胶冻样类芽孢杆菌CX-9菌株肥料制剂的研制及在烟草上的应用

２０１３矩河北大学学报（自然科学版）２０１３第３３卷第４期ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｂｅｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ）Ｖ０１．３３Ｎｏ．４ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００—１５６５．２０１３．０４．０１０

胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ一９菌株肥料制剂的

研制及在烟草上的应用

张爱民１’２，张双凤２，赵钢勇２，朱宝成１，李淑娜

（１．河北农业大学生命科学学院．河北保定０７１００１；２．河北大学生物技术中心，河北保定０７１００２）

摘要：为研究胶冻样类芽孢杆茵ＣＸ一９茵株肥料制荆对烟草品质的改善和产量的提高，通过自行分离的胶冻样类芽孢杆茵ＣＸ一９茵株的发酵、发酵液离心和后处理，研制出含茵量高达５０．０×１０８／ｇ的肥料制剂，并利用该肥料制剂在贵州烟草上进行了减少烟草专用肥的接种实验．研究结果表明：每公顷施用该肥料制剂３０ｋｇ，能促进烟株生长发育，提高烟叶产量、产值、均价、土等烟叶率和中上等烟叶率，改善烟叶内在化学品质，大大提高烟叶质量等级，同时底施该肥料制剂，还可减少２０％的基肥施用，降低成本投入，增加烟农的收益．因此，该胶冻样类芽孢杆茵ＣＸ－９菌株在烤烟生产上具有一定的应用价值．

关键词：胶冻样类芽孢杆菌；肥料制剂；田间实验；烟草

中图分类号：Ｑ９３文献标志码：Ａ文章编号：１０００—１５６５（２０１３）０４—０３８７—０７

Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎｔｏｂａｃｃｏａｎｄｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆ

ｔｈｅｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒａｇｅｎｔｏｆＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓｕｓＣＸ＿・９ｓｔｒａｉｎ

ＺＨＡＮＧＡｉｍｉｎｌ”。ＺＨＡＮＧＳｈｕａｎｇｆｅｎ９２。ＺＨＡＯＧａｎｇｙｏｎ９２，ＺＨＵＢａｏｃｈｅｎ９１，ＬＩＳｈｕｎａｌ

（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＨｅｂｅｉ，Ｂａｏｄｉｎｇ０７１００１，Ｃｈｉｎａ；

２．ＣｅｎｔｅｒｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｅｂｅｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂａｏｄｉｎｇ０７１００２，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＩｎｏｒｄｅｒｔＯｓｔｕｄｙｔｈｅｉｍｐｒｏｖｉｎｇｏｆｔｏｂａｃｃｏｑｕａｌｉｔｙａｎｄｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｏｆｔｏｂａｃｃｏｙｉｅｌｄｂｙＰａｅｎｉ—ｂａｃｉｌｌｕｓｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓｕｓＣＸ－９ｓｔｒａｉｎ，ａｋｉｎｄｏｆｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒａｇｅｎｔｈａｓｂｅｅｎｐｒｏｄｕｃｅｄ．Ｔｈｅｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒａｇｅｎｔｗａｓｇｅｔｂｙｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ，ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎａｎｄｄｒｙｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓｏｆＰ．ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓｕｓＣＸ－９ｓｔｒａｉｎａｎｄｉｔｓｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｍｏｕｎｔｃａｎｂｅｒｅａｃｈｅｄｔｏ５０．０×１０８／ｇ．ＴｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｔｏｒｅｄｕｃｅｔｏｂａｃｃｏｓｐｅｃｉｆｉｃｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒｗｅｒｅｃａｒｒｉｅｄｏｎｉｎｔｏｂａｃｃｏｆｉｅｌｄｉｎＧｕｉｚｈｏｕｐｒｏｖｉｎｃｅ．Ａｓａｒｅｓｕｌｔ，ｗｉｔｈｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆ３０ｋｇｐｅｒｈｅｃｔａｒｅ，ｔｈｅｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒａｇｅｎｔｈａｄｔｈｅａｂｉｌｉｔｙｏｆｐｒｏｍｏｔｉｎｇｔｏｂａｃｃｏｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈ，ｄｅｓｐｉｔｅｏｆｔｈｉｓ，ｔｈｅｔｏｂａｃｃｏｙｉｅｌｄ，ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｖａｌｕｅ，ａｖｅｒａｇｅｐｒｉｃｅｏｆｔｏｂａｃｃｏｌｅａｆａｎｄｒａｔｅｏｆｓｕｐｅｒｉｏｒｔｏｂａｃｃｏｗｅｒｅｐｒｏｍｏｔｅｄ，ａｎｄｔｏｂａｃｃｏｉｎ—ｔｅｒｎａｌｑｕａｌｉｔｙｏｆｃｈｅｍｉｓｔｒｙｗｅｒｅｉｍｐｒｏｖｅｄ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｉｔｃｏｕｌｄｒｅｄｕｃｅｔｏｂａｃｃｏｂａｓｉｃｆｅｒｔｉｌｉｚ—ｅｒａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ２０％．ＳｏｔｈｅｃＯＳｔＳｏｆｆａｒｍｅｒｓｃｏｕｌｄｂｅｒｅｄｕｃｅｄｄｉｒｅｃｔｌｙ，ａｎｄｔｈｅｉｎｃｏｍｅｃｏｕｌｄｂｅｉｎｃｒｅａｓｅｄ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒａｇｅｎｔｏｆＰ．ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓｕｓＣＸ一９ｓｔｒａｉｎｉｎｔｏｂａｃｃｏｐｌａｎｔｉｎｇｈａｖｅｃｅｒ—ｔａｉｎｖａｌｌｌｅ－；ｎ—ｕｓｅ．

