细胞工程细胞生物缩减版答案
第一章 绪论
1. 细胞工程的定义与特点。
答:以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
研究对象:动植物细胞、组织或器官、胚胎,也包括原生质体、细胞器、染色体、细胞核和胚胎。
技术范围:细胞融合、细胞拆合、染色体导入、基因转移、胚胎移植和细胞组织培养技术等。
特点:前沿性:现代生物技术的热点;争议性:新技术给伦理道德带来的冲击;综合性:多学科交叉;应用性:工程类课程,重在产品和技术
第二章 细胞工程的理论基础
一、名词解释
细胞全能性:单个细胞具有发育成为完整个体的潜能。体内各种细胞均含有物种的全部基因,但在细胞中只有少部分基因在活动。生物体内,每个活的体细胞具有母体的全部的遗传信息,都具有像胚性细胞那样,经过诱导能分化发育成为一个新个体的潜在能力。
细胞分化: 指在个体发育过程中,细胞在形态、结构和功能上的特化过程。
时间上的分化:一个细胞在不同发育阶段可以有不同的形态结构和功能。
空间上的分化:对于多细胞生物来讲,同一细胞后代,由于所处的环境不同而可以有相异的形态结构和功能。
细胞脱分化与细胞再分化: 脱分化:在一定营养和刺激因素作用下, 具有特定结构与功能的组织细胞被诱导而改变原来的发育途径, 逐步失去原来的分化状态, 细胞特性消失, 转变为具有分生机能的细胞, 并进行活跃的细胞分裂, 这一过程称为去分化。
细胞再分化:定义:脱分化细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。
持家基因:又称管家基因,是指所有细胞中均要表达的一类基因,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的。
奢侈基因:即组织特异性基因,是指不同类型细胞中特异性表达的基因,其产物赋予各种类型细胞特异的形态结构特征与功能。
二、问答题
1、什么是细胞的分化?根据基因与细胞分化的关系,细胞中的基因可分为哪几类?细胞分化的实质是什么?
细胞分化:指在个体发育过程中,细胞在形态、结构和功能上的特化过程。
时间上的分化:一个细胞在不同发育阶段可以有不同的形态结构和功能。
空间上的分化:对于多细胞生物来讲,同一细胞后代,由于所处的环境不同而可以有相异的形态结构和功能。
可分为:持家基因、奢侈基因。
细胞分化实质:基因选择性表达的结果。
2、什么是细胞的全能性?细胞全能性的物质基础是什么?
细胞的全能性:单个细胞具有发育成为完整个体的潜能。
物质基础:细胞拥有生物的整套遗传物质
3、为什么高度分化的动物细胞也具有全能性?试举出两例诺贝尔奖的研究成果说明之。
动物的任何细胞(除了哺乳动物的成熟血红细胞无细胞核)都含有细胞核 细胞核中含有此种生物全部的遗传信息 故动物细胞高度分化后细胞核仍具有的全能性的潜能.
山中伸弥由于在诱导多功能干细胞方面的研究而获得2012年诺贝尔生理学奖
约翰-格登通过将卵细胞质与成熟的肠细胞细胞核的重组,经过修改的卵细胞,最后发育为一个正常的蝌蚪。
第三章 细胞工程的基本技术
1、怎样防止细胞培养过程中的微生物污染?
1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70% ethanol 擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。
2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞
3. 小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。
4. 工作人员应注意自身安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。
5. 定期检测规定项目。
2、对于动物细胞培养来说,哪种微生物污染是防治的重点?怎样防治?(答案不确定)
细菌、真菌、支原体、病毒等微生物污染是防治的重点。
防治:1、建好种子库
2、在细胞代数较低,状态较好时保种
3、对于需要保种的细胞,一定要单独操作
3、什么是细胞活力?在细胞培养过程中,怎样分析细胞的活力?
细胞相对活力:活细胞占细胞总数百分比。
怎样分析:1、细胞克隆形成率实验
2、化学染色法
3、比色法——MTT 等
4、细胞保存的方法有哪些?
