注射剂研发的基本流程细则

注射液研发的流程

一、 试验前期资料信息的收集

1、初步调查品种的基本情况，包括品种的市场份额、销量，药物研究历史等安全有效的信息，有无专利和保护信息、技术壁垒等。

2、综合评估

撰写项目可行性分析报告，包括产品基本信息，立项目的与依据，有无知识产权和药政保护，产品的特点及试验难易程度、设备是否齐备、国家政策风险等，有无技术壁垒，产品优劣势，经费预算与市场回报。

3、是否有合法原料提供，及价格

如果只是进行制剂的仿制研究，必须提供原料药的合法证明；对于仿制原料的话，必须对药物的合成工艺打通，优化中试生产，质量合格，杂质种类和数量不高于上市品，必须与制剂一同申报。

4、了解临床资料、不良反应资料及产品说明书等相关资料

5、了解国内及进口制剂剂型及规格

全面掌握拟仿制药物的国内外上市情况，包括上市的剂型、规格、厂家等。

6、产品质量标准

查阅产品相关的国内标准（药典标准和国内首仿标准）和进口标准，并试着草拟自己的标准。

7、工艺研究资料

查阅参考文献（CNKI、博硕论文、维普、专利），查阅其合成工艺或制剂工艺，或查找相同剂型的工艺研究资料，对其分析汇总，撰写自己的初步研究方案。

8、专利、国家政策及生产注册情况

查询专利、国家政策及生产注册情况，以保证产品研究能够顺利报批。

二、 试验用物品的采购

1、原料的采购

如果只是申请制剂的仿制，必须提供原料的合法来源及其证明文件，必须选择国内外合法的厂商进行原料的购买，购买时需要厂家提供原料药

的批准证明文件，药品标准，检验报告，原料药生产企业的营业执照，药品生产许可证，药品生产质量管理规范认证证书，购销发票，供货协议等复印件，并要注意原料的种类，是注射级别的还是口服级别的，原料的包装规格，原料标准是药典标准还是注册标准，原料的采购量是否充足，价格如何等。

2、辅料和包材的购买

要保证辅料和包材的合法来源，通过对仿制药处方及剂型的分析，粗略知道所用辅料和包装材料的种类和用量，已有的材料不需购买，没有的在国家批准的厂家购买辅料和包材，并需要厂家提供辅料和包材的厂家资质（生产许可证和营业执照，GMP 证书），药品包装材料和容器注册证，发票，检验报告，标准，购销合同等的复印件。要注意辅料的种类，有食用、药用和注射级之分，辅料的规格，级别，是否为药用，辅料的标准及辅料包材的用量及用途。辅料采购后还用根据自身情况，拟定检验标准，对辅料和包材进行检验，出具检验报告书。

3、对照品的购买

针对拟仿制品，首先查询国家中检院有无标准品提供，，如果中检院没有标准品提供的，可以在国内外其他厂家购买，但要保证合法性，采购时要注意对照品的种类，是否需要购买异构体，对照品的规格及用途，是定性还是定量使用，采购量是否充足，价格如何。

4、对比药物（原研品）的购买

仿制药必须进行对比研究，首选原研厂产品进行对比，要购买市售品，重点购买原研药物，另外购买一部分国内仿制品进行全面研究以更具有说服力，注意市售品的生产厂家，剂型和产品规格及包装规格，采购量是否充足，必须提供购货发票，如果有质量标注更好。