收稿日期：２０１２—０９—１２

基金项目：河北省科技支撑项目（０６２０７１２５Ｄ－２）

第一作者：张爱１晃（１９６７一），男，河北武邑人，河北大学研究员，河北农业大学在读博士，主要从事农业微生物及土壤修复剂的研究．Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇａｍ２００８＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ．ｃｎ

河北大学学报（自然科学版）第３３卷

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓｕｓ；ｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒａｇｅｎｔ；ｆｉｅｌｄｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ；ｔｏｂａｃｃｏ

硅酸盐细菌是一类能分解硅酸盐矿物的细菌的俗称，１９１２年苏联学者亚历山罗夫口］首先从蚯蚓肠道中分离出一株细菌，发现其能分解长石、云母、土壤矿物等铝硅酸盐类的原生态矿物，使土壤中难溶性Ｋ，Ｐ，Ｓｉ等转变为可溶性物质供植物生长利用．１９３９年，研究人员直接从土壤中分离出这种细菌并命名为硅酸盐细菌（Ｓｉｌｉｃａｔｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）［２］．Ａｌｅｘａｎｄｒｏｖ也报道，从岩石材料中分离出一株产黏液的能分解硅酸盐的细菌，并定名为胶质芽孢杆菌硅酸盐亚种（Ｂａｃｉｌｌｕｓｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓｕｓｓｕｂｓｐ．ｓｉｌｉｃｅｕｓ），但限于当时的条件未对其作进一步研究。因此该种的分类地位长期以来未得到国际承认．

１９９３年，研究人员经过对芽孢杆菌属５１株菌种的１６ＳｒＤＮＡ序列测定和比较分析，将其分类命名为类芽孢杆菌属（Ｐ口ｅ挖ｉ施ｆ删“ｓ）［３］．类芽孢杆菌属的菌株分布广泛，可以从土壤、水和不同的植物根际和植物体内分离得到［４。５］，该属菌株的重要特点是大多产生具有拮抗作用二级代谢产物［６］，胶冻样类芽孢杆菌也归为该属．但是该菌株不仅具有以上特点，同时还具有解钾、解磷、固氮等多种作用，在农业生产上的应用可以提高作物产量，改善农产品品质［７］．

