日粮添加亚油酸和二十二碳六烯酸对奶牛瘤胃原虫奇数碳链脂肪酸和支链脂肪酸的影响
２０１０年２月第ｌ期１２～１５
甘肃农业大学学报
ＪＯＵＲＮＡＬＯＦ
ＧＡＮＳＵＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
第４５卷双月刊
日粮添加亚油酸和二十二碳六烯酸对奶牛瘤胃原虫
奇数碳链脂肪酸和支链脂肪酸的影响
王蕾Ｌ２，王加启１’２，李发弟１，刘仕军２，哈斯２，梁松２
（１．甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃兰州７３００７０；２．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
动物营养学国家重点实验室，北京１００１９３）
摘要：试验选取４头安装有永久性瘤胃、十二指肠和回肠瘘管的荷斯坦泌乳奶牛，采用４×４拉丁方试验设计，研究日粮中添加亚油酸（ＬＡ）和二十二碳六烯酸（ＤＨＡ）对瘤胃原虫中奇数碳链脂肪酸和支链脂肪酸的影响．试验结果表明：奇数碳链脂肪酸和支链脂肪酸（ＯＢＣＦＡ）是原虫脂肪酸的重要组成部分，与对照组相比，日粮中单独添加ＬＡ或ＤＨＡ对瘤胃原虫中主要ＯＢＣＦＡ的含量无显著影响，而当ＬＡ和ＤＨＡ协同添加时Ｃ１５：０和Ｃ１７：０的含量显著降低（Ｐ＜ｏ。０５），但对异构酸和反异构酸的含量无显著影响．
关键词：奶牛；亚油酸；二十二碳六烯酸；奇数碳链脂肪酸；支链脂肪酸；原虫中图分类号：Ｓ
８２３．９＋１
文献标识码：Ａ文章编号：１００３—４３１５（２０１０）０１—００１２—０４
ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｅｔａｒｙＬＡａｎｄＤＨＡｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ
ａｎｄｂｒａｎｃｈ—ｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｃｉｄｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆ
ｏｎ
ｏｄｄ
ｒｕｍｅｎ
ｐｒｏｔｏｚｏａｉｎｄａｉｒｙＣＯＷＳ
Ｆａ－ｄｉｌ，ＬＩＵＳｈｉ－ｊｕｎｚ，ＫＨＡＳ－Ｅｒｄｅｎｅ２，ＬＩＡＮＧＳｏｎ９２
ＷＡＮＧｌｅｉｌ一。ＷＡＮＧＪｉａ－ｑｉｌ一，ＬＩ
（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；ＧａｎｓｕＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００７０，Ｃｈｉｎａ；
２．ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｆ
ＡｎｉｍａｌｖＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＳｃｉｅｎｃｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ
ＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆ
１００１９３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｍｐａｃｔｏｆ
ａ
ｂａｓａｌｄｉｅｔｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈＬＡａｎｄＤＨＡ
ｏｎ
ｆａｔｔｙａｃｉｄｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆＨｏｓｔｅｉｎ
ｒａｎ—
ｄａｉｒｙＣＯＷＳｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ．ＦｏｕｒＨｏｌｓｔｅｉｎｄａｉｒｙＣＯＷＳｗｉｔｈｐｅｒｍａｎｅｎｔｒｕｍｉｎａｌｆｉｓｔｕｌａｓｗｅｒｅ
ｄｏｍｌｙａｓｓｉｇｎｅｄ
ｔｏ
ｃｏｎｔｒｏｌ（ＣＫ。ｂａｓｉｃａｌｄｉｅｔｗｉｔｈｏｕｔａｄｄｉｔｉｏｎａｌｏｉｌｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ），ｂａｓａｌｄｉｅｔｗｉｔｈ２．７％
