出血热病毒IgMIgG抗体的检测作业指导书
1. 基本原理 采用胶体金免疫层析技术，在玻璃纤维纸上预包被胶体金标记的汉坦病毒重组抗原，在硝酸纤维膜的检测线和对照线分别包被抗人IgG γ链单克隆抗体，抗人IgMu 链单克隆抗体和免抗汉坦病毒抗体。检测阳性标本是，血清（浆）中汉坦病毒（IgG 或IgM ）与Au-NP-Ag 结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗人IgG γ链单克隆抗体或抗人IgMu 链单克隆抗体形成“Au-NP-Ag 汉坦病毒抗体-抗人IgG γ（或抗人IgMu ）-固相材料”夹心物而凝聚成显色，游离金标抗原则在对照线处与兔抗汉坦病毒抗体结合而富集显色。阴性本仅在对照线处显色。
2. 试剂存储条件及有效期
于4～30℃避光密封干燥保存，有效期为18个月。
3. 注意事项
使用前应在37℃环境下平衡30分钟，不同批号的试剂不能混用，应在试剂有效期内使用。
4. 样品要求
4.1）及时检测，若不能及时检测的需将样品保存在2～8℃保存3天。若保存时间超过一周
则保存在-20℃以下，并避免反复冻融。
4.2）避免使用黄疸、溶血或高血脂样品。
5. 检测方法
5.1）样品准备：样品1：50稀释：每个小孔各加入样品稀释液100 ul ，加2 ul待检血清样品，充分混匀。
5.2) 平衡：开封铝箔袋，取出检测试剂条，水平放置并编号。
5.3) 加样：在检测试剂条的加样孔中加样已稀释的样品70 ul，20分钟内观察并记录结果。
5.4）结果判定
5.4.1）阳性：IgG 阳性：在IgG 检测线和对照线位置出现两条紫红线。
IgM 阳性：在IgM 检测线和对照线位置出现两条紫红线。
IgG 、IgM 同时阳性：在IgG 检测线、IgM 检测线和对照线位置出现三条紫红线。
5.4.2）阴性：只在对照线位置出现一条紫红线。
5.4.3）无效：未出现紫红线或只有检测线出现而对照线没有出现。
6. 相关文件
6.1检测和校准实验能力的通用要求
6.2临床实验室质量保证的要求
6.3流行性出血热病毒诊断标准
6.4实验室生物安全通用要求
6.5临床实验室废物处理原则
6.6临床实验室安全准则
6.7生物安全手册
6.8生物安全管理手册
7. 质量记录
7.1流行性出血热病毒抗体检测原始记录
7.2检验报告