由于胶冻样类芽孢杆菌能够分解含钾硅酸盐矿物，因此以此菌株为主要活性成分俗称为生物钾肥的产品已在国内外被广泛应用．中国２０世纪５０年代推广使用的硅酸盐细菌制剂（生物钾肥）曾带来了良好的增产效果．该菌株在原苏联也进行了广泛研究．近年来，国内大量田间实验表明生物钾肥对各种喜钾作物如甘薯、烟草、水稻等有明显的增产作用［８。９］．

硅酸盐细菌菌剂一直采用传统工艺制造，限制了该项技术的推广和应用．本文采用新分离的胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株，通过发酵、离心和喷雾干燥工艺处理，并与草炭载体复配，研制出了含菌量高达５０．０×１０８／ｇ的肥料制剂．应用该制剂在中国烟草主产区贵州省的烟草上进行了大田对比实验，实验结果表明：施用该肥料制剂可减少传统烟草种植模式专用肥的用量，并可提高烟草产量，改善烟草品质．

１材料和方法

１．１供试菌种

胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株，河北农业大学农业微生物学研究室分离保藏．菌株分离自陕西小麦田．１．２供试作物

烟草品种一云８７，为贵州省目前主要栽培品种．

１．３培养基

１．３．１斜面培养基（ｇ／Ｌ）

酵母粉７．０，酵母膏０．７，蛋白冻１０．０，糊精２．０，磷酸氢二钠１．０，硫酸锌０．２，硫酸钙０．２，琼脂２０．０．１．３．２种子培养基（ｇ／Ｌ）

蔗糖１０．ｏ，硫酸铵１．ｏ，磷酸氢二钾２．ｏ，酵母膏０．４，硫酸锰２．ｏ，醋酸钙１．ｏ，三氯化铁０．２，ｐＨ７．ｏ～７．２．

１．３．２发酵培养基（ｇ／Ｌ）

磷酸氢二钾２．０，蔗糖２０．０，硫酸锰２．０，硫酸铵０．８，醋酸钙１．５，酵母膏０．５，ｐＨ７．ｏ～７．２．

１．４胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ一９菌株肥料制剂的研制

１．４．１茵种的活化

将胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ一９菌株保存菌种转接至斜面培养基，３０℃恒温培养４８ｈ．

１．４．２种子培养

２５０ｍＬ三角瓶中分装种子培养基，１２１℃，３０ｍｉｎ灭菌，冷却至室温后接种胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ一９菌株菌种，恒温摇床振荡培养，培养条件：温度３０℃，转速２００ｒ／ｒａｉｎ，周期１４～１８ｈ．

种子含菌量的测定方法（血球计数板法）：取培养（发酵）到终点的培养液１．０ｍＬ，加到含有９．０ｍＬ无菌水

第４期张爱民等：胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株肥料制剂的研制及在烟草上的应用

的试管中，充分振荡１ｍｉｎ，再按照同样方法加到第２支试管中，充分振荡１ｍｉｎ后，用滴管加到血球计数板计数室内，沉淀片刻后，在显微镜高倍镜下数５个中方格的菌体数量计数，则培养液的含菌量按如下公式计算：

含菌量一（５个中方格菌数之和）÷５÷４×１０８／ｍＬ．

１．４．３发酵实验

用５０Ｌ全自动发酵罐进行实验，培养基为发酵培养基，装料系数为７０％，１２１℃灭菌３０ｒａｉｎ，冷却至室温后，负压法接种液体菌种．

发酵液含菌量的测定方法（活菌计数法）：分别吸取５．０ｍＬ发酵液加入４５ｍＬ无菌水中，按体积比１：１０进行梯度稀释，分别得到１０～，１０一，１０～，１０～，１０一，１０～，１０＿７稀释度的菌悬液．然后每个样品取３个连续适宜的稀释度，用０．５ｍＬ无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液０．１ｍＬ，均匀地涂布于检测培养基平板上．每一稀释度重复３次，同时以无菌水作空白对照，３２℃培养４８ｈ，以出现２０～３００个菌落数的稀释度的平板为计数标准，分别统计有效活菌数．

