酸性磷酸酶染色
【目的】
指导酸性磷酸酶染色检查。
【该SOP 变动程序】
本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。
【用途】
1）高歇病与尼曼—匹克病（神经磷脂病）的鉴别诊断。
2）研究吞噬细胞的吞噬活动网状内皮系统的功能。
3）可用于急性淋巴白血病的病型诊断与预后判断。T —急淋呈+++，限局性
大颗粒；B —急淋与null —急淋的磷酸酶活性弱。
【分布】
正常：仅吞噬细胞和具有吞噬能力的网状内皮细胞具有强的酸性磷酸酶活性，其
他各细胞系皆为阴性反应。
病理：高歇病之波浪细胞呈强阳性反应。尼曼—匹克病之泡沫细胞呈阴性反应。
【试剂配置】
1. 甲醛溶液。
2. 作用液的配置
蒸馏水 74ml
0.05mol/L醋酸缓冲液(PH4.7) 12ml
５％硝酸铅 2ml
3.2%β—甘油磷酸钠 4ml
3. １％硫化铵（须新鲜配置）。
4. ２％甲绿或0.1%沙黄溶液。
【染色步骤】
1. 新鲜干燥之涂片，在甲醛蒸汽中固定１０分钟。
2. 自来水冲洗，晾干。
3. 放入作用液，37℃孵育３（２—４）小时。
4. 水洗。
5. １％硫化铵３分钟。
6. 水洗。
7. ２％甲绿复染１０分钟（或0.1％沙黄复染１—３分钟）。
8. 水洗、晾干、镜检。
【结果判断】
阳性反应呈棕色或棕黑色沉淀，定位于胞浆中。
【临床意义】
1. 高歇细胞，何杰金病的巨网细胞，均呈强阳性，而尼曼－匹克细胞为阴性。
2. 网状细胞、吞噬细胞和组织嗜碱细胞，都呈强阳性。
【染色原理】
基质中的β—甘油磷酸钠在酸性磷酸酶存在下与硝酸铅结合为不溶解的磷酸铅（白色），再与硫化铵作用，成为棕黑色的硫化铅沉淀。
【注意事项】
1. PH 值必须小于６（5.4－5.8最佳）。
2. 硫化铵溶液，用时新配，淡黄色比白色的好。
3. 涂片宜立即固定染色，否则应固定后置冰箱，酶活性可保持两天无显著变
化。
4. 作用液应预温３７℃，再放标本，然后继续３７℃保温３小时。
操作人员 部门主管 质量负责人
姓名 王烈 日期 04年07月15日