ＬＡ（ＬＡ），ｂａｓａｌｄｉｅｔｗｉｔｈ２．７％ＬＡｐｌｕｓ０．５％ＤＨＡ（ＬＡ＋ＤＨＡ），ａｎｄｂａｓａｌｄｉｅｔｗｉｔｈ０．５％ＤＨＡ（ＤＨＡ）ｉｎ
ｔａｎｔ
ａ
４Ｘ４ｌａｔｉｎｓｑｕａｒｅｄｅｓｉｇｎ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｏｄｄａｎｄｂｒａｎｃｈ－ｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｃｉｄｓｗｅｒｅｉｍｐｏｒ—
ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｒｕｍｅｎｐｒｏｔｏｚｏａ．ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＣＫ，Ｃ１５：０ａｎｄＣ１７：０ｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｉｎＬＡ＋ＤＨＡ
ａｎｄａｎｔｅｉｓｏ－ｆａｔｔｙａｃｉｄｓｗｅｒｅｎｏｔａｆｆｅｃｔｅｄｂｙｆａｔｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ．
ｇｒｏｕｐ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｍａｊｏｒｉｓｏ－ｆａｔｔｙａｃｉｄｓ
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｄａｉｒｙｃｏｗ；ｌｉｎｏｌｅｉｃａｃｉｄ；ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｉｃａｃｉｄ；ｏｄｄｆａｔｔｙａｃｉｄ；ｂｒａｎｃｈ－ｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｄｄ；ｐｒｏｔｏｚｏａ
奇数碳链脂肪酸和支链脂肪酸（ｏｄｄ
ｂｒａｎｃｈ－ｃｈａｉｎｆａｔｔｙ
ａｎｄ
刍动物乳脂和体脂中的脂肪酸，支链脂肪酸为直链
脂肪酸的异构体（ｂｒａｎｃｈｅｄ－ｃｈａｉｎ
ｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，１３１２一
ａｃｉｄｓ，ＯＢＣＦＡ）是普遍存在于反
作者简介：王蕾（１９８４一），女，硕士研究生，研究方向为反刍动物营养．Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｌｅｉ７５２４８９３＠１６３．ｔｏｍ
通信作者：王加启，博士生导师，研究员，研究方向为反刍动物营养与牛奶质量改良．Ｅ－ｍａｉｈｗａｒ＠ｉｉａ－ｑｉ＠２６３．ｎｅｔ
基金项目：“十一五”奶业国家科技支撑计划（２００６ＢＡＤ０４Ａ０３，２００６ＢＡＤｌ２８０８）和公益性行业科研专项（Ｎｙｈｚｘ０７．０３６）收稿日期：２００９－０５—１８；修回日期：２００９—０６—２６
第１期王蕾等：日粮添加亚油酸和二十二碳六烯酸对奶牛瘤胃原虫奇数碳链脂肪酸和支链脂肪酸的影响
１３
ＦＡ）．瘤胃微生物和乳脂中的ＯＢＣＦＡ主要可分为４类：具有偶数个碳原子的异构脂肪酸（ｉｓｏＣｌ４：０、ｉｓｏＣｌ６：０）、具有奇数个碳原子的异构脂肪酸
１
材料与方法
１．１试验动物与日粮设计
选取４头安装有永久性瘤胃、十二指肠和回肠瘘管的健康荷斯坦泌乳奶牛，产奶量（１７±１．５）ｋｇ、泌乳天数（１３０±３０）ｄ，采用４×４拉丁方试验设
（ｉｓｏＣｌ５：０、ｉｓｏＣｌ７：Ｏ），具有奇数个碳原子的反异构
脂肪酸（ａｎｔｅｉｓｏＣｌ５：Ｏ、ａｎｔｅｉｓｏｉｓｏＣｌ７：Ｏ）和奇数碳链脂肪酸（Ｃ１５：０，Ｃ１７：ｏ）Ｅ１｜．瘤胃微生物中的ＯＢＣＦＡ多为长链脂肪酸，且熔点较低，因此瘤胃细菌可利用ＯＢＣＦＡ在低温的环境下维持细胞膜的流动性［２］．最近的研究结果表明，乳脂中的ＯＢＣＦＡ可作为一种内源的微生物蛋白标记物［３］，支链脂肪酸可以通过抑制肿瘤细胞脂肪酸的合成来抑制多种癌细胞的生长Ｅ４３．由于上述功能，近年来关于ＯＢＣＦＡ的研究引起了广泛的兴趣，最近的研究主要集中在对于乳脂和瘤胃细菌中０ＢＣＦＡ的分析，对于瘤胃原虫ＯＢＣＦＡ的分析相关的报道却很少，本试验的目的是为了研究瘤胃原虫０ＢＣＦＡ的相对组成和日粮中添加ＤＨＡ和ＬＡ对瘤胃原虫ＯＢＣＦＡ的影响．
计．日粮处理为：基础日粮对照组（ＣＫ）、基础日粮＋