含菌量（／ｍＬ）一（３个平板菌落数之和）÷３×１０×稀释倍数．

１．４．４ＣＸ一９茵株肥料制剂的制备及质量检测［１０］

将ＣＸ一９菌株３批次发酵的发酵液收集在一个容器中，称重后离心，然后进行喷雾干燥．计数后与适量草炭混合，研制出高含菌量的肥料制剂．依据ＧＢ２０２８７－－２００６《农用微生物菌剂》进行产品检验．

肥料制剂生物量的测定方法（平板计数法）：准确称取１０．０ｇ肥料制剂加入１００ｍＬ无菌水中，按体积比１：１０进行梯度稀释，分别得到１０～，１０～，１０～，１０一，１０一，１０～，１０－７稀释度的菌悬液．然后每个样品取３个连续适宜的稀释度，用０．５ｍＬ无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液０．１ｍＬ，均匀地涂布于检测培养基平板上．每一稀释度重复３次，同时以无菌水作空白对照，３２℃培养４８ｈ，以出现２０～３００个菌落数的稀释度的平板为计数标准，分别统计有效活菌数．

生物量（／ｇ）一（３个平板菌落数之和）÷３×１０×稀释倍数．

１．５ＣＸ－９菌株肥料制剂在烟草上的应用效果

１．５．１试验地基本情况

试验在贵州龙岗烟草综合实验区内进行，质地黏壤，有机质质量分数２．７８％，ｐＨ值６．１２，碱解氮３８．５２ｍｇ／ｋｇ，速效磷３２．８２ｒｎｇ／ｋｇ，速效钾１０８．３６ｍｇ／ｋ，肥力中上等，前茬为水稻．

１．５．２试验设计

采用同田简单对比设计，设２个处理，３次重复．实验面积０．４ｈｍ２，外设保护行．Ｔ（接种）：ＣＸ－９菌株肥料制剂＋４／５常规烤烟专用基肥；ＣＫ（对照）：常规烤烟专用基肥（Ｎ，Ｐ。Ｏ。，Ｋ：Ｏ的质量分数分别为１０％，１５％，１５％），对照和接种的肥料用量见表１．接种方法为用打洞器移栽，将ＣＸ－９菌株肥料制剂和３００ｋｇ干细土混合均匀后放在打洞器底部均匀施到每株烟草穴底部，然后放上烟苗即可．烟草追肥肥料Ｎ，Ｐ。０。，Ｋ：Ｏ的质量分数分别为１０％，１０％，２０％．种植密度为１６５００株／ｈｍ２，行距１１０ａｍ，株距５５

裹１各处理肥料用量

Ｔａｂ．１ＤｏｓＲｇｅｏｆｃｍ．ｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｒｏｕｐｓ

１．５．３物候期的调查及观测

观察记载各处理烤烟的团棵期、现蕾期和打顶期；测定各处理在团棵期和旺长期的株高、茎围、出叶数、最大叶长和叶宽；收获时分别计产．

．３９０．河北大学学报（自然科学版）第３３卷１．５．４田间管理

起垄、施肥、移栽、病虫害防治、中耕、培土上厢、打顶和采烤等按当地优质烟生产技术方案执行．

１．５．５烟叶的化学成分分析

分别取各处理中部烟叶（Ｃ。Ｆ）和上部烟叶（Ｂ。Ｆ）进行化学成分分析．

２结果与分析

２．１

２．１．１ＣＸ一９菌株肥料制剂的研制茵种的活化和转接

将胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株的保藏菌种转接到斜面培养基上，３０℃培养２ｄ，斜面表面变成白色，涂片后，在显微镜下观察，菌体全部变成芽孢，４℃冰箱保存．

２．１．２种子培养

将胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株转接到种子培养基上，培养１２～１４ｈ，取样镜检，菌体成对或单个排列，菌体粗壮，结晶紫染色均匀，ｐＨ６．ｏ～６．３．计数含菌量为２．４×１０８／ｍＬ．

２．１．３发酵培养

将胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株种子培养液，以负压法按７％接种量接种到５０Ｌ发酵罐中，培养条件为；温度３５～３７℃，罐压０．０６ＭＰａ，间歇搅拌，搅拌转速为２００ｒ／ｍｉｎ，通风比为１；（ｏ．３～０．５）（随时间而变化），发酵周期３６～４０ｈ，并进行同步化验分析，ｐＨ值采用在线ｐＨ电极测定，含菌量采用稀释平板法测定，结果见表２．

