基于胃寒证模型的吴茱萸挥发油功效及伴随毒副作用研究_李晓宇

2015年10月第40卷第19

期Vol.40，No．19October，2015

·药理·

基于胃寒证模型的吴茱萸挥发油功效及

伴随毒副作用研究

李晓宇，孙蓉

*

（山东省中医药研究院，山东济南250014）

［摘要］目的：对吴茱萸挥发油在胃寒证小鼠模型上镇痛作用的药效剂量范围及机制进行初步研究，并探讨其伴随毒性与氧“功效-化损伤机制的相关性，为阐明其证候-毒性”相关性提供实验依据。方法：制备胃寒证小鼠模型，采用经典的小鼠热板AST，PGE2，NO，NOS，MDA，SOD，GSH，GSH-Px，法，灌胃不同剂量吴茱萸挥发油，观察其镇痛及伴随毒副作用，检测血清ALT，BUN，CＲ及肝脏ALT，AST；并通过相关的毒性反应积分表，记录小鼠的伴随毒性症状。结果：吴茱萸挥发油在给药后30min60min达到峰效应，“量-“时-有明显的镇痛作用，呈现一定的效”和效”关系，血中和肝内ALT和AST水平升高，血中PGE2，MDA，NO，NOS水平增高，SOD，GSH，GSH-Px水平下降，BUN，CＲ水平无明显变化，肝脏指数增加，肾脏比值无明显变化。结论：吴茱萸挥发油发挥镇痛效应的机制与抑制疼痛介质释放、过氧化损伤及NO损伤有关；在发挥镇痛效果的同时还会伴随着“量-对肝脏产生一定的毒性，毒性机制主要为氧化损伤，呈现与肝毒性损伤相并行的时-毒”关系。［关键词］吴茱萸；挥发油；小鼠；胃寒证；镇痛；毒副作用

Studyonefficacyandaccompanyingtoxicandsideeffectsofvolatileoilof

EvodiaFructusbasedonstomachcoldsyndromemodel

LIXiao-yu，SUNＲong*

（ShandongAcademyofChineseMedicine，Ji'nan250014，China）

［Abstract］Objective：TopreliminarilystudytheeffectivedosagerangeandmechanismoftheabirritationofvolatileoilofEvodiaFructusonthestomachcoldsyndromemodelinmice，anddiscussthecorrelationbetweenitsaccompanyingtoxicityandoxidativedam-agemechanism，inordertoprovidetheexperimentalbasisforexplainingtheefficacy-syndrome-toxicitycorrelation.Method：Thestomachcold-syndromemodelinmicewasinducedbytheclassichotplatetestbyorallyadministratingwithdifferentdosesofvolatileoilofEvodiaFructus，inordertoobserveitsabirritationandcompanyingtoxicandsideeffectsanddetectserumALT，AST，PGE2，NO，NOS，MDA，SOD，GSH，GSH-Px，BUN，CＲandhepaticALT，AST.Thecompanyingtoxicsymptomsinmicewererecordedintoxicreactionintegraltable.Ｒesult：VolatileoilofEvodiaFructushadanobviousanalgesiceffectat30minaftertheoraladministra-tionandreachedthepeakeffectat60min，withcertain″dose-effect″and″time-effect″relations，risesinserumandhepaticALTandASTlevels，serumPGE2，MDA，NOandNOSandhepaticindexes，decreasesinSOD，GSHandGSH-PxandnonotablechangeinBUN，CＲlevelsandkidneyweight/bodyratio.Conclusion：TheabirritationmechanismofvolatileoilofEvodiaFructuswasrelatedtotheinhibitionofpaintransmitterrelease，peroxidativedamageandNOdamage，whichisaccompaniedbycertainhepatotoxicity，mainlymainlyoxidativedamage，withaconcurrent″dose-time-toxicity″relationship.