传代培养保存法:短期保存。遗传性状容易变异,易发生污染,需要定期传代。
低温冷冻保存法:可长期保存。
冷冻方法:缓慢冷冻、快速冷冻。
缓慢保存:细胞收缩加剧引起细胞损伤。
快速冷冻:形成细胞内冰晶,引起细胞损伤
第四章、细胞培养与代谢调节
一、名词解释
细胞培养:将细胞从机体中取出, 模拟机体条件下使其生存、生长、繁殖和传代。
分批式培养:将细胞和培养液一次性装入反应器内进行培养,中间不补加营养物质,也不放出培养液(维持培养液体积不变),待细胞生长和产物积累到适当的时候,一次性收获细胞和产物的培养方法。
细胞培养动力学:主要是研究各种环境因素与细胞代谢活动之间的相互作用随时间的变化规律;用数学模型定量地描述生物反应过程中影响细胞生长、基质利用和产物生成的各种因素;
可为生物反应过程控制、小型试验数据的放大和提高反应过程的产物得率提供理论依据。 细胞工程
代谢工程:通过某些特定生化反应的修饰来定向改善细胞的特性,或是利用重组DNA 技术来创造新的化合物。
代谢流:参与细胞代谢的物质在代谢网络中安一定规律流动,形成细胞的代谢流。
二、问答题
1、何谓代谢工程?其实质是什么?
代谢工程:通过某些特定生化反应的修饰来定向改善细胞的特性,或是利用重组DNA 技术来创造新的化合物。
实质:在于对代谢流量和控制进行定量分析,在此基础上进行代谢改造,最大限度地提高目的代谢产物的产率或生产新的化合物。
2、简述代谢工程的调控方法。
首先进行代谢分析,即对细胞的整个代谢网络代谢流进行定性、定量分析,然后进行代谢工程设计。代谢工程设计思路主要有提高通向目标产物的代谢流、扩展代谢途径和构建新的代谢途径。
3、简述代谢工程的基本程序。(详见ppt 第四章)
1、代谢分析,确定改良的靶位点
2、基因操作(代谢工程的核心)
3、效果评价
4、简述代谢工程的基本应用。
提高目的产物的产量及其对主要原料的转化率
改善或提高细胞的某种性能(扩大底物利用范围、提高生长速率、耐受性、极端环境条件的实用性等)
生产异源代谢产物
生产非天然的新物质(如新型药物)
降解环境有害物质
阻断或降低副产物的合成
医药合成方面,作为中间体手性化合物的制备
5、在细胞分批培养过程中,细胞生长过程分哪几个时期?
延滞期、对数生长期、平稳期和衰退期等4个阶段
第五章 植物人工繁殖
一、名词解释
植物组织培养:指在无菌条件下,将植物器官、组织、细胞或原生质体等外植体材料培养在人工培养基上,给予适当的条件,诱发产生愈伤组织、潜伏芽,或长成完整植株的一种技术。
外植体:植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段。在继代培养时,将培养的组织切段移入新的培养基时,这种切段也称外植体。 愈伤组织:植物组织培养过程中,脱分化后的植物组织经过细胞分裂,产生无组织结构、无明显极性的松散的薄壁细胞团。
人工种子:又称合成种子或体细胞种子,指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。
胚状体:离体培养条件下,没有经过受精过程,但是经过了胚胎发育过程,所形成的胚状类似物。
二、问答题
1、传统的植物育种存在什么问题?为何要发展组织培养技术?
组织培养技术的优点:1、繁殖速度快、经济效益高 ;2、立体摆放,空间小;可全年生产,不受季节限制;3、繁殖后代整齐一致,能保持原有品种的优良性状;4、可获得无毒苗 ;5、是繁殖珍稀、濒危植物品种的有效途径
2、植物组织培养的基本流程。
3、植物激素的种类与作用。主要是生长素、细胞分裂素,它们的种类与作用。
4、植物生长素与细胞分裂素如何控制植物器官分化与形成
提示:生长素的种类与作用;细胞分裂素的种类与作用;生长素/细胞分裂素之比的作用。
5、如何通过组织培养获得无病毒苗?