表２胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株３批次发酵实验结果

Ｔａｂ．２ＲｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｒｅｅｔｉｍｅｓｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｏｆＰａｅｎｂａｃｉｌｌｕｓｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓｕｓＣＸ－９

结果表明，胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株在５０Ｌ发酵罐发酵，３批次结果比较一致，平均含菌量达到７．８×１０８／ｍＬ，芽孢形成率在９５％以上，发酵水平较高．

２．１．４胶冻样类芽孢杆茵ＣＸ－９茵株肥料制剂的检验结果

将３批发酵液收集后离心，并进行喷雾干燥，测定芽孢菌粉的生物量为６０２．４×１０８／ｇ，将菌粉和草炭按照质量比ＩＩ：１进行充分混合，研制出草炭为载体的胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株肥料制剂，按照ＧＢ２０２８７—２００６＜＜农用微生物菌剂》所规定的方法进行相关项目的质量检测，结果见表３．

表３

Ｔａｂ．３ＣＸ－９菌株肥料制剂的检验结果ＴｅｓｔｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓｕｓＣＸ－９

从表３看出，采用草炭为载体制成的胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株肥料制剂成品的含菌量远远高于ＧＢ２０２８７－－２００６＜＜农用微生物菌剂》所规定的技术指标，说明本生产工艺流程生产的肥料制剂符合农业部微

第４期张爱民等：胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株肥料制剂的研制及在烟草上的应用

生物肥料质量标准所规定的的技术指标，肥料制剂的研制方法可行．

２．２胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株肥料制剂在烟草上的应用效果

２．２．１各处理对烤烟生育期的影响

接种胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ一９菌株肥料制剂对烤烟生育期的影响不大，对照与接种处理的烟株均于５月８日移栽，６月１０日进入团棵期，７月５日进入现蕾期，７月１２日进入打顶期．

２．２．２胶冻样类芽孢杆茵ＣＸ－９菌株肥料制剂对烤烟团棵期烟株农艺性状的影响

烟草生长到团棵期时进行相关农艺性状的调查和统计，结果见表４．

表４各处理团棵期烟株农艺性状比较

Ｔａｂ．４Ｃｏｍｐａｒｉｎｇｏｆｔｏｂａｃｃｏｐｌａｎｔｇｒｏｗｉｎｇｃｈａｒａｃｔｅｒｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎｒｅｓｅｔｔｌｉｎｇｓｔａｇｅ

表中数据均为５株的平均值．玎一４时，￡ｏｏｓ一７．７０９，ｔ。。１—２１．９８

从表４得知，接种胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株肥料制剂的烟草株高较对照平均高０．４ｃｍ，叶片数较对照平均多１．０片／株，茎围较对照粗１．０ｃｍ，叶面积较对照增加１１３．６５ｃｍ２．其中对构成烟草产量的主要因素株高和叶面积进行了生物统计，ｔ株高一１９．２６７＞ｔ。。；＝７．７０９，说明接种（Ｔ）与对照（ＣＫ）间达到显著性差异；‘叶面积一２３．９４７７＞ｔ。。。一２１．９８，说明接种与对照问达到极显著性差异．因而烤烟施用该胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株肥料制剂，能促进烟株前期生长发育．

２．２．３胶冻样类芽孢杆茵ＣＸ－９茵株肥料制剂对烤烟旺长期烟株农艺性状的影响

烟株生长到旺长期时进行相关农艺性状的调查和统计，结果见表５．

表５旺长期各处理烟株农艺性状比较

Ｔａｂ．５Ｃｏｍｐａｒｉｎｇｏｆｔｏｂａｃｃｏｐｌａｎｔｇｒｏｗｉｎｇｃｈａｒａｃｔｅｒｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎｖｉｇｏｒｏｕｓｇｒｏｗｉｎｇｓｔａｇｅ

