浅析生活饮用水微生物检验质量控制

　　【摘 要】从采样、环境、仪器、培养基、人员和检验操作等几个方面浅析了生活饮用水微生物检验质量控制。微生物检验质量控制是一项长期、艰苦、细致而又繁琐的工作，贯穿于从样品的采集到检验报告的发出的整个过程。只要我们在日常工作中从以上几个方面着手，并形成记录实现检验结果可追溯，就能做好微生物检验质量控制工作。

　　【关键词】生活饮用水；微生物检验；质量控制

　　随着新国标的全面实施和实验室资质认定工作的持续开展，质量控制和管理工作越来越受到重视。由于微生物的不稳定性，全国城市供水水质监测机构质量控制考核已经开展了12次，但一直缺少微生物项目。微生物检验能够反映生活饮用水卫生状况，有效控制生活饮用水微生物风险，保证水质安全。为了保证检验结果的可靠性，开展质量控制是十分必要的。而GB/T5750-2006《生活饮用水标准检验方法》水质分析质量控制，主要是针对理化指标的，对微生物检验质量控制基本没有涉及。本文从采样、环境、仪器、培养基、人员和检验操作等几个方面浅析了生活饮用水微生物检验质量控制，对供水企业微生物的日常检验有一定的借鉴意义。

　　1 微生物样品采样的质量控制[1]

　　一个有效的质量控制程序必须从样品的采集开始。微生物样品采集除了满足GB/T5750-2006《生活饮用水标准检验方法》的要求，还要注意以下两点：一、应放水数分钟直至两次浑浊度测得值一致，确保排除滞留水和生物膜的影响；二、采样后要及时在0℃～4℃避光保存（带冰袋的保温箱），且在4h以内检验。

　　2 微生物检验环境的质量控制

　　洁净室的操作环境对检验结果的质量影响很大，操作区域洁净度应达到百级。检验操作时应遵循无菌操作要求。防止检验环境和人员对检验样品的污染，以及样品之间的交叉污染。

　　（1）微生物实验室布局应合理，分区清晰。要有准备室、洁净室和培养室等，并与实验流程相符合，尽量降低往返和迂回的概率。

　　（2）洁净室应定期检查沉降菌并记录。如不符合要求应及时清洗、更换高效过滤器和紫外灯，再检查沉降菌直至满足要求。

　　（3）应制定洁净室的清洁、消毒、灭菌、使用和应急处理程序。

　　（4）培养室

　　3 仪器设备的质量控制

　　高压灭菌器和干燥箱（能稳定达到160℃）是微生物检验必不可少的灭菌器，是保证微生物检验结果可靠性的前提条件。无论是灭菌还是培养，温度和持续时间是关键参数。

　　（1）高压锅、培养箱、干燥箱、天平、移液器等应定期检定，保证仪器设备在检定有效期内使用。

　　（2）培养箱应有良好的隔热效果，保证一年四季培养温度变化在±1℃内。培养箱和冰箱要有早晚两次温控记录。

　　（3）高压灭菌锅应采用适宜的方式做灭菌效果检查。

　　（4）已灭菌的培养基和采样瓶等应明确标示，并注明保质期。

　　4 培养基的质量控制

　　（1）购买通过ISO9000质量管理体系认证的厂家的产品。

　　（2）每到一批营养琼脂培养基用水源水检验，与近期已验收的培养基作对比。乳糖蛋白胨培养基用含少量大肠埃希菌的水样采用15管法检验，应有阳性管和阴性管。

　　（3）培养基的灭菌处理应按GB/T5750-2006《生活饮用水标准检验方法》严格执行，特别是含糖类的培养基，应采用115℃维持20min高压灭菌。

　　（4）要有培养基配制记录。保证培养基在有效期内使用，结块的培养基不得使用。

　　5 微生物检测操作的质量控制

　　微生物检验操作每一动作步骤都关系结果的可靠性，均需严格执行无菌操作技术，防止人为污染、环境污染和样品交叉污染。另外，应特别注意以下几个方面：

　　（1）要有操作手册包括检验方法和无菌操作规程，并严格遵守。质量监督员应对无菌操作进行重点监督并记录。

　　（2）每批饮用水检测，应有阳性和阴性对照。可以采用培养基空白、灭菌水和水源水检测作对照。

　　（3）即使在百级洁净区检测，仍然要在酒精灯火焰上方无菌操作。

　　（4）试管、烧瓶和样品瓶，开塞或盖之前要对口部进行消毒。操作后应及时盖好塞子或瓶盖，切忌口部向上和长时间暴露于空气中。

　　（5）取样和倾注培养基一定要充分摇匀。正确认识微生物在水中的聚集状态，采取无规则的振摇手势充分混匀。

　　6 检验人员的要求

　　由于微生物检验采取的是活菌培养法，具有不稳定性和随机性，微生物检验人员除了要具备水质分析基础知识和技能以外，还要能正确理解和运用无菌操作技术，避免环境、人员和样品的相互污染；还要能认识到检验微生物与检验均质样品的不同本质，尽量减少取样的随机性。

　　（1）要具备微生物检验的专业基础知识和熟练的检验操作技能，最好是全日制大专以上微生物相关专业毕业，并持证上岗。

　　（2）要不断地学习饮用水微生物检验知识和技能，并有培训和考核记录。

　　7 平行误差控制

　　微生物检验的平行误差不能简单的以相对误差来评判。微生物检验结果是以一定的置信水平为基础的，涉及生物统计学知识，对于微生物专业人员较缺乏的供水企业来说是难以掌握的。长期的菌落总数检验结果表明：当平皿计数大于300时，平行检测结果在一个数量级；当平皿计数在150～300时，相对误差在20%之内；当平皿计数在60～150时，相对误差在15%之内；当平皿计数20～60时，绝对误差在10以内；当平皿计数小于20时，绝对误差在5以内。当检测结果超出上述规律时，需追溯每个检验过程和步骤，从采样、环境、仪器、培养基、人员和检验操作等几个方面逐步控制。

　　8 实验室间比对

　　通过有效的比对，找出不足和差距，不断提高实验室技术水平。可以利用每次的本地卫生监督检查做实验室间的比对。

　　9 结语

　　微生物检验质量控制是一项长期、艰苦、细致而又繁琐的工作，贯穿于从样品的采集到检验报告的发出的整个过程[5 ]。随着人们对饮用水质量的要求越来越高，要求我们更好地做好质量控制工作，提供客观可靠的检验数据。只要我们在日常工作中从采样、环境、仪器、培养基、人员和检验操作等几个方面着手，并形成记录实现检验结果可追溯，就能做好微生物检验质量控制工作。

　　参考文献：

　　[1]GB/T 5750-2006 生活饮用水标准检验方法[S].

　　[2]GB/T 27450-2008实验室质量控制规范―食品微生物检测[S].

　　[3]中国城镇供水协会编.水质检验工[M].中国建筑工业出版社，2005.

　　作者简介：

　　程权，男，工程师，全日制生物科学专业本科毕业，从事生活饮用水微生物检验十余年。