茎尖培养脱毒
原理:在受感染植物中顶端分生组织通常不含或仅含低浓度的病毒。
(详见ppt )方 法:1. 取样与消毒;2. 剥取茎尖与接种; 3.培养;4. 生根诱导
第六章 动物人工繁殖
一、名词解释
胚胎工程:是指对动物早期胚胎进行操作和处理,让它继续发育获得人们所需要的成体动物的技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎培养、胚胎分割与融合、胚胎性别鉴定、胚胎保存、胚胎干细胞培养等技术。
胚胎移植:是指将受精卵或发育到一定阶段的胚胎移植到与供体同时发情排卵、但未经配种的“受体”母畜输卵管或子宫的技术。
体外受精:哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。
试管动物:是指将供体的精子和卵子在体外受精,体外培养胚胎发育到一定阶段通过胚胎移植移入受体完成发育出生的动物。
克隆动物:一般是指采用核移植、胚胎移植技术得到的动物。
人工授精:将采集的精子注入发情处理的母体内完成受精过程。
细胞核移植:是一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。
二、问答
1、为何要发展动物(包括人)人工繁殖技术?
发挥优良母畜的繁殖潜力;促进家畜改良的速度;保存遗传资源
2、简述动物繁殖技术的途径与内容
3、简述试管动物培育的基本过程(即技术路线)
女方超数排卵——>阴道超声引导取卵——>男性精液体外优化处理——>体外受精——>受精卵体外培养——>胚胎移植——>子宫内发育
4、简述克隆动物的培育基本过程(即技术路线)
核供体细胞获得与取核——>受体细胞去核——>细胞核移植——>重组胚激活——>重组胚培养和移植——>体细胞核移植后代的鉴定
细胞生物学
第一章 绪论
1、什么是细胞生物学?细胞生物学的主要研究内容和发展趋势是什么?
(1)细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学,它从不同层次(显微、亚显微与分子水平)研究细胞结构与功能、细胞增殖、分化、衰老与凋亡、细胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起源与进化等。
(2)主要研究内容:一般包括细胞结构功能和细胞重要生命活动两大基本部分。
生物膜与细胞器的研究;细胞信号转导;细胞骨架体系的研究;细胞核、染色体以及基因表达;细胞增殖及其调控;
细胞分化及干细胞生物学;细胞死亡细胞衰老;细胞工程(老龄化、试管婴儿、干细胞、组织培养···);细胞的起源与进化
(3)发展趋势:细胞生物学与分子生物学相互渗透与交融。
2、当前细胞生物学研究的三大基本问题是什么?
①基因的时空表达:基因组在时间和空间上是如何有序表达的
②生物大分子自组装及其调控机理:生物大分子(蛋白质、核酸、多糖)及其复合物,如何逐级装配成能行使生命活动的基本结构体系及各种细胞器?这种自组装的调控程序和调控机制?
③细胞信号转导:主要是大量活性因子与信号分子,是如何调节细胞最重要的生命活动过程的。
3、简述细胞学说的基本要点和在细胞生物学发展历史中的重要意义?
基本要点:认为细胞是有机体,一切动植物都是由细胞发育而来, 并由细胞和细胞产物所构成;
每个细胞作为一个相对独立的单位,既有它“自己的”生命, 又对与其它细胞共同组成的整体的生命有所助益;
新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。
重要意义:细胞学说的创立大大推进了人类对生命自然界的认识,有力地促进了生命科学的进步 。
第二章 细胞的统一性与多样性
1、如何理解细胞的统一性?
1. 细胞是构成有机体的基本单位。一切有机体都由细胞构成。
2. 细胞是代谢与功能的基本单位。细胞具有独立的、有序的自控代谢体系。
3. 细胞是有机体生长与发育的基础。
4. 细胞是繁殖的基本单位。细胞具有遗传的全能性。
5. 细胞是生命的归宿,是生物进化的起点。
2、目前关于细胞概念有哪些基本的共识?