表中数据均为５株的平均值．ｎ３４时，ｔｏ．。５—７．７０９，ｔ０．ｏｌ一２１．９８．

从表５看出，烤烟施用胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株肥料制剂后，烤烟的株高、叶片数、茎围和最大叶叶面积均好于对照．烟株株高较对照多１．６ｃｍ，烟株叶片数较对照多２．０片／株，茎围较对照多０．７ｃｍ．其中对构成烟草产量的主要因素株高和叶面积进行了生物统计，‰高一１９．２６７＞ｔ。．ｏｓ一７．７０９，说明接种（Ｔ）与对照（ＣＫ）间株高达到显著性差异；ｔ叶面积一２３．９４７＞ｔ。．。。一２１．９８，说明接种与对照间叶面积达到及显著性差异，为烟叶产量和品质的提高奠定了基础．

２．２．４胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ一９茵株肥料制荆对烤烟产量和产值的影响

烟叶收获后，进行产量和产值统计，并分析了上中等烟所占比例，结果见表６．

表６不同处理对烤烟产值的影响

Ｔａｂ．６Ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｓｏｎｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｖａｌｕｅｏｆｔｏｂａｃｃｏ结果由贵州省烟草总公司提供．

・３９２・河北大学学报（自然科学版）第３３卷

从表６可见，接种ＣＸ－９菌株肥料制剂烟叶产量为２１８７ｋｇ／ｈｍ２，较对照（ＣＫ）高１４７ｋｇ／ｈｍ２，烟叶产值较对照高４７１１．５元／ｈｍ２，烟叶均价、上等烟率和中上等烟率分别较对照（ＣＫ）高１８元／ｋｇ、７．ｏ％和８．３％．因而烟草施用胶冻样类芽孢杆菌肥料制剂可以提高烟草种植的经济效益．

２．２．５不同处理对烟叶化学成分的影响

烟叶收获后，分别取Ｃ。Ｆ叶片和Ｂ。Ｆ叶片，送贵州省烟草所进行相关化学成分的分析测定，结果见表７．

表７不同处理对烟叶化学成分的影响

Ｔａｂ．７Ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｃｏｎｔｅｎｔｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｔｏｂａｃｃｏｐｌａｎｔｓ

结果由贵州省烟草科学研究所测试中心检测提供

烟叶的化学成分是烟叶香味风格和品质特性形成的物质基础，烟叶香味风格是烟叶内在化学成分平衡的综合体现［１１。．烟碱是影响烟叶品质的重要因素之一，优质烟叶要保证一定的烟碱含量‘１２］．总氮质量分数一般为１．５％～３．５％，以２．５％最佳，适宜的氮碱质量比最好接近１．０．还原糖对烟叶品质起平衡作用，一般要求质量分数为１６％～２２％口３｜．烟叶氯质量分数以０．３％～ｏ．８％为宜‘１４－１５］，烟叶含氯量增加，糖类代谢受阻，淀粉积累过多．

烟叶的内在质量是判断烟叶质量好坏的主要依据，主要包括香气、杂气、吃味、劲头、刺激性、浓度、余味等．根据国内优质烟叶的评价，质量好的烟叶样品应还原糖含量较高，总氮含量较低，烟碱含量适中，Ｋ。Ｏ含量较高，两糖差值小，蛋白质含量较低，糖碱比、钾氯比、氮碱比均较高．

从还原糖上看，ＣｓＦ处理（Ｔ）较对照高８．８８％，Ｂ。Ｆ处理（Ｔ）较对照（ＣＫ）高１．３９％，施用ＣＸ一９肥料制剂的ＣｓＦ和ＢｚＦ的还原糖含量均高于对照．

从总氮上看，ＣｓＦ总氮处理（Ｔ）较对照低０．５７％，Ｂ。Ｆ总氮处理（Ｔ）较对照（ＣＫ）低１．０６％，施用ＣＸ一９肥料制剂的Ｃ。Ｆ和Ｂ２Ｆ的总氮含量均低于对照．

从烟碱含量上看，施用ＣＸ一９肥料制剂的Ｃ。Ｆ和Ｂ。Ｆ的烟碱含量均有所降低，但比较适宜，符合优质烟叶的烟碱范围．

从ＫｚＯ含量上分析，ＣｓＦ处理（Ｔ）较对照高０．５６％，Ｂ。Ｆ处理（Ｔ）较对照（ＣＫ）高０．１１％，因而施用ＣＸ一９肥料制剂的Ｃ。Ｆ和Ｂ２Ｆ的Ｋ。０含量均高于对照．