［Keywords］EvodiaFructus；volatileoil；mouse；stomachcoldsyndrome；abirritation；toxicandsideeffects

doi：10．4268/cjcmm20151925

［收稿日期］2015-01-07

［基金项目］国家重点基础研究发展计划（973）项目（2009CB522802）；山东省科技平台建设项目（2008GG2NS02021）；山东省自主创新及成果转化项目（2014ZZCX02104）［通信作者］

*

Tel：（0531）82949849，E-mail：[email protected]孙蓉，研究员，博士生导师，主要从事中药药理与毒理研究，

［作者简介］李晓宇，E-mail：[1**********]@126.com

·3838·

李晓宇等：基于胃寒证模型的吴茱萸挥发油功效及伴随毒副作用研究

吴茱萸是一味临床常用中药，系芸香科植物吴茱萸Evodiarutaecarpa（Juss）Benth.、石虎E.rutae-carpa（Juss）Benthvar.officinalis（Dode）Huang或疏毛吴茱萸E.rutaecarpa（Juss）Benth.var.bodinier（Dode）Huang.的干燥近成熟果实，辛、苦、热，有小毒，归肝、脾、胃、肾经，能散寒止痛，降逆止呕，助阳止泻

［1］

1∶1用聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯（吐温-80）溶解

挥发油，然后根据试验要求配置成所需浓度。扶他林（北京诺华制药有限公司，批号120726）；双姜胃痛丸（西双版纳版纳药业有限公司，批号120815）；ALT，AST，PGE2，NO，NOS，MDA，SOD，GSH，GSH-Px，BUN，CＲ测定试剂盒购自南京建成股份有限公司。

PL303精密电子天平（瑞士梅特勒托利多仪器有限公司）；可调式移液器（上海赛默飞世尔仪器有限公司）；560全自动生化分析仪（德国贝尔公司）；DDL-5型低速冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂）；DZKM-S-6电热恒温水浴锅（北京市永光明医疗仪2600紫外-可见分光光度计［尤尼柯（上器厂）；UV-；MultiskanGo-1510全波长酶标海）仪器有限公司］

。仪［赛默飞世尔科技（中国）有限公司］SPF级KM小鼠，雌性，体重18.0～22.0g，适

健康，购自山东大学实验动物中心，动物合格证龄、

号SYXK（鲁）20130001。2方法2.1

吴茱萸挥发油及阳性药剂量设计

根据吴茱萸挥发油的经口急性毒性试验，吴茱

－1

萸挥发油LD50为2.70mL·kg和吴茱萸挥发油对正常动物的药效与伴随毒副作用研究为依据，设定

0.5，0.25吴茱萸挥发油高、中、低剂量组分别1.0，

－1－1

mL·kg－1，均按25mL·kg·d灌胃1次，根据扶他林人日用量为100mg，双姜胃痛丸人日用量为

。近年来，国内外学者对吴茱萸的化学成分

和药理作用等方面进行了深入研究，发现吴茱萸主

［2-3］，要含有生物碱、挥发油、苦味素等化学成分具有广泛的药理作用

［4］

。现代研究表明，吴茱萸挥发油

其主要成分为月桂烯、β-蒎烯、柠檬烯、罗勒烯等，占

［5］

挥发油总成分的78.66%。随着临床应用的不断其毒副作用已屡见报道，且其不良反应报道多拓宽，

是在应用吴茱萸治疗这些疾病的过程中发现的，主要有神经系统毒性及消化道不良反应，本实验室前期研究表明吴茱萸不同组分对小鼠均有较强的急性毒性，不同组分按急性毒性大小依次是总生物碱提

［6］取物＞水提组分＞全组分＞醇提组分，前期研究

发现小鼠灌服吴茱萸挥发油可造成一定的急性肝损伤，其对肝损伤均呈现有一定的“量-时-毒”关，吴茱萸发挥镇痛作用多有明显的量效关系，吴茱萸挥发油组分的ED50多与毒性剂量接近。而系

中药的毒性是在中医理论指导下，在辨证用药过程中，在功效的临床表征过程中被发现和认识的；中药的毒性与功效和证候密切相关，中药毒性应当放在功效（适应症）和中医的“证候”中进行综合评价和“就毒性论毒性”。且中药具科学认知，不能孤立地

