Lowry法蛋白浓度测定试剂盒使用说明
Lowry 法蛋白浓度测定试剂盒使用说明
货号：PC0030
规格：1000T(微孔)
保存：BSA 蛋白标准品4℃保存有效期至少3个月，-20℃保存有效期至少一年，其他试剂室温保存有效期至少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存，Folin 酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。
产品组成：
Folin 酚甲试剂A Folin 酚甲试剂B Folin 酚乙试剂(1N)
PBS 稀释液
BSA 蛋白标准品(5mg/ml)
100ml ×25ml 20ml 30ml 1ml
产品简介：
Folin-酚试剂法包括两步反应：第一步是在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物；第二步是此络合物将Folin 试剂还原，产生深蓝色，颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5～100µg/ml蛋白质。Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外，不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。
操作说明：
1.根据需要量，取适量Folin 酚甲试剂A 和B 按50:1混合，混合后有效期为24小时，过期失效。
2.根据需要量，取适量BSA 标准品用PBS 稀释稀释10倍至浓度0.5mg/ml。
若采用酶标仪法(96孔)
3.将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到96孔板中，加PBS 补足到20ul。
4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度)，加20ul 到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点误差比较大，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
5.将配好的Folin 酚甲试剂每孔加入200ul，轻轻震动，混匀，室温放置10分钟。
6.各孔加入20微升Folin 酚乙试剂，迅速混匀，37℃放置30分钟。用酶标仪测定A650计算蛋白浓度。
若采用分光光度计法（接上述步骤2）
3.取八支（或者更多）5ml离心管，标号，按下表加入试剂。
4.混匀，37℃放置30分钟。分光光度计测定A650计算蛋白浓度。
相关试剂：
PC0001BSA 标准品（5mg/ml）
PC00155×G250(蛋白定量用)
PC0021BCA 试剂
PC0020BCA 法蛋白浓度测定试剂盒
Folin 酚甲试剂A 100ml×2
Folin 酚甲试剂B 5ml
Folin 酚乙试剂(1N)20ml
PBS 稀释液30ml
BSA 蛋白标准品(5mg/ml) 1ml
PC0010Bradford 法蛋白浓度测定试剂盒
R0010高效RIPA 组织/细胞快速裂解液
PR1600预染低分子量蛋白MARKER
R0050核蛋白抽提试剂盒
P10154×蛋白上样缓冲液（含DTT ）
P1300SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒
D106010×电泳转移缓冲液
PE0010ECL Plus 荧光检测试剂(ECL超敏发光液)
7（样品管1）200ul 适当稀释的样品1
02ml
8（样品管2）200ul 适当稀释的样品202ml
……9（样品管3）
离心管号123456
标准蛋白BSA
040ul 80ul 120ul 160ul 200ul
PBS Folin 酚甲试剂
200ul 2ml
160ul 2ml
120ul 2ml
80ul 2ml
40ul 2ml
02ml
02ml
混匀，室温放置10分钟
Folin 酚乙试剂
200ul
200ul
200ul
200ul
200ul
200ul
200ul
200ul
200ul