上海地区高龄孕妇羊水染色体核型分析
DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2013.02.027
中国优生与遗传杂志2013年第21卷第2期·41·
上海地区高龄孕妇羊水染色体核型分析
俞
菁,章莉,谭美玉,胡荷宇,侯雅萍,龚(上海市长宁区妇幼保健院检验科,200051)
波
探讨高龄孕妇行羊水染色体分析的必要性。方法通过羊膜腔穿刺术分析上海地区554例高龄孕妇羊
水细胞染色体核型,以1740例唐氏征血清筛查高危的非高龄孕妇作为对照。结果554例高龄孕妇羊水细胞标本中检出染
摘
色体异常核型23例,异常率为4. 15%,显著高于非高龄孕妇染色体异常率。高龄孕妇21三体发生风险与唐氏征血清筛查高危孕妇相同;常染色体三体综合征检出率更胜于后者。结论羊水细胞染色体检查应作为高龄孕妇的常规项目,高龄应作为行胎儿染色体检查的独立指标。
关键词:高龄;羊水;染色体;核型;产前诊断中图分类号:R596. 1文献标识码:B 文章编号:1006-9534(2013)02-0041-02目前越来越多的女性由于各种原因而成为高龄孕妇(ad-vanced matemal age ,AMA ),即孕产妇分娩年龄大于或等于35。但随着女性年龄增长,卵巢逐渐衰老退变,产生的卵子自然老化,发生染色体畸形的机会增多,所以孕产妇年龄愈周岁
大,先天愚型和染色体畸形儿的发病率愈高。目前通过羊膜腔穿刺术进行细胞遗传学检查是产前诊断胎儿染色体异常最
[2]
主要的方法,但由于羊膜腔穿刺术是侵入性检查,存在宫内感染与流产风险,因此很多高龄孕妇对羊水穿刺术是心存芥蒂。且非高龄孕妇须经唐氏征血清筛查高危者方行羊水细胞检查,而高龄孕妇无须唐氏征血清筛查,所以很多高龄孕妇对羊水染色体检查的必要性有所疑问。本文对上海地区高龄孕妇及唐氏征筛查高危妇女进行羊水细胞染色体检查,分析该
探讨地区高龄孕妇先天愚型及其他染色体畸形的发病情况,高龄孕妇行产前羊水染色体分析的必要性。
1资料与方法1. 1
研究对象2006年1月至2011年12月间于我院行羊
平均年龄膜腔穿刺术的高龄孕妇(≥35周岁)共554例,
[1]
要:目的
22. 1
结果
高龄孕妇染色体异常结果
554例高龄孕妇羊水细胞标本中检出染色体异常核型
23例,异常率为4. 15%。其中染色体数目异常为12例,占18三体5异常总数的52. 2%;包括21三体3例(13. 0%)、13三体1例(4. 3%);克氏综合征(Klinefelter 例(21. 7%)、
syndrome )2例(8. 7%);特纳综合征(Turner's syndrome )1例
(4. 3%)。染色体结构异常10例,占异常总数的43. 5%,多9、14、15、22号及Y 染色体。另有真两性态性变异主要是7、
畸形1例,占4. 3%,具体结果见表1。
表1
分类
核型
高龄孕妇23例染色体异常核型
例数
(n =23)
[1**********]21
妊娠结局妊娠终止妊娠终止妊娠终止妊娠终止妊娠终止继续妊娠继续妊娠继续妊娠继续妊娠继续妊娠继续妊娠继续妊娠妊娠终止
XY (XX ),+21染色体数目47,
XY (XX ),+18异常(n =12)47,
47,XX ,+1347,XXY 45,X /46,XX
XX ,inv (7)染色体结构46,
XX (XY ),inv (9)异常(n =10)46,
45,XY ,-14,-21,+t (14;21)46,XX ,var (9)(q11)46,XX ,var (15)(q22)46,XY ,var (22)46,XY ,var (Y )
XX /46,XY 染色体发育46,
异常(n =1)
(36. 8±2. 4)岁,以同期1740例非高龄而唐氏征血清筛查高
平均年龄孕妇(28. 4±2. 9)岁,孕妇均签危孕产妇作为对照,署产前诊断知情同意书。
1. 2研究方法1. 2. 1
羊水收集与处理羊膜腔穿刺术时间为孕18~22w ,
B 超引导下进行穿刺,严格无菌操作。收集羊水20mL ,分别800rpm 离心10min ,弃去上清液,保置于两个无菌离心管中,留2mL 羊水,轻轻混悬细胞,备用接种。1. 2. 2
羊水细胞培养经处理后的羊水细胞悬液分别接种于2种羊水培养基(Gibco ,美国;Biological Industries ,以色
5%CO 2培养8~10天,置37℃、当有大量圆形发亮细胞列),
出现时,加入秋水仙素5μg /mL,作用4~4. 5h 后收获细胞。
1. 2. 3染色体核型分析收获的羊水细胞经低渗、固定、制片后,用胰酶法G 显带作分带处理。用染色体分析仪分析5个核型,计数至少20个细胞,染色体异常至少计数30个细胞,嵌合体计数50个细胞以上。
1. 3统计学分析统计数据应用SPSS 19统计软件进行处
2
率的比较采用χ检验,以P <0.05表明差异有统计学意义。理,
通讯作者:龚波
2. 2高龄孕妇与非高龄孕妇染色体异常比较
对照组1740例非高龄孕妇羊水细胞标本中检出染色体