２．７％游离亚油酸组（ＬＡ）、基础日粮＋０．５％二十二碳六烯酸组（ＤＨＡ）、基础日粮＋２．７％游离亚油酸＋０．５％二十二碳六烯酸组（ＤＨＡ＋ＬＡ）．ＬＡ（９０％纯度）与ＤＨＡ（７５％纯度）分别购白安庆中创生物科技有限公司和无锡迅达化学品厂，ＬＡ和ＤＨＡ在每次使用后充氮气并放置于４℃保存．试验日粮根据中国农业行业推荐标准２００４版奶牛营养需要进行配制（ＮＹ／Ｔ３４．２００４），精粗比为４０：６０，其组成见表１．每期试验持续２１ｄ（前１４ｄ为预试
表１试验日粮组成及营养水平
Ｔａｂ．１
Ｄｉｅｔａｒｙｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓａｎｄｎｕｔｒｉｅｎｔ
ｌｅｖｅｌｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ
日粮组分玉米大豆粕棉籽粕菜籽粕
比例／％
ＣＫ１８．４０
ＬＡ１５．４０２．０６１２．１３２．００４．０９０．００２．７３ｏ．９２０．４６ｏ．４６０．４６１７．４０２５．７４１５．６９ｏ．４６ｉ００．００
‘
ＬＡ＋ＤＨＡ
１４．９４２．０５１２．１４２．ｏｏ４．０９０．５０２．７３０．９１０．４６０．４６０．４６１７．３４２５．７７１５．６９ｏ．４６１００．００
ＤＨＡ１６．５０２．４８１３．１０１．５０４．１０ｏ．５００．０００．９１０．４６０．４６０．４６１７．４３２５．８４１５．８０ｏ．４６１００．００
小麦麸０．８３
１３．６８３．１４２．０６
二十二碳六烯酸０．ｏｏ
亚油酸０，００
石灰石粉０．９２磷酸氢钙０．４６食盐ｏ．４６碳酸氧钠玉米青贮羊草干草苜蓿干草预混料１总计营养指标
ｏ．４６１７．４４２５．８４１５．８５０．４６１００．００
营养水平
ＬＡ＋ＤＨＡ
ＤＨＡ
ＣＫＬＡ
注：每公斤预混料中：ＶＡ＞ｌ
００００００
ＩＵ，ＶＩ）３＞６５
０００
ＩＵ，ＶＥ＞５
０００
ＩＵ，Ｆｅ＞２
０００
ｍｇ，Ｃｕ＞ｌ７５０ｍｇ，Ｚｎ＞５
５００
ｍｇ，Ｍｎ＞２５５０
ｒａｇ，
Ｓｅ＞７．５ｒａｇ，Ｉ＞７０ｍｇ和Ｃｏ：＞４０
ｒｎｇ．
１４
甘肃农业大学学报２０１０焦
期，后７ｄ为采样期）．试验奶牛每日分别在０７：００和１９：００采用利拉伐自动挤奶器挤奶，在挤奶时饲喂日粮．精料与试验添加物（油脂）的混合均采取现用现混方式，试验牛在槽时间为７ｈ，自由饮水．每天观察牛采食情况，并记录牛舍环境温度和湿度．１．２样品采集及分析
每期试验第１６ｄ、第１７ｄ、第１８ｄ每间隔６
ｈ
攀［９］等所述，脂肪酸测定采用Ａｇｉｌｅｎｔ６８９０气相色谱仪（ＳＰ２５６０色谱柱，柱长１００ｍ），气相色谱分析条件参照Ｖｌｅａｍｉｎｃｋ等‘５３所述．样品中各单一脂肪酸含量为该种脂肪酸占所测定总脂肪酸的百分比．１．３数据处理与分析
数据采用ＳＡＳ８．２统计软件包中ＭＩＸＥＤ模块进行统计分析．
采集１次瘤胃食糜（从瘤胃背囊、背盲囊、腹囊、腹盲囊４个位点采集瘤胃固液混合食糜），立即测定ｐＨ值（３７０ｍｏｄｅｌ
ｐＨ
２结果与分析
试验结果表明，ＯＢＣＦＡ为瘤胃原虫脂肪酸的重要组成部分，但占总脂肪酸的比例很小（３．１７％～６．０７％）．从表２可看出，瘤胃原虫中主要的（）Ｂ—ＣＦＡ可分为４类：奇数个碳原子的直链脂肪酸（Ｃ１５：ｏ和Ｃ１７＂ｏ）、偶数个碳原子的异构脂肪酸（ｉｓｏＣｌ４：０和ｉｓｏＣｌ６：０）、奇数个碳原子的异构脂肪酸（ｉｓｏＣｌ５：０和ｉｓｏＣｌ７：ｏ）和偶数个碳原子的反异构脂肪酸（ａｎｔｅｉｓｏＣｌ５：０和ａｎｔｅｉｓｏＣｌ７：Ｏ）．在本试验中，具有奇数个碳原子的直链脂肪酸（Ｃ１５：ｏ、Ｃ１７：ｏ）占总ＯＢＣＦＡ的比例最大，其次为异构脂肪酸，且Ｃ１５：０及其异构体所占的比例要高于其它脂肪酸及其异构体的比例．本研究结果表明，与对照组相比
ｍｅｔｅｒ，Ｊｅｎｗａｙ，ＵＫ），于一２０℃
保存，冷冻干燥后制样，备测ＦＡ和指示剂以及其他指标；另一份瘤胃食糜进行原虫的分离．分离方法为把３ｄ各时间采集的食糜等量混合取总量的２／３（约
８００＂－１０００
ｇ）经４层纱布过滤，收集滤液，然后在
混合固体食糜中再加入６００ｍＬ生理盐水，搅动５ｍｉｎ后，再经４层纱布过滤，收集２次滤液，经１５０Ｘｇ离心１０ｍｉｎ除去饲料残渣，上清液再经２５０×ｇ
４
℃下离心２０ｍｉｎ，收集沉淀．沉淀经１５０ｍＬ生理盐水洗涤后再经８００ｘｇ离心收集沉淀（原虫），经冷冻干燥，作为瘤胃或十二指肠混合原虫的样品，４℃保存备测原虫的ＦＡ组成．预处理方法参见卜登
