角蛋白相关遗传性皮肤病基因突变的研究进展
中华皮肤科杂志!""#年#"月第$%卷第&期’()*+,-./0123456127-.!""#4823$%492:&
%"$
・讲座・
角蛋白相关遗传性皮肤病基因突变的研究进展
朱学骏
陈喜雪
李冠群
杨勇
马玲蕾
董慧婷
吴安
谢艳秋
特异突变。
三、单纯型大疱性表皮松解症的家一、角蛋白及相关的遗传性皮肤病$:表皮松解性掌跖角化症角蛋白是角质形成细胞的主要结构(-G)H-./23I1)6G03/2G30*10.X-.012H-./04
蛋白,是中间丝家族的重要成分。角蛋白包括至少$"种蛋白分子,根据分子量及等电点的差异分成!型和"型,在同一中间丝中角蛋白总是成对表达,包括一种!型和一种"型。!型角蛋白为酸性蛋白质,包括;&?""",编码基因位于染色体#?@#!=!#;"型角蛋白为中性或碱性蛋白质,包括;#=;A,相对分子质量&$""">B?""",编码基因位于染色体#!@##=#$。
角蛋白的分子结构都是类似的,分为螺旋杆状区、非螺旋的头区和尾区以及连接区。杆区有%个#螺旋片段即#C、#D、!C、!D,片段之间为$个非#螺旋的连接区E#、E#!、E!。成人表皮的基底细胞层主要表达;&F;#%,其它$层主要表达;#F;#",掌跖的角质层主要表达;!-F;
近年来随着分子生物学技术的进展,发现编码角蛋白基因的突变可造成角蛋白结构的异常。目前的研究结果已发现&种遗传性皮肤病与角蛋白基因突变有关。
#:单纯型大疱性表皮松解症
-G)H-./23IJ)J7K332J0J)/G3-L4MDN):特征性的临床表现为轻微外伤后皮肤易出现水疱、大疱及糜烂4是一组较为严重的遗传性皮肤病。根据临床表现不同分为$个主要亚型,包括手足复发型(MDN=O’)
、泛发型(MDN=;P-7*-.)和疱疹样型(MDN=,Q)。是由于角蛋白;&F;#%基因突变引起的。
!:先天性大疱性鱼鳞病样红皮病7K332J062*R-*)103)6(1(I2J)S2./-.I1(.2TH-./04D’UM)4又称表皮松解角化过度症。通过连锁分析法和突变位点的研究发现D’UM是由于;#、;#"基因的点突变所致。
————————————
基金项目:国家自然科学基金资助V$
作者单位:万方数据
#"""$%北京大学第一医院
MYY;)是一组以掌跖表皮显著增厚为特征的常染色体显性遗传病。近年来运用连锁分析将其致病基因定位于#?号染色体上,并发现多例患者的;
%:先天性厚甲症(G06(I2*I6()062*R-*)104Y’)是一种以指、趾甲板显著增厚为特征的常染色体显性遗传病。通过分析患者的;B、;#B、;#?基因,发现了多处基因突变位点。
&:N)-/-*鱼鳞病,
由;!-基因突变所致。国外发现一些疾病如多发性脂囊瘤、表皮痣等也与角蛋白突变有关。
二、角蛋白相关遗传性皮肤病突变研究的策略
#:规范地收集登记临床资料和遗传学资料:对遗传家系进行实地调查,绘制完整的家系图。询问病史,对家系中的所有成员进行详尽的临床检查。采集家系中患者和健康人的外周血,9C及患者皮损组织。