1. 相似的化学组成:C、H 、O 、N 、P 、S
2. 磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜
3. 相同的遗传装置:即DNA 与RNA 作为遗传信息复制与转录的载体。
4、一分为二的分裂方式
5. 作为蛋白质合成的机器─核糖体,毫无例外地存在于一切细胞内。 3、举例说明细胞形态结构与功能的关系
如红细胞呈扁圆形的结构,有利于O2和CO2的交换; 高等动物的卵细胞和精细胞不仅在形态、而且在大小方面都是截然不同的,这种不同与它们各自的功能相适应。卵细胞之所以既大又圆,是因为卵细胞受精之后, 要为受精卵提供早期发育所需的信息和相应的物质, 这样,卵细胞除了带有一套完整的基因组外,还有很多预先合成的mRNA 和蛋白质, 所以体积就大; 而圆形的表面是便于与精细胞结合。精细胞的形态是既细又长, 这也是与它的功能相适应的。精细胞对后代的责任仅是提供一套基因组,所以它显得很轻装; 至于精细胞的细尾巴则是为了运动寻靶,尖尖的头部,是为了更容易将它携带的遗传物质注入卵细胞。
4、真核细胞有哪些基本的结构体系?
以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统---内膜系统。内膜系统将细胞质分隔成不同的区域,区隔化使细胞内表面积增了数十倍,代谢能力增强。 以核酸(DNA 或RNA )与蛋白质为主要成分的遗传信息表达系统。(颗粒纤维结构系统)
由特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统。
第三章 细胞生物学研究的基本方法
(一)名词
分辨率:指区分开两个质点间的最小距离。
负染技术:染色剂不被样品吸收,只是沉积在期表面,吸取多余的染色剂,样品凸出的地方染色剂少,样品凹陷的地方则多,最终在荧光屏上形成负象(即黑暗的背景下出现亮的影像)。
免疫荧光技术:将免疫学方法与荧光标记技术相结合用来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。快速、灵敏、有特异性,但其分辨率有限。常用的萤光素有异硫氰酸荧光素、罗丹明等。
荧光原位杂交:是将荧光标记的DNA 探针与待测样本进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数的一种检测技术。用于细胞遗传学和肿瘤学研究、疾病诊断。
细胞培养:将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中,让细胞贴壁生长,汇合(confluence )后形成均匀的单细胞层;
细胞株:从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群,可培养到40~50代。
细胞系:原代培养物经首次传代成功后即为细胞系(cell line), 由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cell line), 如可以连续培养, 则称为连续细胞系(continuous cell line), 培养50代以上并无限培养下去 。
细胞融合:通过培养和介导,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。
细胞拆合:就是把细胞核和细胞质分离开来,然后把不同来源的细胞质和细胞核互相结合,形成核质杂交细胞。
(二)问答
1、细胞内特异蛋白质的定位和定性分析有哪些主要方法?
蛋白的定位:用免疫细胞化学(1)免疫荧光技术(2)免疫电镜技术
蛋白的定性:免疫印迹;放射免疫沉淀;酶联免疫分析;蛋白质芯片;质谱分析
2、举例说明电子显微镜技术与细胞分子生物学方法的结合在细胞生物学研究中的应用。
提示:从蛋白质的定位(免疫电镜技术)和核酸的定位(电镜原位杂交)方面考虑
根据免疫学原理,利用抗体同特定抗原专一结合,对抗原进行定位的技术。如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位。
电镜原位杂交技术(采用生物素或地高辛标记探针,与抗生物素抗体相连的胶体金标记进行检测)。
第四章 细胞质膜
(一)名词
生物膜:生物膜包括质膜由蛋白质-脂质-蛋白质构成的三明治式的结构。
脂质体:是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。
质膜的流动镶嵌模型: 镶嵌有蛋白质和糖类的磷脂双分子层
膜蛋白的不对称性:是指每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有明确的方向性和分布的区域性。(二)问答
1、生物膜的基本结构特征是什么?这些特征与它的生理功能有什么联系?
(1)细胞膜由双脂层和蛋白质组成。磷脂分子以疏水性尾部相对,极性头部朝向水相组成生物膜骨架;
(2)膜蛋白和膜脂均可侧向运动,体现了膜的流动性。
(3)蛋白质或结合在双脂层表面,或嵌在其内部,或横跨整个双脂层,表现出分布的不对称性。
膜的流动性与生命活动的关系:信息传递,各种生化反应,发育不同时期膜的流动性不同
膜蛋白的不对称性是生物膜完成复杂的在时间和空间上有序的各种生理功能的保证。
2、何谓内在膜蛋白?它们以什么方式与膜脂结合?
