BX51显微镜软件应用-Olympus
荧光显微镜操作手册
1.
Olympus IX71
物镜: 物镜倍数 相差环
4 ×0.13 PHL
10×0.30 PH1 20×0.45 PH1
40×0.60 PH2 60×1.35 oil (无相差)
荧光滤色块转盘: 1. WU 蓝
2. WIB 绿(长通)
3. WIBA 绿(带通)
4. WIGA 红
5. CFP
6. YFP
操作步骤:
相差观察:
1. 打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关)
2. 将样品置于载物台上
3. 将光路选择旋钮调至观察位置
4. 从低倍镜开始观察,调节到与镜头相匹配的相差环,
荧光滤块转盘拨到 “1”的位置
5. 调节透射光光强,调节焦距,找到预观察视野
6. 依次换到高倍镜,(注意调节相差环)观察样品
7. 拍照时将光路选择旋钮调至相机位置
荧光观察:
1. 打开明场电源开关
2. 打开汞灯开关
3. 将样品置于载物台上
4. 将荧光光路shutter 打开(“○”为开,“●”为关),需保护样品时关闭shutter
5. 将光路选择旋钮调至观察位置
6. 根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置
7. 通过两组减光滤片调节激发光强度
8. 从低倍镜开始观察,调焦,找到预观察视野,
9. 依次换到高倍镜头,观察样品
10. 拍照时将光路选择旋钮调至相机位置
普通明场观察:
1. 打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关)
2. 将样品置于载物台上
3. 将光路选择旋钮调至观察位置
4. 从低倍镜开始观察,相差环拨到明场(BF )位置,荧光滤色块转盘拨到“1”的位置
5. 调节透射光光强,调焦,找到预观察视野
6. 依次换到高倍镜,观察样品
7. 拍照时将光路选择旋钮调至相机位置
关机:
1. 关闭汞灯电源(注意:汞灯需使用半小时以上方可关闭,关闭半小时以后方可再次开启)
2. 将透射光强调到最小,透射光选择按钮按出
3. 关闭明场电源开关
4. 将镜头转到低倍镜,取出样品,若使用过油镜用干净
的擦镜纸擦拭镜头
5. 确认数据已经保存,关闭软件
6. 使用光盘拷贝数据(禁止使用移动储存设备拷贝数据)
7. 关闭电脑,登记使用时间、荧光数字等使用情况
Olympus SZX16
物镜: 1×
变倍: 0.7~11.5
荧光滤色块转盘: UV 蓝
GFPHQ 绿
RFP2 红
操作步骤:
明场观察:
1. 将样品置于载物台上
2. 推入光路选择拉杆,荧光滤块转盘拨到空位
3. 选择合适的光源
⑴ 冷光源观察
使用不透明的底板(黑或白),打开环形光电源开关(“︱”为开,“○”为关),调节光强度,找到
预观察视野,调节变倍比,观察样品
⑵ 底光源观察
使用透明玻璃底板,打开底座电源开关(“︱”
为开,“○”为关),将LBD 滤片推入光路,调
节反光镜方向、对比度和光强度,找到预观察视
野,调节变倍比,观察样品
4. 拍照时将光路选择拉杆拉出
荧光观察:
1. 将样品置于载物台上
2. 一般选择黑色不透明底板
3. 打开汞灯电源开关
4. 荧光光路挡板推出
5. 根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置
6. 找到预观察视野,调节变倍比
7. 观察样品
8. 拍照时将光路选择拉杆拉出
关机:
1. 关闭汞灯电源(注意:汞灯需使用半小时以上方可关闭,关闭半小时以后方可再次开启)
2. 将明场光强调到最小,关闭明场电源开关
3. 取出样品,将变倍比调到最小
4. 确认数据已经保存,关闭软件
5. 使用光盘拷贝数据(禁止使用移动储存设备拷贝数据)
6. 关闭电脑,登记使用时间、荧光数字等使用情况
软 件 应 用
1. 双击打开DP Controller软件
2. 点击预览键,选择image size(一般1360 X 1024)、objective 、ISO sensitivity(明场拍照选择ISO200,荧光拍照选择ISO400) 、exposure mode(一般选择manual) ,调节exposure time