!:组织病理、
免疫组化及透射电镜观察。根据临床表现
(如先天性厚甲症、表皮松解性掌跖角化症),并结合组织病理(如先天性大疱性鱼鳞病样红皮病、N)-/-*鱼鳞病)
和透射电镜结果(如单纯型大疱性表皮松解症)作出诊断。
$:提取家系中患者和健康人的外周血,9C。
%:合成相应疾病基因的扩增引物,尤其突变热点部位。
&:Y’Z扩增。
B:经NN’Y
(单链构象多态性)、[C异源双链)等方法分析突变存在的区
域。
?:对存在突变的片段进行,9C直接测序,了解具体的突变位点和方式。
A:应用Z\EY
(限制酶片段长度多态性)等方法,排除多态性的可能,明确
系研究
#:组织病理学:表皮下疱,疱内可见少许红细胞,稀疏炎症细胞浸润。超微结构:基底细胞内裂隙,基底膜位于疱底。与半桥粒连接的张力微丝数目减少且长度缩短,核周空泡形成。
!:突变位点方式的检测:该病是由于角蛋白;&F;#%基因突变引起的,突变发生的区域存在热点部位。轻症(如O’型)
的突变热点位于连接区,重症(如,Q型)
的突变位于螺旋杆区。主要针对热点区设计引物进行检测。结果见表#。
$:MDN通常为常染色体显性遗传,是因角蛋白;&或;#%突变所致。我们检测的病例突变均发生在此区域。&例MDN=O’家系中$例的突变位于;&F;#%的E#!连接区,!例突变位于紧靠E#!连接区的!C螺旋区;
而#例临床表现为广泛水疱、大疱的MDN=,Q家系的突变位点则位于保守的#C区。国外研究发现MDN的热点在#C、!D和E#!区,突变位点常常和疾病的严重性有关。如果MDN的突变发生在#C、!D等保守区,则产生临床表现较重的MDN=,Q型;若发生在E#!连接区等非保守区,则产生另两种临床表现较轻的亚型。我们发现的
突变位点与国外报道的突变热点相一致。而发现的一例MDN=O’患者突变位于;&的!C区,是国际上的首例报告。
四、先天性大疱性鱼鳞病样红皮病#:组织病理:表皮明显角化过度,颗粒层增厚,空泡变性,可见大而深染的嗜碱性颗粒,真皮浅层血管扩张,有稀疏炎症细胞浸润。
!:突变位点方式的检测:通过连锁分析法和突变位点的研究发现D’UM是
由于;#、;#"基因的点突变所致,突变热点也位于螺旋杆区和连接区。针对热点区设计引物,进行检测。结果如表!。D’UM也呈常染色体显性遗传。我科所检
(((
%"%
表"
家系序号
#!$%&B
临床分型D;S=L’D;S=,XD;S=L’D;S=L’D;S=L’D;S=L’
中华皮肤科杂志!""#年#"月第$%卷第&期’()*+,-./0123456127-.!""#4823$%492:&
B个D;S家系的突变位点和方式
突变区域]#!#F!F]#!]#!!F
突变方式FJG*FJJFFJ*’GJFJ’*FG’FF’*FG’GJ’*GF’JFJ*J’J
氨基酸改变
$!>位蛋氨酸*异亮氨酸H#I#!$位门冬酰胺*精氨酸$$A位异亮氨酸*丝氨酸$!@位门冬酰胺*丝氨酸H!I!BA位缬氨酸*天冬氨酸H!I$%B位色氨酸*丝氨酸H$I
$
突变蛋白E&E#%E&E&E#%E&
%
表!