内在膜蛋白:多数为跨膜蛋白,与膜的结合非常紧密,约占膜蛋白的70-80%。
◆疏水相互作用:膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。
2+2+◆离子键:跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形成离子键,或带负电的氨基酸残基通过Ca 、Mg 等阳离子与带负电
的磷脂极性头相互作用。
◆共价键:膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结合脂肪酸分子,插入脂双层之间;还有少数蛋白与糖脂共价结合。
3、何谓脂质体?脂质体有哪些类型?脂质体有何应用?
脂质体:是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。
类型:球形脂质体、平面脂质体膜
应用:✧研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质;
✧脂质体中裹入DNA 可用于基因转移;
✧在临床治疗中, 脂质体作为药物或酶等载体
4、简述质膜的功能。
为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境;
选择性的物质运输, 包括代谢底物的输入与代谢
产物的排除,其中伴随着能量的传递;
提供细胞识别位点, 并完成细胞内外信息跨膜传递;
为多种酶提供结合位点, 使酶促反应高效而有序地进行;
介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接;
质膜参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构。
第五章 物质的跨膜运输
(一)名词
被动运输:指通过简单扩散或协助扩散实现物质由高浓度向低浓度方向的跨膜运输。不需要细胞提供代谢能量。
主动运输:主动运输是由载体蛋白所介导的物质逆浓度梯度或电化学梯度的跨模转运方式,需要消耗能量。
简单扩散:又称自由扩散 ,小分子物质以热运动的方式顺膜两侧浓度梯度扩散。不需膜蛋白的帮助,也不消耗ATP ,仅靠膜两侧的浓度差。
协助扩散:也称促进扩散、易化扩散,是各种极性分子和无机离子(糖、氨基酸、核苷酸及细胞代谢物等)顺其浓度梯度或电化学梯度的跨膜转运,不需要细胞提供能量,但需膜转运蛋白的协助。
初级主动运输:ATP 驱动泵驱动下的主动运输,即ATP 酶直接利用水解ATP 提供能量,实现离子或小分子逆浓度梯度或电化学梯度的跨膜运输。 协同运输:又称次级主动运输,即耦联转运蛋白介导一种离子或分子逆浓度梯度运输的同时,耦联另一种物质顺浓度梯度的运输。
膜泡运输:真核细胞通过胞吞与胞吐作用完成大分子与颗粒物质的跨膜运输。转运过程中,物质包裹在脂双层膜包被的囊泡中。
胞吞作用:受体介导的内吞作用(通过网格蛋白有被小泡从胞外基质摄取特定大分子的内吞作用。被转运的物质(配体)首先与细胞表面特异性受体结合,形成两者的复合物,并引发细胞质膜局部的内陷,内陷的质膜在网格蛋白的参与下形成有被小窝,深陷的小窝脱离质膜形成有被小泡。具有高度专一性和高效性特点。
胞吐作用:将细胞内的分泌泡或其它膜泡中的物质通过细胞质膜运出细胞的过程。
膜电位:细胞膜两侧各种带电物质形成的电位差的总和。
静息电位:在静息状态下细胞膜两侧的电位差。外正内负。
动作电位:可兴奋组织或细胞受到阈上刺激时,在静息电位基础上发生的快速、可逆转、可传播的细胞膜两侧的电位变化,形成动作电位。
(二)问答
1、膜转运蛋白的种类与作用
作用:细胞吸收营养物质、排出代谢产物与废物以及细胞维持相对稳定的内环境都有赖于物质的跨膜运输。小分子物质通过被动运输与主动运输途径
进行跨膜运输。几乎所有的有机小分子和带电荷的无机离子的跨膜转运都需要特异的膜转运蛋白。
2、小分子跨膜运输有哪些方式?
3、大分子和颗粒型物质跨膜运输有哪些方式?