反复用药的特点。故在此理论指导下，有成分复杂，

3d的“胃寒证”本实验进行了吴茱萸挥发油给药1，

小鼠功效及伴随毒副作用机制的研究与评价，明确其单次及多次给药导致的伴随毒副作用，考察了胃寒证对其功效和毒性变化的影响。1

材料

吴茱萸购自北京同仁堂饮片有限责任公司（批号20120914），经鉴定为芸香科植物吴茱萸E.ru-taecarpa的干燥近成熟果实，2010年按《中国药典》

符合各项规定。吴茱萸挥发油版吴茱萸项下检查，

（批号20121010）由本实验室提取制备，现用现配：

取吴茱萸药材800g，置1万mL圆底烧瓶中，加10倍量水浸泡24h，用挥发油水蒸气蒸馏装置加热回流提取6h，停止加热，放冷，收集挥发油，得率为0.55%（mL·g－1），纯度为91.05%。临用时按照

［7-8］

4.5g，按体表面积比值折算为等效剂量的2倍，即

－1

双姜胃痛丸设定扶他林小鼠剂量为0.026g·kg，

－1

小鼠剂量为1.17g·kg，用蒸馏水将其溶解。正常组灌服蒸馏水，药物组各剂量组分别灌服一定剂

量的药物。2.2方法2.2.1

动物分组取小鼠140只，雌性，随机分为

14组，每组10只，即水对照组，模型对照组，扶他林对照组，双姜胃痛丸组，吴茱萸挥发油组分高（H）、中（M）、低（L）剂量组，每组根据时间点分为给药1d和给药3d剂量组。2.2.2

胃寒证小鼠模型的制备根据参考文献

进行改进，上述小鼠稳定3d后禁食不禁水12h，所有小鼠分别同时放入29～31℃的水中（水深以小鼠无法跳出盒子为准），持续游泳5～6min，体力消耗殆尽，然后将小鼠拿出，休息5min后，上述重复

·3839·

［9］

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期Vol.40，No．19October，2015

游泳3次。最后将小鼠拿出，按照原分组情况，放回

各组中。5min后，除正常对照组外，所有药物组和

－1

模型对照组按25mL·kg小鼠体重灌服0℃冰

24h成模后给药，水，观察其证侯表现，进行吴茱萸

80%）、少食不欲饮（各组发生率均为80%）、肢冷

（各组发生率均为50%）等胃寒证症状，并持续一定的时间（0～72h）。

3.2吴茱萸挥发油对胃寒证小鼠镇痛试验及机制研究3.2.1影响

吴茱萸挥发油对胃寒证小鼠热板法痛阈的胃寒证模型组与对照组比较，痛阈值无显著

挥发油功效及伴随毒副作用试验。

2.2.3镇痛试验及镇痛机制研究根据参考文献［10］进行小鼠热板筛选并记录药前痛阈值，根据体重和痛阈值随机分组，于实验前8h禁食、不禁水，给药1d剂量组均为先造模，后给药；给药3d组均为第1天给药，第2天造模，第3天给药。然后与相应时间点称小鼠体重，其中第1天雌鼠于药后9060，90，min检测其热板痛阈值，第3天于药后30，120，180，240min检测其热板痛阈值，热板检测完3000r·min－1离心10后，取部分小鼠，分别取血，