3. 调节黑/白平衡(明场拍照用白平衡,荧光拍照用黑平衡)。点击color 面板,点击one touch 在图片背景位置选个小框,软件自动做好平衡
4. 若需添加标尺,点击scale 面板,选中show scale ,选择标尺显示模式和长度,选中free size,改变标尺长度
5. 若需调整图象色阶,点击level 面板,拖动小滑块调整色阶,可以改变图象对比度
6. 点击capture 面板,还可再次调节曝光时间、图象亮度及对比度。点击拍照键,获取图象
7. 此时弹出DP manager软件,选择保存图象格式保存图象到硬盘上
8. 若需将不同通道图象合成,可点击DP manager软件中image →image composition ,选择需合成图片的名称,点击apply ,merging image生成,保存合成图象
9. 若需拍摄Timelapse, 点击Timelapse/Movie面板,选择拍摄模式,选择拍摄时间、间隔时间等参数,再点击capture 面板点击拍摄键,即可拍摄连续图片
Olympus BX51
物镜: 4 ×0.16 (无DIC )
10×0.40 20×0.75 40×1.00 oil 100×1.40 oil
荧光滤色块转盘: 1. WU 蓝
2. WIB 绿(长通)
3. WIBA 绿(带通)
4. WIG 红
5. CFP 青
6. YFP 黄
Olympus BX51
操作步骤:(注意:样品须在低倍镜下放置和取下) DIC 观察:
1. 打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关)
2. 将样品置于载物台上,用样品夹夹好
3. 将起偏器、检偏器、DIC 棱镜推入光路,荧光滤块转盘拨到“1”位置,DIC 棱镜应与相应的物镜倍数相匹配
4. 先选用低倍物镜(“10×”)
5. 调节透射光的强度,调节焦距,找到视野
6. 换到高倍镜头,观察样品
7. DIC 观察时,光路选择拉杆拉到中间位置,既可观察,也可拍照
荧光观察:
1. 打开明场电源开关
2. 打开汞灯电源开关
3. 将样品置于载物台上,用样品夹夹好
4. 检偏器、DIC 棱镜在光路外
5. 将荧光光路shutter 打开(“○”为开,“●”为关),需保护样品时关闭shutter
6. 光路选择拉杆推至最里边
7. 根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置
8. 通过两组减光滤片调节激发光强度
9. 从低倍镜开始观察,调焦,找到预观察视野,
10. 依次换到高倍镜头,观察样品
11. 拍照时光路选择拉杆完全拉出
普通明场观察:
1. 打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关)
2. 将样品置于载物台上,用样品夹夹好
3. 起偏器、检偏器、DIC 棱镜在光路外,荧光滤块转盘拨到“1”位置,DIC 棱镜拨到明场(BF )位置
4. 先选用低倍物镜(“4×”)
5. 调节透射光的强度,调节焦距,找到视野
6. 依次换到高倍镜头,观察样品
7. 光路选择拉杆拉到中间位置既可观察,也可拍照 关机:
2. 关闭汞灯电源(注意:汞灯需使用半小时以上方可关闭,关闭半小时以后方可再次开启)
3. 将透射光调到最小,关闭明场电源开关
4. 将镜头转到低倍镜,取出样品,若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头
5. 确认数据已经保存,关闭软件
6. 使用光盘拷贝数据(禁止使用移动储存设备拷贝数据) 关闭电脑,登记使用时间、荧光数字等使用情况
注意事项
1. 工作日使用仪器, 开关机器、汞灯由工作人员负责,
操作者不得自行开关!
2. 若使用油镜,使用完毕后,镜头的檫拭也由工作人
员负责。
3. 中午、晚上及双休日为经过培训后具有完全独立操
作资格使用者的使用时间,需本平台特批,课题组长签字同意并担保仪器的使用安全。