表２
Ｔａｂ．２
ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＤＨＡａｎｄＬＡ
ｏｎ
ＤＨＡ和ＬＡ对瘤胃原虫ＯＢＣＦＡ含量的影响
ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ
ｏｆｏｄｄａｎｄｂｒａｎｃｈｅｄ－ｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｃｉｄｓｏｆｍｍｉｎａｌｐｒｏｔｏｚｏａ
ＬＡ＋ＤＨＡ处理组中Ｃ１５：０和Ｃ１７：０的含量显著降低（Ｐ＜Ｏ．０５），同时ｉｓｏＣｌ６：０的含量在ＬＡ和ＬＡ＋ＤＨＡ处理组也显著降低（Ｐ＜ｏ．０５），但试验处理对其它的异构酸（ｉｓｏ－ｆａｔｔｙａｃｉｄｓ）或反异构酸（ａｎｔｅｉ－
ｓｏ－ｆａｔｔｙ
３讨论与结论
大量的试验结果证实了ＯＢＣＦＡ是瘤胃细菌脂肪酸的重要组成部分，且不同种属的瘤胃细菌中奇数和支链脂肪酸的组成存在着差异，纤维分解菌中异构酸（ｉｓｏ－ｆａｔｔｙａｃｉｄｓ）的含量较高，而杆菌属中反异构十五酸（ａｎｔｅｉｓｏｃｌ５：ｏ）的含量较高，丁酸弧菌中ＯＢＣＦＡ的组成与其它的菌种间差异显著，这表明
ａｃｉｄｓ）无显著影响（Ｐ＞ｏ．０５）．在本试验中，
ＤＨＡ处理组中ＯＢＣＦＡ占总脂肪酸的比例较高，而ＬＡ处理组中ＯＢＣＦＡ占总脂肪的比例较低，当两者协同添加时ＯＢＣＦＡ的比例达到了最低，但差异不显著（Ｐ＞ｏ．０５）．
第１期王蕾等：日粮添加亚油酸和二十二碳六烯酸对奶牛瘤胃原虫奇数碳链脂肪酸和支链脂肪酸的影响
１５
通过测定瘤胃细菌中的０】ｍ的组成可反映出瘤
丁酸弧菌可能与其它的菌种存在较大的差异．因此
胃内细菌群落和数量的变化［６］．但国内外关于瘤胃原虫ｏＢＣＦＡ的报道却很少，而了解瘤胃内原虫ＯＢＣＦＡ的种类及其影响因素对于我们在ＯＢＣＦＡ
方面的研究也具有重要的作用．
本次的研究结果表明，ＬＡ和ＤＨＡ单独添加对瘤胃原虫ＯＢＣＦＡ含量无显著影响，而当ＬＡ和ＤＨＡ协同添加时Ｃ１５：０和Ｃ１７：０的含量显著降低，但对瘤胃原虫中主要的异构酸和反异构酸的含量无显著影响．瘤胃原虫中ＯＢＣＦＡ的种类与瘤胃细菌中的ＯＢＣＦＡ的种类是一致的，这也进一步证明了Ｋｅｅｎｅｙ假设，瘤胃原虫本身不能合成０ＢＣ—ＦＡ，其主要来自于原虫吞噬的细菌．Ｃｏｌｌｏｍｂ等２００４年的研究结果表明，日粮中添加鱼油会增加乳脂中奇数和支链脂肪酸的比例［７３，而添加富含Ｃ１８，２ｎ－６或Ｃ１８：３ｎ－３的脂类会降低乳脂中０ＢＣＦＡ的比例［８］，这与本次试验结果中对原虫ＯＢＣＦＡ的影响是一致的．
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Ｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆ
ｏｄｄａｎｄｂｒａｎｃｈｅｄｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｃｉｄｓ
ａｓ
ｍｉｃｒｏｂｉａｌ
ｍａｒｋ－
ｅｒｓ：ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｉｎ
ｒｕｌＴｌｅｎ
ｃｏｎｔｅｎｔｓ
ａｎｄｍｉｌｋＥＪ］．Ｄａｉｒｙ
Ｓｃｉ，２００５，８８：１０３１－１０４１
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ｇｒｏｗｔｈｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎ
ｃａｎｃｅｒ
ｃｅｌｌｓｂｙ
ａ
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ｍｉｃｒｏｂｉａｌ
ｍａｒｋ—
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ｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｉｎｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆ
ｍｉｃｒｏｂｉａｌ
ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓｉｎｓｏｉｌ：ａｒｅｖｉｅｗＦＪ］．ＢｉｏｌＦｅｒｔｉｌＳｏｉｌｓ，
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［７３
ＬｏｏｔＪＪ，ＤｏｒｅａｕＭ，ＣｂａｒｄｉｇｎｙＪ
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ｐｒｏｆｉｌｅｓｏｆ
ｔｒａｎｓ－ｆａｔｔｙａｃｉｄｓａｎｄｃｏｎｊｕｇａｔｅｄｌｉｎｏｌｅｉｃａｃｉｄ
ｉｓｏｍｅｒｓｉｎｄａｉｒｙｃｏＷＳｆｅｄ
ｍａｉｚｅｓｉｌａｇｅＥＪ］．Ａｎｉｍ
Ｆｅｅｄ
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（责任编辑胡文忠）
日粮添加亚油酸和二十二碳六烯酸对奶牛瘤胃原虫奇数碳链脂肪酸和支链脂肪酸的影响
作者：作者单位：
王蕾， 王加启， 李发弟， 刘仕军， 哈斯， 梁松， WANG lei， WANG Jia-qi， LI Fa-di ， LIU Shi-jun， KHAS-Erdene ， LIANG Song
王蕾,WANG lei(甘肃农业大学动物科学技术学院,甘肃,兰州,730070;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京,100193)， 王加启,WANG Jia-qi(甘肃农业大学动物科学技术学院,甘肃,兰州,730070)， 李发弟,刘仕军,哈斯,梁松,LI Fa-di,LIUShi-jun,KHAS-Erdene,LIANG Song(中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京,100193)
甘肃农业大学学报
JOURNAL OF GANSU AGRICULTURAL UNIVERSITY2010，45(1)0次
刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
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选择健康、泌乳月份与产奶量相近的多胎荷斯坦泌乳牛20头,随机分成5组,每组4头,研究日粮中添加商业来源的瘤胃保护共轭亚油酸钙盐(Ca-CLA)同时添加自然来源亚油酸(葵花油)对奶牛生产性能的影响.试验期为52 d.对照组基础日粮为60%粗饲料(苜蓿、羊草、青贮)和40%精料(以DM为基础),处理组在对照组日粮基础上分别添加Ca-CLA 100 g/d·头(CLA)、葵花油350 g/d·头(Sunf);Ca-CLA 100 g/d·头+葵花油350 g/d·头(CLA+Sunf),Ca-CLA 50g/d·头+葵花油175 g/d·头(1/2 CLA+1/2 Sunf).结果表明:在奶牛日粮中,单独添加自然来源亚油酸产奶量较对照组差异不显著(P＞0.05),而单独添加共轭亚油酸钙盐或与自然来源亚油酸高低不同剂量添加产奶量较对照组都分别显著提高2.20%、9.95%、11.16%,无论单独添加自然来源亚油酸或Ca-CLA或二者以高低不同剂量同时添加,牛奶的乳脂率较对照组都分别显著降低15.0%,6.24%,21.74%,14.35%.总之,奶牛日粮中同时添加Ca-CLA和自然来源亚油酸能显著提高产奶量,降低乳脂率,并且,减少Ca-CLA的添加量同时添加自然来源亚油酸可以达到高剂量添加Ca-CLA相同的效果.
2.会议论文 卜登攀. 王加启. T.R.Dhiman . 刘仕军 亚油酸和亚麻酸对奶牛乳脂CLA合成影响 2006
本研究通过调控日粮亚油酸和亚麻酸水平对乳脂CLA含量的影响,目的在于确定日粮亚油酸和亚麻酸对乳脂CLA合成调控的有效性。
选用40头泌乳中期(169.8±8 DIM)的中国荷斯坦奶牛随机分为4组,采用完全随机试验设计。试验共设4个处理,分别为高亚油酸组(LA)、高亚麻酸组(LEA)、高亚油酸和亚麻酸组合组(HLALEA)和低亚油酸和亚麻酸组(LLALEA)。LLALEA、HLA、HLEA和HLALEA组日粮蛋白水平接近(16.1％),产奶净能分别为1.48,1.64,1.64,and 1.64 Mcal NEL／kg DM。