NO，MDA，min，取血清，以生化分析仪测定PGE2，SOD的含量和活性，考察其镇痛药效机制。2.2.4

药效伴随毒试验研究给药后密切观察小

鼠的生存状况，对于小鼠出现的毒性症状进行相关记录小鼠的伴随毒性症状。热板的毒性反应积分，

3000r·min－1检测完后，另取部分小鼠，分别取血，AST，离心10min，取血清，以生化分析仪测定ALT，

NO，NOS，MDA，SOD，GSH，GSH-Px，BUN，CＲ。剖取部分小鼠肝脏称重并计算脏器指数。取一部分肝组

AST检测，织，留做肝内ALT，另取另一部分肝组织，常规HE染色，光学显微镜下观察其组织形态学变

化。对肝组织形态进行病理分级、积分：肝组织结构0分；肝小正常，无明显变性、坏死及炎症细胞浸润，

可见明显的混浊肿胀、气球样变或脂叶结构尚正常，

1分；肝小叶结构不清，肪变性，散在点状坏死（+），

2可见明显的灶状坏死，伴有炎症细胞浸润（），分；肝小叶结构不清、可见明显的片状坏死，伴有炎

3分；坏死细胞弥漫性存在于肝小症细胞浸润（），

4分。叶中央，层次较多，伴有炎症细胞浸润（），

2.3统计学方法

±s表示，采用SPSS11.5统计软件，数据用x珋计

量资料先进行正态检验，正态分布资料采用单因素非正态分布资料先转换成正态分布再用方差分析，

P＜0.05为数据单因素方差分析。进行组间比较，统计有显著性差异。

3结果3.1

胃寒证小鼠证候症状谱观察小鼠造模后，小鼠出现蜷缩（各组发生率均为

性差异；吴茱萸挥发油给药1d对热板法致痛胃寒

证小鼠有明显的镇痛作用，各个组分高、中、低剂量之间呈现一定的剂量依赖关系，与模型组比较，呈现不同程度的显著性差异。吴茱萸挥发油给药3d，药后30min对胃寒证小鼠即可显示明显的镇痛作用，与对照组呈非常显著性差异，其余各剂量组均呈极显著性差异，与双姜胃痛丸和扶他林镇痛效果相当；60min达到峰效应一直持续到240min未见明显降2。低，见表1，

表1

吴茱萸挥发油给药1d对胃寒证小鼠热板法痛阈的影TheeffectsofvolatileoilofEvodiaFructusonpain

±s，n=10）珋响（xTable1

thresholdofstomachcold-syndromeinmicebyhotplatemethod±s，n=10）afteradministrationfor1d（x珋

组别对照模型挥发油H

挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

药前基础痛阈值/s19.6±4.320.2±4.920.7±5.820.7±5.620.2±5.719.6±7.319.0±3.5

给药1d90min痛阈值/s28.7±33.925.7±16.8116.7±70.96）74.3±32.65）71.7±87.24）111.0±110.35）144.6±60.76）

注：双姜胃痛丸和扶他林组的剂量单位为g·kg－1；与对照组比

2）3）P＜0.01，P＜0.001；与模型组比较4）P＜0.05，较1）P＜0.05，5）

6）

P＜0.005，P＜0.001（表2～7同）。

3.2.2

吴茱萸挥发油对胃寒证小鼠镇痛机制研究胃寒证模型组与对照组比较，镇痛机制指标均无

显著性差异；吴茱萸挥发油高、中、低剂量对胃寒证小鼠发挥镇痛效应的机制主要与降低血PGE2水平，NO抑制疼痛介质释放有关；另外也与过氧化损伤、

损伤有关。与模型组比较，呈现不同程度的显著性4。差异，见表3，

3.3药效伴随毒试验研究3.3.1

吴茱萸挥发油组分对胃寒证小鼠药效伴随

·3840·

李晓宇等：基于胃寒证模型的吴茱萸挥发油功效及伴随毒副作用研究

表2

±s，n=10）吴茱萸挥发油给药3d对胃寒证小鼠热板法痛阈的影响（x珋

TheeffectsofvolatileoilofEvodiaFructusonpainthresholdofstomachcold-syndromeinmicebyhotplatemethodafterad-

Table2

±s，n=10）ministrationfor3d（x珋

组别对照模型挥发油H

挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

药前基础痛阈值/s20.5±5.919.4±2.018.7±5.819.3±6.020.0±6.018.8±3.818.2±4.8

30min23.1±5.221.6±1.641.7±12.66）40.2±9.46）35.4±8.16）37.8±8.26）43.9±9.36）

60min24.0±6.322.0±2.045.3±12.86）41.3±7.66）35.3±8.06）38.7±7.46）44.9±6.96）

给药3d的痛阈值/s90min26.6±6.024.6±2.348.8±8.96）43.4±6.86）43.3±11.66）40.5±7.36）46.1±8.66）

