着等。刮除肉芽组织和纤维板，充分清洗和完全止血后进行自体微粒皮和脱细胞异种猪真皮基质复合移植，复合皮成活率达到90%以上，观察数月创面瘢痕增生少，触之柔软，肤色黄白，表面亦光滑［8］。徐俊赐等对11例关节处的瘢痕切除后移植异种(猪)脱细胞真皮基质［9］，再植自体薄皮片，10例创面皮片成活，创面表面光滑，平整，无挛缩，关节功能正常。 　　创面凹陷与组织缺损修复中应用：患者体表组织缺损或凹陷修复的关键是寻找填充材料，理想的材料应是组织相容性好，吸收少，易塑型等。传统治疗多采用脂肪瓣，但其易吸收、不易塑型等缺点一直困扰临床应用。而脱细胞异种(猪)真皮基质的出现开辟了新的应用前景，极大的促进了组织缺损或凹陷的修复。马来祥等研究表明真皮基质能够填充修复体表不同部位的组织缺损或凹陷［10］，具有良好的临床应用效果。脱细胞异种真皮基质的吸收率(平均＜30%)明显低于脂肪瓣的吸收率(60%)［11］，表现出相容性好，质地柔软，与人体组织十分相近等优势，非常适合作为填充材料用于体表软组织缺损或凹陷等的修复，如鼻中隔穿孔的修复等［12］。　　创面凹陷与组织缺损修复中应用：患者体表组织缺损或凹陷修复的关键是寻找填充材料，理想的材料应是组织相容性好，吸收少，易塑型等。传统治疗多采用脂肪瓣，但其易吸收、不易塑型等缺点一直困扰临床应用。而脱细胞异种(猪)真皮基质的出现开辟了新的应用前景，极大的促进了组织缺损或凹陷的修复。马来祥等研究表明真皮基质能够填充修复体表不同部位的组织缺损或凹陷［10］，具有良好的临床应用效果。脱细胞异种真皮基质的吸收率(平均＜30%)明显低于脂肪瓣的吸收率(60%)［11］，表现出相容性好，质地柔软，与人体组织十分相近等优势，非常适合作为填充材料用于体表软组织缺损或凹陷等的修复，如鼻中隔穿孔的修复等［12］。 　　优势与不足　　优势与不足 　　脱细胞异种(猪)真皮基质实质为一种胶原蛋白膜，给上皮提供了一个有营养的蛋白基质，其抗原性较低，能迅速血管化，能加强创面抗感染效果;且有完整的基底膜，组织相容性好，亲和性强，是一种适宜的皮肤组织工程支架材料［13］。异种(猪)脱细胞真皮基质构建了创面较理想的修复环境，但临床实践时间比较短，仍具有一定抗原性存在，不能完全代替自体皮肤，缺乏器官特有的附属(如毛囊和腺体等)结构和功能［14］，其远期应用效果需要更进一步观察研究。　　脱细胞异种(猪)真皮基质实质为一种胶原蛋白膜，给上皮提供了一个有营养的蛋白基质，其抗原性较低，能迅速血管化，能加强创面抗感染效果;且有完整的基底膜，组织相容性好，亲和性强，是一种适宜的皮肤组织工程支架材料［13］。异种(猪)脱细胞真皮基质构建了创面较理想的修复环境，但临床实践时间比较短，仍具有一定抗原性存在，不能完全代替自体皮肤，缺乏器官特有的附属(如毛囊和腺体等)结构和功能［14］，其远期应用效果需要更进一步观察研究。 　　综上，理想的皮肤替代物应包含表皮及真皮结构，因此需要我们深入研究更好的适用于创面快速修复而又减少瘢痕增生的创面覆盖物。近年来干细胞研究与组织工程技术的快速发展可以利用表皮干细胞与异种(猪)真皮基质的支架作用体外构建新型的结构和功能更加完善的复合皮修复创面，这将是未来创面敷料修复发展方向。　　综上，理想的皮肤替代物应包含表皮及真皮结构，因此需要我们深入研究更好的适用于创面快速修复而又减少瘢痕增生的创面覆盖物。近年来干细胞研究与组织工程技术的快速发展可以利用表皮干细胞与异种(猪)真皮基质的支架作用体外构建新型的结构和功能更加完善的复合皮修复创面，这将是未来创面敷料修复发展方向。 　　参考文献�　　参考文献� 　　1 Wainwright DJ.Use of an acellular allograft dermal matrix(AlloDerm)in the management of ful-thickness burns［J］.Burns,1995,21:243-248.�　　1 Wainwright DJ.Use of an acellular allograft dermal matrix(AlloDerm)in the management of ful-thickness burns［J］.Burns,1995,21:243-248.� 　　2 潘圣鑫.异种(猪)脱细胞真皮基质的研究及临床应用现状［J］.广西医学,2004,26(6):843-845.�　　2 潘圣鑫.异种(猪)脱细胞真皮基质的研究及临床应用现状［J］.广西医学,2004,26(6):843-845.� 　　3 胡泉,温学辉,柴家科.异种(猪)脱细胞真皮基质与人脱细胞真皮基质临床应用的比较.军医进修学院学报,2006,27(6).�　　3 胡泉,温学辉,柴家科.异种(猪)脱细胞真皮基质与人脱细胞真皮基质临床应用的比较.军医进修学院学报,2006,27(6).� 　　4 阮树斌,冯祥生,陈晓东,等.脱细胞(猪)基质早期封闭浅度大面积烧伤创面的临床研究［J］.中华损伤与修复杂志(电子版),2008,3(2):177-182.�　　4 阮树斌,冯祥生,陈晓东,等.