5、试验研究用耗材的购买

通过查阅质量标准，及草拟的试验方案，先期购买试验可能用的耗材，如色谱柱、杂质对照品等，并应有相应资质材料、发票等。

三、 处方前研究

1、药物理化性质测定

包括药物在各种溶剂中溶解度、在各pH条件下的溶解度，pKa值、油/水分配系数、比旋度、熔点、晶形、水分等。

2、考察药物在固态和/或液态下对光、热、湿、氧等的稳定性情况、所含杂质情况。

3、观察、测定药物的基本性状

包括药物的外观、吸湿性等。

4、考察、了解药物的生物学性质（在生理环境下的稳定性、药代动力学性质、毒副作用及治疗窗）。

5、药物的鉴别试验

参考原料药的质量标准或出厂检验标准、或参考相关资料对药物进行鉴别试验，包括化学鉴别和色谱鉴别等。鉴别试验方法要进行验证，项目包括专属性和耐用性。

6、对比药物（原研品）研究

参考已上市的制剂的质量标准（或参考其它注射液的质量标准），逐项对原研品进行试验研究。

7、考察辅料相容性

调研分析拟用辅料的理化性质与合理用量范围，调研分析药物与拟用辅料之间、不同辅料之间的相容性，进行相容性研究。

四、 质量分析方法研究

（一）含量检测（含方法学验证）

参考已上市制剂的质量标准（或参考其它注射液的质量标准，或自拟标准）中含量测定方法项，一般情况下，有滴定法、紫外分光光度法和高效液相色谱法，以后两项为多。含量测定需要进行方法学验证，包括准确度、精密度（重复性和中间精密度）、专属性、线性、范围、耐用性。

1、紫外分光光度法

1) 紫外波长扫描确定含量检测最佳波长（制剂处方确定后或用原研品，进行波长扫描，保证在选择的波长处辅料无干扰）。

2) 准确度（回收率）在规定范围内，设定3个浓度，每个浓度分

别制备3个样品，进行测定。

3) 精密度 a、重复性（设定3个浓度，每个浓度3个样品或相当于100%浓度的样品至少测定6次）；b、中间精密度（不同日期、

不同分析人员、不同设备）；c、重现性（制剂按一定的浓度处

理，进样六次）。

4) 专属性（在杂质可获得的情况下，试样中可加入杂质和辅料，考察测定结果是否受干扰，并与未加杂质和辅料的试样比较测

定结果；在杂质或降解产物不能获得的情况下，可将含有杂质

或降解产物的试样进行测定，与另一经验证的方法或药典方法

比较结果；用强光照射、高温、酸碱水解或氧化的方法进行加

速破坏，以研究可能的降解产物和降解途径，对比二法的结果）

5) 线性（至少制备5份系列浓度的样品，列出回归方程、相关系数和线形图）

6) 范围（应为测试浓度的80%～120%）

7) 耐用性（被测溶液的稳定性、样品的提取次数、时间等）

2、高效液相色谱法

1）确定固定相和流动相（无参考标准的，要先进行筛选）

2）确定进样量、流速、柱温、检测器（有紫外吸收的用紫外检测器，先用紫外分光光度计扫描样品，确定紫外检测波长）

3）准确度（回收率）在规定范围内，设定3个浓度，每个浓度分别制备3个样品，进行测定。

4）精密度 a、重复性（设定3个浓度，每个浓度3个样品或相当于100%浓度的样品至少测定6次）；b、中间精密度（不同日期、不

同分析人员、不同设备）；c、重现性（制剂按一定的浓度处理，

进样六次）。

5）专属性（在杂质可获得的情况下，试样中可加入杂质和辅料，考察测定结果是否受干扰，并与为加杂质和辅料的试样比较测

定结果；在杂质或降解产物不能获得的情况下，可将含有杂质

或降解产物的试样进行测定，与另一经验证的方法或药典方法

比较结果；用强光照射、高温、酸碱水解或氧化的方法进行加

速破坏，以研究可能的降解产物和降解途径，对比二法的结果）

6）线性（至少制备5份系列浓度的样品，列出回归方程、相关系数和线形图）

7）范围（应为测试浓度的80%～120%）

8）耐用性（被测溶液的稳定性、样品的提取次数、时间等；流动相的组成和pH值、不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱、柱温、

流速等）

（二）有关物质检测（含方法学验证）

对在合成、纯化和贮存中实际存在的杂质和潜在的杂质，应采用有效的分离分析方法进行检测。对于表观含量在0.1%及其以上的杂质以及表观含量在0.1%以下的具有强烈生物作用的杂质或毒性杂质，予以定性或确证其结构。对在稳定性实验中出现的降解产物，也应按上述要求进行研究。