120min29.2±5.826.6±2.346.9±6.56）42.4±5.36）41.2±7.56）46.4±7.16）47.4±10.16）

180min29.1±6.825.6±2.345.2±8.16）46.6±9.06）42.1±10.16）41.5±7.36）43.0±11.86）

240min26.4±6.924.0±2.039.7±8.26）41.4±9.06）37.7±8.06）40.7±7.46）45.1±8.96）

表3±s，n=10）吴茱萸挥发油药后1d对胃寒证小鼠镇痛作用机制研究（x珋

ThestudyofvolatileoilofEvodiaFructusonthemechanismofabirritationinstomachcold-syndromemiceafteradministra-PGE2（A）0.323±0.0200.330±0.0250.294±0.0205）0.288±0.0334）

0.309±0.0200.298±0.020

5）

Table3

tionfor1d（x±s，n=10）珋

组别对照模型挥发油H

挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

NO/μmol·L－126.51±4.0226.69±5.0635.16±6.445）31.25±5.594）27.78±5.5931.59±5.5929.31±6.26

4）

MDA/μmol·L－1

6.32±0.836.53±1.497.80±1.185）6.95±0.886.91±0.887.18±0.854）7.05±0.88

SOD/U·mL－1200.02±33.12193.49±41.65160.39±31.384）166.69±31.384）181.41±31.44166.88±35.864）173.29±30.30

0.281±0.0335）

表4±s，n=10）吴茱萸挥发油药后3d对对胃寒证小鼠镇痛作用机制研究（x珋

ThestudyofvolatileoilofEvodiaFructusonthemechanismofabirritationinstomachcold-syndromemiceafteradministra-PGE2（A）0.321±0.0200.323±0.0200.287±0.0204）0.300±0.0204）0.322±0.0200.288±0.0205）0.299±0.0204）

Table4

±s，n=10）tionfor3d（x珋

组别对照模型挥发油H挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

NO/μmol·L－126.99±4.0226.16±3.7632.09±6.444）27.78±5.5927.57±5.5928.11±5.3228.01±5.59

MDA/μmol·L－1

6.33±0.836.14±0.867.84±0.965）7.22±0.884）6.69±0.886.97±0.854）6.63±1.15

SOD/U·mL－1191.89±29.7189.53±29.3160.50±31.94）168.80±31.4183.52±31.4168.99±35.9168.50±31.4

吴茱萸挥发油给药后没有出现腹泻，无

明显的怠动，也未见其他明显的异常表现。毒性症状3.3.2

吴茱萸挥发油组分对胃寒证小鼠药效伴随

毒试验体重变化的影响造模后小鼠体重出现一定程度的降低。给药后，吴茱萸挥发油对小鼠体重影响不明显，药后3d，小鼠体重慢慢恢复，与对照组比较无统计学差异，见表5。3.3.3

小鼠药效伴随毒生化指标检测胃寒证模型组与对照组比较，药效伴随毒生化指标均无显著

性差异；挥发油高、中、低剂量在给药1d后与模型

组比较，可导致胃寒证小鼠血中ALT和AST水平升高，第3天达到峰值，不同组0分各个剂量组与模型组比较有不同程度的显著性差异。吴茱萸挥发油高剂量组在给药3d后才可导致肝中ALT水平升高，挥发油高、中剂量组与对照组比较均有非常显著性差异，低剂量组与对照组比较无显著性差异。吴茱

3d后均没有导致血肾功指标的萸挥发油在给药1，

异常，提示没有肾脏损伤，见表6～9。

·3841·

2015年10月第40卷第19

期Vol.40，No．19October，2015

表5±s，n=10）吴茱萸挥发油对胃寒证小鼠药效伴随毒热板实验体重变化的影响（x珋

EffectsofthevolatileoilofEvodiaFructusonthebodyweightofhotplatetestofefficacywithpoisoninstomachcold-syn-