异常核型36例,异常率为2. 07%。其中21三体14例(38. 9%),性染色体数目异常4例(11. 1%);染色体结构异2、7、9、10、13、14、常17例(47. 2%),多态性变异主要是1、15、18、21号及Y 染色体;另有46,XX ,5q -1例(2. 8%)。
·42·
表2
高龄组
21三体性染色体病染色体结构异常其他非高龄组
21三体性染色体病染色体结构异常其他合计
注:*P <0. 01
2235
59
1704
36*
144171
2294
中国优生与遗传杂志2013年第21卷第2期
高龄孕妇与非高龄孕妇染色体异常率比较
正常核型531
异常核型2334106
1740合计554
发病率约为0. 3‰和0. 1‰,患儿可出现严重的智力低下,并伴有中胚层及其衍化物(如心脏、骨骼、泌尿生殖系统)的明
[6]
显畸形。我们在554例高龄孕妇中检出18-三体综合症5例(0. 9%),13-三体综合症1例(0. 2%),而非高龄孕妇
组中并未检出,结果提示高龄孕妇胎儿常染色体三体综合征发生风险要高于非高龄孕妇。
性染色体病是指性染色体X 或Y 发生数目或发育异常
本研究检出的性染色体病主要有Turner 综合所引起的疾病,
X )、XXY )、X 三体综合征(47,克氏综合征(47,征(45,
XXX )、XX /46,XY )等,真两性畸形(46,患者一般表现为性发育不良、生长发育障碍和轻度智力低下。本研究显示高龄孕妇中性染色体病占染色体病30. 8%(4/13),发生率为0. 7%(4/554);非高龄孕妇组中性染色体病发生率为0. 5%(4/1740),略低于高龄孕妇组,但差异无显著性(P >0. 05)。染色体结构异常中检出较多的为染色体平衡性结构异常,主要包括平衡易位、罗伯逊易位、倒位等,其中以9号染色体倒位最为常见。染色体平衡性结构异常携带者通常无
故表型与智力一般正常。我们在高龄孕妇羊遗传物质丢失,
水中检出平衡性染色体变异10例;非高龄孕妇组检出17
例,两组发生率并无差异(P >0. 05)。一般认为染色体平衡性结构异常是一种多态现象,但其生殖细胞在减数分裂过程中,平衡变异染色体可随机形成多种不同染色体组成的生殖细胞,即使与正常染色体亦可形成不平衡的配子,从而直接
[7]
影响妊娠结果。
综上所述,高龄孕妇羊水细胞染色体异常率高于非高龄21-三体综合征发生风险与唐氏血清筛查高危孕妇相孕妇,
同,且前者常染色体三体综合征检出率更胜于后者,所以羊水细胞染色体检查应作为高龄孕妇的常规项目,高龄应作为行胎儿染色体检查的独立指标。
参
考
文
献
由表2可知,高龄孕妇组染色体异常率为4. 15%,非高
2
龄孕妇组染色体异常率为2. 07%,两者差异显著(χ=7. 274,P <0. 01)。高龄孕妇组与非高龄孕妇组中21三体发生率分别为0. 5%和0. 8%,性染色体病发生率为0. 7%和0. 5%,染色体结构异常发生率为1. 8%和1. 0%,均无统计学差异(P >0. 05)。3讨论
随着社会发展,现代女性生育年龄正趋向于大龄化,然
其卵巢内处于减数分裂前期而随着孕产妇生育年龄的增大,
的初级卵母细胞在体内停留时间也会逐渐增长,加上长期受
内外因素影响,出现卵巢功能退化、卵子不同程度老化等,使其胚胎分裂初期发生染色体异常的机率增加,导致胎儿染色
[3]
体异常的发生率也明显上升。本研究发现上海554例高与其他地区报龄孕妇中染色体异常率为4. 15%(23/554),
[4]
道相近,而显著高于非高龄孕妇的2. 07%(36/1740)(P <0. 01),表明高龄孕妇染色体异常机率高于非高龄孕妇。本研究23例染色体异常患者中染色体疾病共13例,占总异21三体(3常率的56. 5%,按检出率依次为:18三体(5例)、
13三体、Turner 综合征、例)、克氏综合征(2例)、真两性畸形(各1例)。
21-三体综合征(21-trisomy syndrome ),又称唐氏综合征(Down Syndrome ),多由于卵细胞第一次成熟分裂时染色以先天性智力低下及其他严重缺陷如先天体不分离而引起,性耳聋、心脏病、儿童期白血病等为特征,迄今无有效治疗方对家庭和社会都会造成极大的心理和经济负担。本研究法,
在554例高龄孕妇中检出标准型唐氏综合征3例,发生率为0. 54%,高于1. 23‰的群体发病率。在1740例对照组中,检出唐氏综合征14例,发生率为0. 80%,略高于高龄孕妇组,但无统计学差异(P >0. 05),由于对照组均为唐氏征血清学筛查高危孕妇,故提示高龄孕妇与唐氏综合征的发生率有直接的关系,与Evelyne 等报道一致。可见孕妇高龄是唐氏综合征的独立高危因素。
18-三体综合征(18-trisomy syndrome ,Edwards syn-drome )和13-三体综合征(13-trisomy syndrome ,Patau syn-drome )是次于唐氏综合征的常见染色体三体综合征,群体
[5]
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收稿日期:2012-02-15