脱细胞(猪)基质早期封闭浅度大面积烧伤创面的临床研究［J］.中华损伤与修复杂志(电子版),2008,3(2):177-182.� 　　5 冯祥生,谭家驹,阮树斌,等.脱细胞猪真皮基质覆盖治疗人深Ⅱ度烧伤［J］.第一军医大学学报,2002,22(9):844-848.�　　5 冯祥生,谭家驹,阮树斌,等.脱细胞猪真皮基质覆盖治疗人深Ⅱ度烧伤［J］.第一军医大学学报,2002,22(9):844-848.� 　　6 冯祥生,陈晓东,谭家驹,等.异种(猪)脱细胞真皮基质在瘢痕整形中的应用［J］.中华整形外科杂志,2007,23(5):391-393.�　　6 冯祥生,陈晓东,谭家驹,等.异种(猪)脱细胞真皮基质在瘢痕整形中的应用［J］.中华整形外科杂志,2007,23(5):391-393.� 　　7 陈璧,姜笃银,贾赤宇,等.复合皮移植的实验研究与临床应用［J］.中华烧伤杂志,2004,20(6):347-350.�　　7 陈璧,姜笃银,贾赤宇,等.复合皮移植的实验研究与临床应用［J］.中华烧伤杂志,2004,20(6):347-350.� 　　8 肖调立,曾麦秋,周阳五,等.异种(猪)脱细胞真皮与自体刃厚皮片复合移植在肉芽创面的应用［J］.现代医药卫生,2001,17(4):256-256.�　　8 肖调立,曾麦秋,周阳五,等.异种(猪)脱细胞真皮与自体刃厚皮片复合移植在肉芽创面的应用［J］.现代医药卫生,2001,17(4):256-256.� 　　9 徐俊赐,谢�衷,潘银根.异种脱细胞真皮与自体薄皮片联合移植临床研究［J］.广东医学,2001,22(12):1111-1113.�　　9 徐俊赐,谢�衷,潘银根.异种脱细胞真皮与自体薄皮片联合移植临床研究［J］.广东医学,2001,22(12):1111-1113.� 　　10 马来祥,胡寅,陈光华.脱细胞异种(猪)真皮基质修复体表组织缺损凹陷的临床作用［J］.江苏医药,2006,32(12):1179-1179.�　　10 马来祥,胡寅,陈光华.脱细胞异种(猪)真皮基质修复体表组织缺损凹陷的临床作用［J］.江苏医药,2006,32(12):1179-1179.� 　　11 Kononas TC,Bucky LP,Hurley C,et al.The fate of suctioned andsurgi-cally removed far after reimplantation for soft-tissue augmentation:a vol-umetric and histologic study in rabbit［J］.Plast Reconstr Surg,1993,91:763-768.�　　11 Kononas TC,Bucky LP,Hurley C,et al.The fate of suctioned andsurgi-cally removed far after reimplantation for soft-tissue augmentation:a vol-umetric and histologic study in rabbit［J］.Plast Reconstr Surg,1993,91:763-768.� 　　12 Rohrich RJ,Reagan BJ,Adams WP,et al.Early results of vermilion lip augmentation using acellular allogeneic dermis:an adjjunct in facial rejuvenation［J］.Plast Reconstr Surg,2000,105:409-416.�　　12 Rohrich RJ,Reagan BJ,Adams WP,et al.Early results of vermilion lip augmentation using acellular allogeneic dermis:an adjjunct in facial rejuvenation［J］.Plast Reconstr Surg,2000,105:409-416.� 　　13 陈斌,许琰,付晋凤,等.人和猪脱细胞真皮体外构建活性真皮替代物的对比研究［J］.昆明医学院学报,2008,29(1):12-16.�　　13 陈斌,许琰,付晋凤,等.人和猪脱细胞真皮体外构建活性真皮替代物的对比研究［J］.昆明医学院学报,2008,29(1):12-16.� 　　14 姜笃银,付小兵.器官特异性无细胞基质移植物的研究进展［J］.中华外科杂志,2003,41(7):548-551.�　　14 姜笃银,付小兵.器官特异性无细胞基质移植物的研究进展［J］.中华外科杂志,2003,41(7):548-551.� 　　　　 　　基金项目 广西壮族自治区教育厅资助项目，项目编号：200911MS37�　　基金项目 广西壮族自治区教育厅资助项目，项目编号：200911MS37�

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