Table5

±s，n=10）dromemice（x珋

组别对照模型挥发油H

挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

造模前体重/g20.4±1.220.0±1.520.5±1.220.4±1.620.2±1.620.3±2.420.5±1.5

药后1d体重/g22.4±1.222.2±1.520.2±2.44）21.1±1.521.6±1.421.5±1.521.6±2.8

药后2d体重/g22.5±2.021.2±1.620.5±1.24）21.8±1.622.7±1.922.3±2.720.3±2.9

药后3d体重/g24.0±2.322.1±1.922.0±1.84）22.6±1.322.7±1.922.3±2.721.9±3.2

表6±s，n=10）吴茱萸挥发油药后1d对胃寒证小鼠药效伴随毒血和肝内生化指标的影响（x珋

EffectsofthevolatileoilofEvodiaFructusonthebiochemicalindexesoftheserumandliverofefficacywithpoisoninstom-

Table6

achcold-syndromemiceadministrationfor1d（x±s，n=10）珋

组别对照模型对挥发油H挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

血ALT/U·L－1

33.9±6.235.0±4.199.8±44.86）88.6±68.54）80.0±54.74）89.6±68.54）39.3±13.6

肝ALT/U·L－142.71±9.0045.17±9.3252.24±9.394）48.02±13.1647.67±15.0153.04±9.396）48.23±13.16

血AST/U·L－150.79±16.1248.11±14.30115.20±9.656）90.01±21.286）75.37±34.9991.66±36.195）60.05±14.80

肝AST/U·L－1120.59±20.67124.88±25.84146.49±16.905）138.08±12.254）112.35±20.30147.29±16.905）136.07±18.34

表7吴茱萸挥发油药后1d对胃寒证小鼠药效伴随毒血EffectsofthevolatileoilofEvodiaFructusonthebio-

BUN，CＲ的影响（x±s，n=10）珋Table7

chemicalindexesofBUNandCＲofefficacywithpoisoninstom-±s，n=10）achcold-syndromemiceadministrationfor1d（x珋

组别对照模型挥发油H

挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

BUN/mmol·L－16.578±1.2356.434±1.3356.282±1.4596.295±1.4596.409±1.1866.893±1.4996.272±1.459

CＲ/mmol·L－147.181±9.68348.211±7.89954.304±14.71843.380±12.91542.727±12.50650.550±8.44443.403±12.915

显著性差异；在上述药效指标里MDA是最灵敏的

药后第1天只有挥发油组分高剂量组出机制指标，

现明显升高，与模型组比较有显著性差异。从药效组分来看，挥发油高剂量组在药后第1天，即出现MDA，NO，NOS水平的增高，SOD，GSH，GSH-Px水平的下降；其余各个组分各个剂量组与对照组比较无显著性差异。在药后3d，挥发油组分高剂量组均

与模型组比较均有极显著性差异，挥呈现程度加重，

发油中剂量组呈显著性差异。挥发油高剂量组还可NOS含量升高，GSH降低，导致NO，与模型组比较

分别有显著性、非常显著性和显著性差异，提示吴茱萸挥发油导致的肝毒性损伤所涉及到的毒性机制主要为氧化损伤，呈现与肝毒性损伤相并行的“量-时-13。毒”关系，见表12，4讨论

吴茱萸挥发油对胃寒证小鼠药效作用显示，吴茱萸挥发油在药后30min对胃寒证小鼠即可显示

60min达到峰效应一直持续到明显的镇痛作用，

240min未见明显降低，呈现一定的“量-效”和“时-效”关系。其发挥镇痛效应的机制主要与降低血PGE2水平，抑制疼痛介质释放有关；另外也与过氧

3.3.4小鼠药效伴随毒重要脏器指数检测胃寒

证模型组与对照组比较，各重要脏器指数均无显著性差异；与模型组比较，吴茱萸挥发油均可导致肝脏

且随着剂量增大和给药时间延长，肝脏指指数增加，

数逐渐增加。吴茱萸挥发油各剂量均未出现肾脏比11。值增加，提示没有肾损伤，见表10，

3.3.5小鼠血清药效伴随毒机制指标检测·3842·

胃寒

证模型组与对照组比较，药效伴随毒机制指标均无

李晓宇等：基于胃寒证模型的吴茱萸挥发油功效及伴随毒副作用研究

表8

±s，n=10）吴茱萸挥发油药后3d对胃寒证小鼠药效伴随毒血和肝内生化指标的影响（x珋

EffectsofthevolatileoilofEvodiaFructusonthebiochemicalindexesoftheserumandliverofefficacywithpoisoninstom-

