酱油氨基酸态氮的测定
酱油酸度滴定法
本法适用于以粮和豆饼、麸皮为原料发酵生产的酱和酱油的测定。
1. 原理
根据氨基酸的双性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性。用氢氧化钠标准溶液滴定,以酸度计定终点。—COOH被完全中和时,PH值约为8.5~9.5。本法准备快速,可用于各类样品游离氨基酸含量测定。
2. 仪器
① 酸度计
② 磁力搅拌器
③ 微量滴定管(10ml)
3. 试剂
① 36%甲醛溶液
② 0.05mol/L氢氧化钠标准溶液,标定后使用。
4. 操作步骤
① 准确吸取5.0mL液体样品,置于100mL容量瓶中,加水至刻度,混匀。
② 吸取20.0mL上述样品稀释于200mL烧杯中,加水60mL,开动磁力搅拌器,用0.05mol/LNaOH标准溶液滴定至酸度计指示为pH=8.2(记下消耗氢氧化钠溶液的体积,可用于计算总酸含量)。
③ 加入10.0mL甲醛溶液,混匀。再用0.05mol/LNaOH标准溶液继续滴定至pH=9.2,记录消耗标准溶液的体积(V1)。
取80mL水,在同样条件下做试剂空白试验,记录消耗标准溶液的体积(V0)。
5. 计算
X=〔(V1—V0)*c*0.014*100〕/〔5*(V/100)〕
式中:X——样品中氨基酸态氮的质量分数,%
V1——样品稀释夜在加入甲醛后滴定至终点(pH=9.2)所消耗氢氧化钠标准溶液的
体积;
V0——空白试验加入甲醛后滴定至终点所消耗氢氧化钠标准溶液的体积; V——滴定时吸取样品稀释溶液体积;mL;
c——氢氧化钠标准溶液浓度,mol/L。
5——测定用液体样品毫升数。
6. 说明
① 加入甲醛后应立即滴定,不宜放置时间过长,以免甲醛聚合,影响测定结果。 ② 样品中若含有铵盐,由于铵离子也能与甲醛作用,将使测定结果偏高。
③ 对于浑浊和色深样液可不必经处理而直接测定。