家系序号
>A@
临床分型;’CD;’CD;’CD
$个;’CD家系的突变位点和方式
突变区域#F#F#F
突变方式氨基酸改变
’G’*FG’#&B位精氨酸*丝氨酸H%IFGJ*FFJ#!!位丝氨酸*门冬酰胺H%I’G’*’’’#&B位精氨酸*脯氨酸
&
突变蛋白E#"E#E#"
B
测的$个家系的突变位点均位于高度保与文献报告突变的热点发生守的#F区。
在#F、!;和头区是一致的。
五、展望
分子遗传学的发展使角蛋白相关性遗传病的基因诊断、遗传咨询及产前诊断更加迅速、准确。角蛋白相关性遗传病分子缺陷的认识也为通过体细胞对患者进行基因治疗奠定了基础。但目前国内尚未有DKKE、K’等其它角蛋白相关遗传性皮肤病基因突变研究的报道。在发现更多遗传突变方式的基础上探讨遗传
基因型和临床表型之间的关系,以及在检测基因突变的基础上,进行产前基因诊断,阻止疾病在家系中的延续,达到优生优育的目的都是亟待解决的问题。
志谢
武汉市第一人民医院段逸群、王
A
玮臻大夫参与家系调查
>
参考文献
@
#吴安,李冠群,朱学骏:手足复发型大疱
性表皮松解症角蛋白&基因突变位点的检测:中华皮肤科杂志,#@@>,$":!!#=!!$:!董慧婷,李冠群,陈喜雪,等:两个家系单纯型大疱性表皮松解症L-7-.M’26N0O*-
亚型的基因突变:中华皮肤科杂志,#@@@,$!P$B>=$B@:
李冠群,吴安,朱学骏:K’Q=,9F直接测序检测#例单纯型大疱性表皮松解症L-7-.M’26N0O*-亚型RL’=D;ST患者角蛋白E&基因点突变:临床皮肤科杂志4#@@>,!BP!#@=!!#:
李冠群,吴安,马玲蕾,等:聚合酶链反应=,9F测序检测大疱型先天性鱼鳞病样红皮病家系角蛋白E#"基因点突变:中华皮肤科杂志,#@@>,$"P$>%=$>B:
DUV1-)*DW+.:X23-6Y30.Z-*-1)6V2[-U)\-.M/23OV)V7Y332V0:S6)-*6-4#@@!4!&BP>@@=A"%:
]0*-D;4QYZZD]490^V0.)0W4-103:F/Y101)2*)*1(-62*V-.^-\(-3)_1-./)*01)2*U-U1)\-2[N-.01)*&)*(-.-\)10.OVN)*73)VM1-.)*Z:901Y.-4#@@!4$&BP!%%=!%B:
S1-U(-*VE4SO7-.18K4L)‘V/0*DX4-103:FN-.01)*#%XY101)2*03(21VU212[-U)\-.M/23OV)V7Y332V0V)/U3-_4,2a3)*ZMX-0.0P)/U3)601)2*V[2.\)0Z*2V)V:+C*^-V1,-./01234#@@$4#"#P!%"=!%$:
Q21(*0Z-3+F4,2/)*-OFX4,-/UV-O],4-103:XY101)2*V)*1(-.2\\2/0)*V2[N-.01)*V#0*\#")*-U)\-./23O1)6(OU-.N-.012V)V:S6)-*6-4#@@!4!&>P##!A=##$":
’()U-^’’4E2.Z-;K4X0.N2^094-103:F3-Y6)*-PU.23)*-/Y101)2*)*1(-W#VY7\2M/0)*2[N-.01)*#60YV-V-U)\-./23O1)6(OMU-.N-.012V)V:’-334#@@!4>"PA!#=A!A:
R收稿日期:!"""=#"="AT
注册号:鲁药管械!准"字#$$$第#$%$$&’号广告审查批准文号:鲁医械广审!文"#$$$$#$
白癜风+顽症
白癜风是皮肤科常见病,给广大患者带来许多烦恼。多年来,其临床治疗所采用的单一疗法治愈率较低,使患者失去信心,最终放弃治疗。以当前临床治疗水平来看,若能将各种方法综合运用,可以达到理想效果。而表皮移植的方法对病程长、病情稳定的患者能取得满意疗效。因此将表皮移植与药物治疗相结合,可有效提高白癜风的总体治愈率。
山东神思医疗设备有限公司所研制开发的;?#"天后去除敷料,使白斑区逐渐出现色素沉着,黑素细胞成活、蔓延,手术后!?$个月,扩大至!?$倍,覆盖整个白斑区,黑素与周围皮肤颜色趋于一致,从而达到彻底治愈白癜风。
;
欢迎来函来电联系,详细资料备索。
;
表皮分离层次准确,不形成瘢痕分离表皮速度快R一般!"?%"分钟T
抽放气控制阀门可有效控制操作中的抽放气,操作简便超温、超压、漏气时声光报警,使用安全可靠