杂质的检测分析方法应专属、灵敏。杂质检查应尽量采用现代分离分析手段，主成分与杂质和降解产物均能分开，检测限应满足限度检查要求，对需作定量检查的杂质，方法的定量限应满足相应的要求。

杂质测定中需检验的项目和验证内容包括需定量（准确度、精密度（重复性、中间精密度）、专属性、定量限、线性、范围、耐用性）和只需考察限度（专属性、检测限、耐用性）。

杂质研究一般采用薄层色谱法、高效液相色谱法。对高效液相色谱法应做下述研究。

1、确定固定相和流动相（无参考标准的，要先进行筛选）

2、确定进样量、流速、柱温、检测器（有紫外吸收的用紫外检测器，先用紫外分光光度计扫描样品，确定紫外检测波长）

3、准确度（杂质定量测定）向制剂中加入已知量杂质进行测定。如不能得到杂质或降解产物，可用本法测定的结果与另一成熟的方法进行比较。在不能测得杂质或降解产物的响应因子或不能测得对原料药的相对响应因子的情况下，可用原料药的响应因子。应

明确表明单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比或面积比。 进行回收率测定，在规定范围内，设定3个浓度，每个浓度分别制备3个样品，进行测定。

4、精密度（杂质定量） a、重复性（设定3个浓度，每个浓度3个样品或相当于100%浓度的样品至少测定6次）；b、中间精密度（不同日期、不同分析人员、不同设备）；c、重现性（制剂按一定的浓度处理，进样六次）。

5、专属性（在杂质可获得的情况下，试样中可加入杂质和辅料，考察测定结果是否受干扰，并与为加杂质和辅料的试样比较测定结果；在杂质或降解产物不能获得的情况下，可将含有杂质或降解产物的试样进行测定，与另一经验证的方法或药典方法比较结果；用强光照射、高温、酸碱水解或氧化的方法进行加速破坏，以研究可能的降解产物和降解途径，对比二法的结果）

6、检测限（杂质检查）一般以信噪比为3:1或2:1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。

7、定量限（杂质和降解产物用定量时）一般以信噪比为10:1时相应浓度或注入仪器的量确定定量限。

8、线性（杂质定量测定时）至少制备5份系列浓度的样品，列出回归方程、相关系数和线形图。

9、范围（杂质定量测定时）应根据初步实测，拟订为规定限度的±20%。

10、 耐用性（杂质测定定量和限度中）被测溶液的稳定性、样品的提取次数、时间等；流动相的组成和ph值、不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱、柱温、流速等。

五、 处方工艺研究

（一）处方工艺摸索

1、规格的确定

参考国内外上市品确定规格。并确定应使用的安瓿瓶，且应对安瓿瓶的材质进行筛选。

2、处方设计

处方组成以参考原研处方为依据，对辅料的用量根据其常用量来摸索，若达不到理想结果，可以根据剂型和常用辅料及其用量，参考中国药典制剂通则和药审中心指导原则自行设定。

1）根据药物的基本性质，首先看水溶性如何，根据规格要求是否需要增溶。

2）对原料药进行酸、碱、氧化、光照、高温等破坏试验，看药物在什么条件下不稳定，基本确定注射剂的pH范围，是否需要

加抗氧剂或充氮气、是否需要棕色安瓿瓶及确定贮藏条件等。

3）初步制备一批注射剂，考察药物在不同灭菌条件下的稳定性情况，和原研制剂对比，基本确定灭菌条件。

4）根据以上试验结果，参考原研制剂，综合评定，草拟处方，初步确定灭菌条件。

5）明确影响制剂质量的关键因素。

3、处方筛选及优化

对草拟的处方，采用各种实验设计（如单因素考察、正交设计、均匀设计等），对所加入的每一种辅料，设定一系列的比例，配制溶液，灌封安瓿，灭菌，按注射剂稳定性重点考察项目，考察性状、含量、pH值、可见异物、有关物质等，并进行影响因素试验，综合数据，并和原研制剂进行比对，考察原辅料相容性，确定每一种辅料的使用量。初步确定2～3个较好的处方。