通过9周的试验结果表明,不同处理对干物质采食量、泌乳净能校正产奶量、乳蛋白及乳脂肪的含量和日产量均没有影响显著影响。LLALEA、HLA、HLALEA和HLEA组日粮干物质的采食量分别为16.2、16.2、15.6和15.9 kg／d(P=0.10);能量矫正乳分别为23.1、24.6、24.2和24.3kg／d(P=O.09);乳脂肪含量分别为3.49、3.22、3.26和3.29％。增加日粮中LA或LEA的含量,能够显著降低乳脂C12:0、C14:0和C16:0的含量(p
(C18:0,p0.05)。随着日粮中亚油酸含量的增加,LLALEA、HLEA、HLALEA和HLA组乳脂VA和c9t11CLA的含量呈线性增加。HLEA组、HLAL队和HLA组乳脂VA的含量分别比LLALEA组增加1.56、3.05和4.71g／1OOg,而c9t11CLA分别比LLALEA组提高2.5、2.8和3.7倍。因此表明,日粮亚油酸对乳脂c9t11CLA合成的贡献效果高于亚麻酸,而亚油酸调控乳脂CLA合成机制主要以提供乳腺SCD合成c9t11CLA所需的底物(VA)为主。
3.期刊论文 吐日根白乙拉. 韩继福. 板桥久雄. 神田修平. 伊川玲次. 鹫尾雄一郎. Turigen BAIYILA. HAN Ji-fu. Hisao ITABASHI. Shuhei KANDA. Ryoji IKAWA. Yuichiro WASHIO 饲喂高亚油酸玉米对奶牛瘤胃发酵、产乳量和乳成分的影响 -中国奶牛2003(4)
选用6头经产荷斯坦种乳牛分为对照和HLAC两组,以二乘反转法,研究了高亚油酸玉米(HLAC)对奶牛瘤胃发酵、产乳量和乳成分的影响.HLAC组用
HLAC部分替换了对照组饲料中的普通玉米,两组日粮组成和营养成分基本相同.结果表明,HLAC的替换对瘤胃液氨氮浓度、挥发性脂肪酸浓度及其组成无显著影响(P＞0.1),但纤毛虫总数显著增加(P＞0.05).两组牛干物采食量和乳量无显著差异,但HLAC组乳脂率有下降趋势(P＞0.1)、乳脂肪中C18:2比例小幅提高、C18:1比例显著提高(P
4.期刊论文 吐日根白乙拉. 板桥久雄. 神田修平 饲喂高亚油酸玉米对奶牛瘤胃发酵、产乳量和乳成分的影响 -草食家畜2003(1)
选用6头经产荷斯坦种乳牛分为对照和HLAC两组,以二乘反转法,研究了高亚油酸玉米(HLAC)、对奶牛瘤胃发酵、产乳量和乳成分的影响.HLAC组用HLAC部分替换了对照组饲料中的普通玉米,两组日粮组成和营养成分基本相同.结果表明,HLAC的替换对瘤胃液氨氮浓度、挥发性脂肪酸浓度及其组成无显著影响(P＞0.1),但纤毛虫总数显著增加(P＜0.05).两组牛干物质采食量和产乳量无显著差异,但HLAC组乳脂率有下降趋势(P＜0.1)、乳脂肪中C18:2比例小幅提高、C18:1比例显著提高(P＜0.05)、乳蛋白质率及其产量小幅增加、乳糖率和无脂固形物率及其产量显著提高(P＜0.05).以上结果显示:奶牛饲料中HLAC的使用可改善乳成分,并对瘤胃发酵产生一定影响.
5.学位论文 卜登攀 日粮不饱和脂肪酸对乳脂共轭亚油酸（CLA）合成的影响及其机理 2006
本研究在优化乳脂CLA分析方法的基础上，主要探讨了泌乳期和胎次、日粮亚油酸和亚麻酸水平、基础日粮结构及其与日粮亚油酸水平组合、鱼油及其与植物油组合对乳脂CLA合成的影响及其机理。
试验结果表明：(1)采用高速离心或以高速离心结合有机溶剂(正己烷/异丙醇)分离乳脂肪后进行酸碱(HCL/NaOCH3)甲酯化，利用100m长硅胶毛细管柱(HP2560)结合程序升温，能够有效分离检测乳中常规脂肪酸及4种主要CLA(c9t11CLA、t10c12CLA、c9c11CLA和t9t11CLA)异构体，对于乳脂脂肪酸组成没有显著影响，同时提高了奶样前处理的效率。(2)在相同的饲料营养条件下，乳脂CLA含量和CLA-去饱和酶指数存在个体差异，奶牛个体间乳脂CLA含量相差2倍左右。乳脂CLA含量和CLA-去饱和酶指数不受胎次和泌乳日影响，同时与产奶量、乳脂肪产量之间的相关性低。(3)通过豆油和亚麻油调控日粮亚油酸(LA)和亚麻酸(LEA)水平，随着日粮亚油酸含量的增加，低亚油酸低亚麻酸组(LLALEA)、高亚麻酸组(HLEA)、高亚油酸和亚麻酸组合组(HLALEA)组和高亚油酸组(HLA)乳脂中t11C18：1(TVA)和c9t11CLA含量呈线性增加。与LLALEA组相比，HLEA、HLALEA和HLA组乳脂TVA的含量分别增加1.56g/100g、3.05g/100g和4.71g/100g，而c9t11CLA的含量分别提高2.5、2.8和3.7倍。(4)在不添加脂肪的情况下，随着精料水平的提高，3070CW、3070CCA、