Table8

±s，n=10）achcold-syndromemiceadministrationfor3d（x珋

组别对照模型挥发油H

挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

血ALT/U·L－1

38.7±8.542.5±11.278.6±16.06）109.2±57.95）91.2±66.44）115.7±76.85）73.3±41.44）

肝ALT/U·L－152.6±15.351.1±11.287.9±31.75）77.8±23.74）55.8±16.366.6±11.24）56.4±14.2

血AST/U·L－167.0±12.367.7±19.098.6±26.55）134.8±59.35）92.9±19.497.5±36.04）77.5±17.2

肝AST/U·L－1136.9±23.2138.0±23.2169.0±19.05）161.0±19.04）130.6±22.8169.9±19.05）133.5±22.8

表9CＲ吴茱萸挥发油药后3d对小鼠药效伴随毒血BUN，EffectsofthevolatileoilofEvodiaFructusonthebio-

表11吴茱萸挥发油对药后3d胃寒证小鼠热板药效伴随EffectsofthevolatileoilofEvodiaFructusonthevis-

±s，n=10）影响（x珋Table9

chemicalindexesofBUNandCＲofefficacywithpoisoninstom-achcold-syndromemiceadministrationfor3d（x±s，n=10）珋

组别对照模型挥发油H挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

BUN/mmol·L－16.829±1.0656.629±0.8817.435±0.9857.302±1.2317.345±1.3717.917±1.1734）7.304±1.231

CＲ/mmol·L－144.32±6.0643.23±9.0948.41±6.4343.09±7.4440.92±7.6750.89±9.2241.26±7.67

±s，n=10）毒重要脏器指数的影响（x珋Table11

ceraweight/bodyweightofefficacywithpoisoninstomachcold-syndromemiceadministrationfor3d（x±s，n=10）珋

组别对照模型挥发油H挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

肝/体/g/100g4.300±0.2804.163±0.2594.930±0.5685）4.910±0.4925）4.813±0.7834）4.503±0.3404）5.403±1.3694）

肾/体/g/100g1.192±0.2071.161±0.1971.174±0.2161.131±0.1451.141±0.1841.095±0.1281.321±0.1084）

表10吴茱萸挥发油对药后1d胃寒证小鼠热板药效伴随EffectsofthevolatileoilofEvodiaFructusonthevis-

±s，n=10）珋毒重要脏器指数的影响（xTable10

ceraweight/bodyweightofefficacywithpoisoninstomachcold-syndromemiceadministrationfor1d（x±s，n=10）珋

组别对照模型挥发油H挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

肝/体/g/100g4.261±0.3354.144±0.5744.880±0.6864.290±0.6384.798±0.9904.874±1.1184.956±1.444

4）

指数逐渐增加。吴茱萸挥发油各剂量均未出现肾脏

比值增加，没有肾损伤。研究结果表明，吴茱萸药效伴随毒机制MDA是最灵敏的机制指标，从药效组分来看，挥发油高剂NO，NOS水平的量组在药后第1天，即出现MDA，

SOD，GSH，GSH-Px水平的下降；其余各个组增高，

分各个剂量组与水对照组比较无显著性差异。在药后3d，挥发油组分高剂量组均呈现程度加重，与模挥发油中剂量组呈显型组比较均有极显著性差异，

NOS含著性差异。挥发油高剂量组还可导致NO，GSH降低，量升高，与模型组比较分别有显著性、非

常显著性和显著性差异，提示吴茱萸挥发油导致的肝毒性损伤所涉及到的毒性机制主要为氧化损伤，呈现与肝毒性损伤相并行的“量-时-毒”关系。对比实验室前期吴茱萸挥发油对正常动物的药效与伴随

毒副作用研究，吴茱萸挥发油对正常小鼠和胃寒证小鼠的药效伴随毒研究结果有所区别，对胃寒证小鼠的功效有所增强，而毒性有所降低，表明中药的毒性与功效和证候密切相关。

·3843·

肾/体/g/100g1.294±0.1501.268±0.2391.367±0.2481.272±0.1211.426±0.2481.431±0.2601.288±0.228