4、 处方确定

对初步确定好的较好处方，制备小样，对小样样品进行影响因素考察，按注射剂稳定性重点考察项目，考察性状、含量、pH值、可见异物、有关物质等，为评价指标选择确定最优的处方，并初步确定制备工艺过程。

5、用最优处方，配制样品，加入不同比例的活性炭，用于除去热原，筛选活性炭的使用量，并考察活性炭对药物是否有吸附，确定活性炭的使用量，如果活性炭对药物有吸附，则在处方中要考虑吸附损耗的量。

6、灭菌工艺确定

用最优的处方，用确定的制备工艺制备一批样品，用不同的灭菌温度和不同的灭菌时间进行灭菌工艺的筛选。一般情况先用湿热灭菌，设定115℃(30min、45min、60min)，121℃（15min、20min、30min、45min、60min），126℃（8min、15min、20min、30min），确定最终灭菌条件。对不适宜高温灭菌的样品，再考虑其它灭菌方式，比如干热灭菌、辐射灭菌、气体灭菌或过滤除菌等。最终确定灭菌工艺。

7、注射液冻融试验

将样品放置在0℃、-18℃，于2天取样，看是否能复溶完好。

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8、拟定质量标准

（二）中试放大、完善处方工艺

根据确定的处方及工艺，使用大生产设备，达到中试生产规模，完善处方与工艺，生产三批样品，并填写批生产记录，确定各步操作的控制项目及参数和范围。三批样品作为质量研究和稳定性研究样品。对样品进行检验。产品合格继续进行工艺验证，不合格，则修订处方与工艺。制订出最终的处方与工艺。

（三）工艺验证

根据处方与工艺，在生产车间，达到批量级的生产规模生产三批制剂，填写批生产记录，作为工艺验证研究样品，对样品进行检验。

六、 质量研究

如有原标准，以现有标准为依托，主要参照现行标准中的方法，对主要方法学进行验证，并进行仿制药与原研品的全面质量比较。为全面考察产品质量，必要时增加标准以外的项目研究。如无标准参考或原标准不适用，可参考化学药物质量控制分析方法验证指导原则进行质量研究，参照药典同剂型标准拟定本品的质量标准草案，检测项目根据剂型和药物的特点确定。

对中试三批样品和对比原研制剂进行检测，研究，一般包括以下项目：

（一）性状、外观

（二）鉴别，包括理化鉴别和色谱鉴别项目

（三）检查

1、一般检查项

按照制剂通则检查。

2、微生物限度（无菌、细菌内毒素）检测

需进行完整的方法学试验

3、有关物质

可以验证原标准的适用性，如果经方法学验证通过，可以使用原方法，不适合必须寻找其他方法，并对方法学进行完整的验证。

4、含量测定

可以验证原标准的适用性，如果经方法学验证通过，可以使用原方法，不适合必须寻找其他方法，并对方法学进行完整的验证。

根据拟定的标准草案，检测三批中试样品，并出具检验报告书。

七、 稳定性研究

（一）影响因素试验

取一批制剂进行高温、高湿、强光照射试验研究，参考质量标准草案进行检测。以考察处方的合理性与生产工艺及包装条件。

（二）加速试验

参考化学药物稳定性研究技术指导原则，根据产品的特点和剂型常用包装材料，确定包材，对三批样品进行加速试验。按照质量标准草案进行检查。通过加速药物制剂的化学或物理变化，探讨药物制剂的稳定性，为处方设计、工艺改进、质量研究、包装改进、运输、贮存提供必要的资料。

（三）长期试验

参考化学药物稳定性研究技术指导原则，根据产品的特点和剂型常用包装材料，确定包材，对三批样品进行长期试验。按照质量标准草案进行检查。为制订药品的有效期提供依据。

八、 药理毒理研究

大多数仿制药的研究只需要提供药理毒理文献研究资料，通过查阅国内

外文献数据，找到该药物的药理毒理资料，进行整理归纳总结；对要求进行研究的可以委托相关单位完成，须签订合同书，并在合同书和报告书上盖委托单位印章。

九、 临床研究

对有需要进行临床研究的样品，可以委托相关单位完成。