5050CCA和6535CCA组日粮十二指肠处TVA的流量分别为7.44、10.33、11.37和12.66g/d(p=0.0926)，而对十二指肠处c9t11CLA的流量和乳脂c9t11CLA含量没有显著影响；当日粮添加不饱和脂肪后，高精料高亚油酸组(HCFAT)、低精料高亚油酸组(LCFAT)、高精料低亚油酸组(HCCK)和低精料低亚油酸组
(LCCK)乳脂c9t11CLA含量分别为4.04、4.10、0.58和0.76％(p＜0.01)，乳脂TVA的含量分别为5.80、5.53、1.08和1.09％(p＜0.01)。(5)日粮添加2％的鱼油(FO)后乳脂肪由3.63％降低为2.50％(p＜0.05)。日粮添加鱼油(FO)及鱼油和豆油组合(SBFO)后影响牛奶脂肪酸的组成，与对照组(CTL)相比，FO组DHA、TVA和c9t11CLA分别增加了33％、90％和83％(p＜0.01)，而SBFO组分别增加了63.6％、91％和87％(p＜0.01)。(6)奶山羊日粮添加4％的豆油后引起乳脂肪含量降低约15％，显著降低了脂肪酸的从头合成途径(P＜0.001)，乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和脂蛋白脂酶(LPL)酶基因mRNA的表达量分别减少了53％和83％；但增加了乳腺对长链脂肪酸的摄取(P＜0.001)和血浆(p＜0.01)、乳中(p＜0.001)TVA和c9t11CLA的含量，而且乳脂中TVA和c9t11CLA的含量存在强的线性回归关系(R2=0.8448)。(7)奶牛日粮添加2％～4％的油后有降低乳脂肪含量的趋势(P＞0.05)，在亚油酸采食量接近的情况下，通过日粮添加鱼油提高EPA和DHA的采食量后，显著提高了乳脂TVA和c9t11CLA的含量，但对奶牛乳腺组织SCD基因表达具有抑制作用。
研究结果表明：(1)日粮亚油酸、亚麻酸、EPA和DHA的采食量对乳脂CLA的合成以提供乳腺合成c9t11CLA所需的底物(TVA)为主，但亚油酸比亚麻酸能更有效的提高乳脂c9t11CLA的含量，而鱼油源性的长链不饱和脂肪酸主要通过调控其它脂肪酸的代谢而增加乳脂c9t11CLA的内源合成；(2)日粮提供总不饱和脂肪酸的含量是日粮精粗比例影响乳脂CLA合成的前提条件，当日粮总不饱和脂肪酸含量低于2％，尤其是当日粮亚油酸和亚麻酸含量低的情况下，日粮结构对乳脂CLA合成的调控程度有限；当日粮总不饱和脂肪酸含量超过2％时，日粮结构影响牛奶CLA的合成量。
6.期刊论文 卜登攀. 王加启. Dhiman T R. 刘仕军. BU Deng-pan. WANG Jia-qi. Dhiman T R. LIU Shi-jun 植物油来源亚油酸和亚麻酸对乳脂CLA合成的影响 -畜牧兽医学报2007,38(7)
选用40头泌乳中期(169.8±8)DIM的中国荷斯坦奶牛随机分为4组,采用完全随机试验设计,研究日粮亚油酸和亚麻酸水平对乳脂CLA合成的影响.试验共设4个处理,分别为高亚油酸组(LA)、高亚麻酸组(LEA)、高亚油酸和亚麻酸组合组(HLALEA)和低亚油酸和亚麻酸组(LLALEA).通过9周的试验结果表明,不同处理对干物质采食量、泌乳净能校正产奶量、乳蛋白及乳脂肪的含量和日产量均没有显著影响.增加日粮中LA或LEA的含量,能够显著降低乳脂
C12:0、C14:0和C16:0的含量(P＜0.05),显著增加乳中硬脂酸(C18:0,P%0.05)和18碳长链不饱和脂肪酸的含量(P＜0.01),但对20碳以上不饱和脂肪酸的影响小(P＞0.05).随着日粮中亚油酸含量的增加,LLALEA、HLEA、HLALEA和HLA组乳脂TVA和c9t11CLA的含量呈线性增加.HLEA组、HLALEA和HLA组乳脂TVA的含量分别比LLALEA组增加1.56、3.05和4.71 g/100 g,而c9t11CLA分别比LLALEA组提高2.5、2.8和3.7倍.因此表明,日粮亚油酸对乳脂c9t11CLA合成的贡献效果高于亚麻酸,而亚油酸调控乳脂CLA合成机制主要以提供乳腺SCD合成c9t11CLA所需的底物(TVA)为主.