完善的售前、售后服务,产品实行三年保修、终身维护。公司设有技术培训中心,提供上门培训、维修服务地址:济南市开元路A号大力大厦北四楼邮编:!&""#%
电话:"&$#=!B"!@A"
传真:"&$#=!B"!@A$
山东神思医疗设备有限公司出品
万方数据
角蛋白相关遗传性皮肤病基因突变的研究进展
作者:作者单位:刊名:英文刊名:年,卷(期):被引用次数:
朱学骏, 陈喜雪, 李冠群, 杨勇, 马玲蕾, 董慧婷, 吴安, 谢艳秋北京大学第一医院
中华皮肤科杂志
CHINESE JOURNAL DERMATOLOGY2001,34(5)11次
1.Rothnagel JA;Dominey AM;Dempsey LD Mutations in the rod domains of keratins 1 and 10 in epidermolytichyperkeratosis 1992
2.Stephens K;Sybert VP;Wijsman EM A keratin 14 Mutational hot spot of epidermolysis bullosa simplex,DowlingMeara:implications for diagnosis 1993
3.Lane EB;Rugg EL;Navsaria H A mutation in the conserved helix termination peptide of keratin 5 inhereditary skin blistering 1992
4.Epstein EH Jr Molecular genetics of epidermolysis bullosa 1992
5.李冠群;吴安;马玲蕾 聚合酶链反应- DNA测序检测大疱型先天性鱼鳞病样红皮病家系角蛋白 K10基因点突变 19976.Chipev CC;Korge BP;Markova N A leucine: proline mutation in the H1 subdomain of keratin 1 causesepidermolytic hyperkeratosis 1992
7.李冠群;吴安;朱学骏 PCR- DNA直接测序检测 1例单纯型大疱性表皮松解症 Weber Cockayne亚型 (WC- EBS)患者角蛋白K5基因点突变 1997(26)
8.董慧婷;李冠群;陈喜雪 两个家系单纯型大疱性表皮松解症 Weber Cockayne亚型的基因突变[期刊论文]-中华皮肤科杂志 1999(6)
9.吴安;李冠群;朱学骏 手足复发型大疱性表皮松解症角蛋白 5基因突变位点的检测 1997
1.黄一锦.赵小燕.赵岩.林粼.张益珠.张启国.吴泳 Weber-Cockayne亚型单纯型大疱性表皮松解症一家系KRT5 基因突变[期刊论文]-中华皮肤科杂志 2010(11)
2.GUAN Feng.潘磊.SHI Guo-qing.刘守仁.YANG Li-guo 羊毛经济性状主基因研究进展[期刊论文]-中国畜牧兽医 2008(8)3.陈谨萍.李垣君.李珮珊.李海翩 先天性大疱性鱼鳞病样红皮病1例[期刊论文]-岭南皮肤性病科杂志 2006(2)
4.葛小鹏.魏羽佳.宋守荣.张超.廖跃 单纯性大疱性表皮松解症Weber-Cockayne亚型一家系调查[期刊论文]-贵阳医学院学报 2006(5)
5.靳培英 大疱性表皮松解症[期刊论文]-中华皮肤科杂志 2004(10)
6.孙秀坤.朱学骏 表皮松解性角化过度型鱼鳞病基因型与表型的相互关系[期刊论文]-中华皮肤科杂志 2004(10)7.孙秀坤.朱学骏 正常及突变角蛋白K1部分螺旋亚区分子模拟及其比较[期刊论文]-临床皮肤科杂志 2004(6)8.孙秀坤.朱学骏 人角蛋白K1cDNA基因克隆及其定点突变[期刊论文]-临床皮肤科杂志 2004(3)
9.毛薇.何新辉.张咸宁.严志龙.何向蕾.陈衡平.徐来荣 三个表皮松解性掌跖角化症家系KRT9基因突变的研究[期刊论文]-中华皮肤科杂志 2004(9)
10.孙秀坤.朱学骏 表皮松解性角化过度型鱼鳞病二例及其基因突变的研究[期刊论文]-中华皮肤科杂志 2003(4)11.孙秀坤.关欣.朱学骏 Siemens大疱性鱼鳞病基因突变国内首次报道[期刊论文]-临床皮肤科杂志 2002(10)
本文链接:http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zhpf200105047.aspx