4、以低密度脂蛋白(LDL )的胞吞为例简要介绍受体介导的内吞作用的过程。
LDL 与细胞表面的受体结合→形成复合物→在质膜处网格蛋白的参与下形成有被小窝→小窝深陷脱离质膜→形成有被小泡→网格蛋白脱离有被小泡→去被的小泡与早胞内体融合,胞内体中pH 值低,使受体与LDL 颗粒分离→含有配体的胞内体与溶酶体融合→ LDL颗粒中的胆固醇酯被水解成游离的胆固醇而被利用。
5、比较载体蛋白和离子通道的特点
载体蛋白特点:高度选择性(特异性) :通常只运输一种分子;
饱和动力学特征:类似于酶与底物的作用;
底物竞争性或抑制剂的非竞争抑制:类似于酶,可被底物的结构类似物竞争,也可被抑制剂非竞争性抑制。
离子通道的特点:
转运效率极高; 没有饱和值; 并非持续开放,而受控于细胞信号;
有些通道蛋白平时处于关闭状态,仅在特定刺激下才打开,又称为门(控)通道
6、比较主动运输与被运输的特点
被动运输:指通过简单扩散或协助扩散实现物质由高浓度向低浓度方向的跨膜运输。不需要细胞提供代谢能量。
主动运输是由载体蛋白所介导的物质逆浓度梯度或电化学梯度的跨模转运方式,需要消耗能量
7、ATP 驱动泵包含哪些类型?
P-型离子泵、 V-型质子泵、 F-型质子泵和ABC 超家族
第七章 细胞质基质与细胞内膜系统
(一)名词
细胞质基质:真核细胞细胞质中,除去能分辨的细胞器以外的细胞质中胶状物质。
细胞内膜系统:指在结构、功能及发生上相互关联、由膜包被的细胞器或细胞结构。主要包括内质网、高尔基体、溶酶体、胞内体和分泌泡等。 微粒体:在细胞匀浆和超速离心过程中,破碎的内质网膜和核糖体形成的囊泡结构。
异质性细胞器:是指在不同生物及不同发育阶段,该细胞器的形态、大小, 甚至所含有酶的种类都有很大的不同,如溶酶体、过氧化物酶体。
次级溶酶体:是初级溶酶体与细胞内的自噬泡、胞饮泡或吞噬泡融合形成的复合体,即正在进行或完成了消化作用的溶酶体。内含水解酶和相应的底物,可分为自噬溶酶体和异噬溶酶体。前者消化的物质来自细胞本身的各种成分,后者消化的物质来自外源。
残余体:次级溶酶体到达其功能末期时,由于水解酶活性下降或消失,残存物质不能被消化而保留其中的溶酶体。
微体: 即过氧化物酶体,是由单层膜围绕的内含一种或几种氧化酶类的异质性细胞器。
(二)问答
1、简述真核细胞的细胞质是如何被生物膜区室化的?
P169
2、什么是细胞质基质?简述其组成、特点及功能。
细胞质基质: 真核细胞细胞质中,除去能分辨的细胞器以外的细胞质中胶状物质。
主要成分:水和无机离子等一些小分子; 脂类、糖类、氨基酸、核苷酸及其衍生物等中等分子;蛋白质、脂蛋白、多糖和RNA 等大分子,蛋白质占20-30%;细胞骨架;内含物(糖原、脂滴、色素等)
主要特点:高度有序、且不断变化动态结构体系。 (蛋白质之间、蛋白质与其他大分子之间通过弱健相互作用)。
功能:1)、完成各种中间代谢过程:糖酵解过程、磷酸戊糖途径、糖醛酸途径、糖原的合成与分解、蛋白质和脂肪酸的合成等。
2)、与细胞质骨架相关的功能:骨架不仅与维持细胞形态、细胞运动、胞内物质运输及能量传递等相关,而且为其它成分和细胞器提供锚定位点。3)、蛋白质的分选和运输场所4)、细胞的信号转导
3、简述内质网的类型及各自的功能。
粗面内质网:膜外有核糖体附着,呈扁平囊状,排列整齐,膜围成的空间称为ER 腔(lumen )。主要功能是合成分泌蛋白和多种膜蛋白。分泌细胞(浆细胞、胰腺腺泡细胞)中rER 十分发达。