NO损伤有关。吴茱萸挥发油对胃寒证小化损伤、

鼠伴随毒试验结果显示，吴茱萸挥发油对胃寒证小鼠有一定毒性，但与正常组比较有所降低，在给药1，3d后均没有导致血肾功能指标的异常，没有肾脏损伤。与模型组比较，吴茱萸挥发油均可导致肝脏指数增加，且随着剂量增大和给药时间延长，肝脏

2015年10月第40卷第19

期Vol.40，No．19October，2015

表12±s，n=10）吴茱萸挥发油对药后1d胃寒证小鼠药效伴随毒血清肝毒机制指标的影响（x珋

EffectsofthevolatileoilofEvodiaFructusontheindexesofhepatoxicmechanismofefficacywithpoisoninstomachcold-

Table12

±s，n=10）syndromemice1d（x珋

组别对照模型挥发油H

挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

SOD/U·mL－1200.02±33.12193.49±41.65160.39±31.384）166.69±31.384）181.41±31.44166.88±35.86173.29±30.30

4）

MDA/μmol·L－16.32±0.836.53±1.497.80±1.185）6.95±0.886.91±0.887.18±0.857.05±0.88

4）

NO/μmol·L－126.51±4.0226.69±5.0635.16±6.445）31.25±5.594）27.78±5.5931.59±5.5929.31±6.26

4）

NOS/U·mL－122.55±3.4223.82±3.8727.13±3.954）24.99±3.5324.76±3.5323.57±3.3225.01±3.53

GSH/mg·L－18.64±3.189.24±3.656.19±1.234）7.36±1.238.05±1.617.40±1.167.34±1.23

GSH-PX

/μmol·min－1·mL－1

625.56±34.99625.06±34.99589.71±29.604）596.77±29.60600.51±108.61570.60±32.035）596.56±29.60

表13±s，n=10）吴茱萸挥发油对药后3d胃寒证小鼠药效伴随毒血清肝毒机制指标的影响（x珋

EffectsofthevolatileoilofEvodiaFructusontheindexesofhepatoxicmechanismofefficacywithpoisoninstomachcold-

Table13

syndromemice3d（x±s，n=10）珋

组别对照模型挥发油H

挥发油M挥发油L双姜胃痛丸扶他林

剂量/mL·kg－1

－－1.00.50.251.170.026

SOD/U·mL－1191.9±29.7189.5±29.3160.5168.8183.5169.0168.5

±31.94）±31.4±31.4±35.9±31.4

MDA/μmol·L－16.33±0.836.14±0.867.84±0.965）7.226.696.976.63

±0.884）±0.88±0.85±1.15

NO/μmol·L－126.99±4.0226.16±3.7632.0927.7827.5728.1128.01

±6.444）±5.59±5.59±5.32±5.59

NOS/U·mL－123.08±3.4222.21±3.3227.6524.7824.5523.3624.80

±3.954）±3.53±3.53±3.32±3.53

GSH/mg·L－19.16±3.188.76±2.906.07±1.237.277.967.317.26

±1.23±1.61±1.16±1.23

GSH-PX

/μmol·min－1·mL－1

624.2±35.0605.0±37.9590.3±29.64）591.4±29.64）595.1±108.6565.2±32.06）601.2±30.6

综上所述，在临床证候背景下应用吴茱萸挥发油可以和肝功能指标相结合，为其发挥药效下伴随产生的毒副作用提供早期发现依据，减少不良反应的产生。吴茱萸挥发油功效与毒性的研究应借助中医的整体观、动态观，根据研究对象毒效的情况，选择不同状态的模型，把中医的思维与现代科技结合，研究其体内过程、毒性作用靶点、毒性产生机制以及“量-时-效-毒”之间的关系等方面，应考虑机体状态和合理辨证与辨病等因素所表达的药效及毒性的差

异，提出切合吴茱萸临床使用过程中不良反应预警方案和早期诊疗措施，为在证候背景下安全、合理、有效使用吴茱萸提供科学实验依据。

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［责任编辑马超一］

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