从糖碱质量比、钾氯质量比和氮碱质量比上看，施用ＣＸ一９肥料制剂的Ｃ。Ｆ和Ｂ。Ｆ的三者比值均比对照高，因而烟叶品质较好．

从以上５项优质烟叶的评价上看，施用ＣＸ一９肥料制剂可明显提高烟叶的内在质量．

３结论

将胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ一９菌株进行发酵、离心及干燥处理研制出含菌量高达５０．０×１０８／ｇ的高生物量菌粉（肥料制剂），高于ＧＢ２０２８７－－２００６（（农用微生物菌剂》所规定的技术指标，证明该生产工艺生产的肥料制剂路线可行．

在烟草上施用胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ一９菌株肥料制剂，可减少２０％的烟草专用基肥用量，尽管对烤烟进入各个生育期的时间影响差异不大，但能促进烟株生长发育，对提高烟叶产量、产值、均价、上等烟叶率和中上等烟叶率的作用明显．从还原糖上看，Ｃ。Ｆ处理（Ｔ）较对照高８．８８％，Ｂ。Ｆ处理（Ｔ）较对照（ＣＫ）高１．３９％，施用ＣＸ一９肥料制剂的ＣｓＦ和ＢｚＦ的还原糖含量均高于对照；从总氮上比较，Ｃ。Ｆ处理（Ｔ）较对照低

第４期张爱民等：胶冻样类芽孢杆菌ＣＸ－９菌株肥料制剂的研制及在烟草上的应用．３９３．０．５７％，Ｂ２Ｆ处理（Ｔ）较对照（ＣＫ）低１．０６％，施用ＣＸ一９肥料制剂的Ｃ。Ｆ和Ｂ。Ｆ的总氮含量均低于对照；从烟碱含量上看，施用ＣＸ一９肥料制剂的Ｃ。Ｆ和ＢｚＦ的烟碱含量均有所降低，但比较适宜，符合优质烟叶的烟碱范围；从ＫｚＯ含量上分析，Ｃ。Ｆ处理（Ｔ）较对照高０。５６％，ＢｚＦ处理（Ｔ）较对照（ＣＫ）高０。１１％，施用ＣＸ一９肥料制剂的Ｃ。Ｆ和ＢｚＦ的Ｋ：０含量均高于对照；从糖碱比、钾氯比和氮碱比上分析，施用ＣＸ－９肥料制剂的Ｃ。Ｆ和ＢｚＦ的三者比值均比对照高，因而烟叶品质较好．从以上５项优质烟叶的评价上看，施用ＣＸ一９肥料制剂可明显提高烟叶的内在质量．

该肥料制剂对于提高烟草品质的的作用机理有待进一步探讨．

参考文献：

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胶冻样类芽孢杆菌CX-9菌株肥料制剂的研制及在烟草上的应用

作者：

作者单位：张爱民， 张双凤， 赵钢勇， 朱宝成， 李淑娜， ZHANG Aimin， ZHANG Shuangfeng， ZHAO Gangyong，ZHU Baocheng， LI Shuna张爱民,ZHANG Aimin(河北农业大学生命科学学院,河北保定 071001;河北大学生物技术中心,河北保定

071002)， 张双凤,赵钢勇,ZHANG Shuangfeng,ZHAO Gangyong(河北大学生物技术中心,河北保定,071002)

， 朱宝成,李淑娜,ZHU Baocheng,LI Shuna(河北农业大学生命科学学院,河北保定,071001)

河北大学学报（自然科学版）

Journal of Hebei University(Natural Science Edition)

2013,33(4)刊名：英文刊名：年，卷(期)：

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本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_hebdxxb201304010.aspx