光面内质网:膜外无核糖体附着(表面光滑),呈分支管状或小泡状。主要功能是合成脂质。肌肉细胞中的肌质网是一种特化的SER ,可贮存Ca2+,引起肌肉收缩。
6、简述高尔基体的功能。
参与细胞的分泌活动;脂类物质的转运;高尔基体是细胞内糖类合成和蛋白糖基化修饰的场所。蛋白酶的水解和其他加工过程。
7、蛋白糖基化的基本类型、特征及其生物学意义(作用)。
N-连接的糖基化:与Asn 的NH2连接,连接的糖为N-乙酰葡糖胺。
O-
作用:
8、简述溶酶体类型、功能。
类型:1. 初级溶酶体
2. 次级溶酶体:(1)自噬溶酶体 (2)异噬溶酶体
3. 残余体:功能:1. 清除无用的生物大分子、衰老的细胞器及衰老损伤和死亡的细胞(自噬)
2. 防御功能:病原体感染刺激单核细胞分化成巨噬细胞,吞噬、消化病原体(异噬)
10、简述过氧化物酶体的功能。
(一)在动物中 ①参与脂肪酸的β-氧化。 ② 具有解毒作用。
(二)在植物细胞中
1、光呼吸,可消除多余的NADPH 和ATP ,减少细胞受损的可能,有其正面意义。
2、乙醛酸循环:在油料作物的种子萌发过程中,脂肪酸β-氧化产生乙酰辅酶A ,通过乙醛酸循环,把两个乙酰辅酶A 合成琥珀酸, 琥珀酸通过糖异生途径合成葡萄糖,开辟了一条从脂肪合成糖的途径。
第八章 细胞内蛋白质的分选与膜泡运输
(一)名词
蛋白质分选:是指蛋白质在自身信号序列的指引下,从蛋白质起始合成部位到其功能发挥部位的定向转运过程。
信号斑:指导分泌蛋白至内质网膜上合成的信号序列。位于分泌蛋白的N 端,通常16-26个氨基酸残基,包括C 端、N 端和疏水区。
导肽:指导分泌蛋白至内质网膜上合成的信号序列。位于分泌蛋白的N 端,通常16-26个氨基酸残基,包括C 端、N 端和疏水区。
转运肽:指导蛋白质转运至叶绿体中的信号序列。通常在N 端。
核定位信号:指导蛋白质转运至细胞核中的信号序列。
翻译后转运:蛋白质先合成再转运
共翻译转运:蛋白质边合成边转运
(二)问答
1、蛋白质的分选信号有哪些?各对应哪些蛋白的转运?
● 导肽:指导蛋白质转运至线粒体中的信号序列。通常在N 端。
● 转运肽:指导蛋白质转运至叶绿体中的信号序列。通常在N 端。
● 核定位信号:指导蛋白质转运至细胞核中的信号序列。
● 内在引导信号:指导蛋白质转运至过氧化物酶体中的信号序列。通常在C 端。
● 细胞质基质中的可溶性驻留蛋白和细胞骨架蛋白的分选与转运信号不清楚。
2、简述分泌性蛋白是如何分选并转运的?(信号假说)
● 信号假说:分泌性蛋白的合成开始于细胞质基质中游离的核糖体,当蛋白的N 端合成至一定长度后(通常是70-100个aa ),N 端的信号肽
指导分泌蛋白至内质网膜上合成,蛋白边合成边通过易位子蛋白复合体进入内质网腔,在蛋白合成前切除信号肽。信号识别颗粒和内质网膜上SRP 的受体协助完成这样过程。
3、简述蛋白质分选的基本途径与类型。
(1)翻译后转运:在细胞质基质中游离的核糖体上合成,然后转运至膜围绕的细胞器(包括线粒体、叶绿体、过氧化物酶体及细胞核,或者成为细胞质基质中的可溶性驻留蛋白和细胞骨架蛋白。
(2)共翻译转运:蛋白质合成在细胞质基质中游离的核糖体上起始之后,由信号肽引导至rER ,然后新生肽边合成边转运至rER 腔中,再经高尔基体加工包装运至溶酶体、细胞质膜或者分泌到细胞外,内质网和高尔基体本身蛋白质的分选也通过该途径。