7.期刊论文 黄艳玲. 侯俊财. HUANG Yan-ling. HOU Jun-cai 不同粗料对牛乳脂肪酸组成的影响 -中国乳品工业2009,37(7)
研究了奶牛饲喂不同粗料对乳脂肪酸组成的影响.以北方牧场常饲喂玉米青贮、牧革、玉米秸秆和稻草四种粗饲料的81头泌乳奶牛为试验对象,测定其乳脂肪酸组成.结果表明,玉米青贮组的总饱和脂肪酸质量分数显著高于其他各组;牧草组和玉米秸秆组的总单不饱和脂肪酸质量分数显著高于稻草组;牧草组的总多不饱和脂肪酸含量最高,牧草组和玉米青贮组的乳中亚油酸质量分数显著高于稻草组和玉米秸秆组,牧草组的亚麻酸质量分数显著高于其他各组(各组p均小于0.05).结论:粗料对乳脂肪酸组成影响,牧草可以提高乳中多不饱和脂肪酸质量分数.亚油酸和亚麻酸影响最为明显.
8.学位论文 陈璞 共轭亚油酸钙质量控制体系及其奶牛抗热应激研究 2008
1987年，Pariza等首次发现共轭亚油酸(CLA)具有抗癌功能。此后，世界各国的研究人员相继发现了CLA还具有降低脂肪沉积、抗动脉硬化、提高免疫功能、促进骨生成等功能。CLA广泛的生理活性，使得它在医药、食品、农业、化妆品等行业可以得到广泛开发。然而，CLA为液态原料，不易工业运输、添加与应用。因此，有必要改良CLA的形态或是开发CLA衍生物，以利于将共轭亚油酸开发成营养食品、保健食品、营养强化剂、食品添加剂、饲料添加剂、药物中间体或药品等。
现今，人工制备CLA主要有两大类方法：一种是通过化学方法合成CLA，另一种是通过微生物生物转化获得。在商业上主要是以富含亚油酸的植物油经化学改造而合成CLA。中药红花籽油是已知植物油中亚油酸含量最高的植物油。因此，本论文使用的共轭亚油酸钙盐是以红花籽油为原料，经过结构改
共轭亚油酸钙是通过共轭亚油酸皂化后与钙盐反应产生的，是一种新型的保健品、食品添加剂以及能量饲料添加剂。由于共轭亚油酸钙是由脂肪酸和钙离子结合形成的保护性油脂，因此可作为一种动物饲料添加剂。其特点是能量浓度高；不干扰瘤胃内微生物活动；补充能量的同时还可以补充钙离子；有效缓解高产奶牛能量负平衡等。共轭亚油酸钙盐是通过共轭亚油酸脂肪皂化反应产生的粉末状固型共轭亚油酸衍生物。相较于液态的共轭亚油酸，共轭亚油酸钙盐更易于工业运输、添加与应用，可开发为药品、保健食品、功能食品、食品添加剂等。新型功能性添加剂——共轭亚油酸钙盐在药品工业、食品工业以及饲料工业中将具有广阔的市场前景。 主要内容包括以下四个方面：
(1)共轭亚油酸钙制备工艺优化：以分子蒸馏纯化新工艺生产的CLA为基础，通过正交试验设计，优化共轭亚油酸钙加工工艺，发现超碱量为20％、超盐量10％、皂化温度60℃、皂化时间1h、用水量为油重的8倍时，共轭亚油酸钙盐得率最高。随后，在中试条件下，利用小试最优化条件生产出最终得率为75.40％的共轭亚油酸钙。本试验为产品的工业化提供了生产工艺，为大规模化生产提供了优化数据。
(2)质量控制与质量标准研究：为了有效地评价共轭亚油酸钙盐的质量，本论文利用了GC-MS测定共轭亚油酸钙盐中脂肪酸的含量；并评价了主要的质量控制项目：水分及挥发物、钙含量、脂肪酸含量测定(CLA％)等。本标准利用简易而可靠的检验方法，增强了其标准的可操作性，为制订其质量控制标准提供了参考。以性状、重量差异、含量测定、成分变化为主要考察指标，对共轭亚油酸钙盐进行了初步稳定性研究。结果表明，高温、高湿度或高光照度的环境对CLA稳定性都有一定影响，而高温的影响最大。经过6个月的真空包装的长期试验，发现共轭亚油酸钙盐的性状、含量并没有明显变化，说明共轭亚油酸钙盐需要特殊包装才能长期保存。
(3)共轭亚油酸及其钙盐对奶牛营养调控的影响：本试验的目的是研究日粮中添加不同共轭亚油酸及其衍生物对中国荷斯坦奶牛生产性能、乳脂中脂肪酸含量以及奶牛营养调控的影响。选用9头泌乳荷斯坦奶牛，采用3×3拉丁方设计，分为3组，对照组、CLA钙盐组和游离CLA组。试验进行12周，分为3个周期；每个周期第1周为适应期，后3周为试验期。日粮中添加游离CLA有降低奶产量和采食量的趋势，而添加CLA钙盐没有影响。日粮中添加CLA钙盐和游离CLA能够显著降低乳脂率和乳脂产量，但不影响其它乳成分。CLA钙盐和游离CLA组的乳脂率与乳脂产量随着时间的增加而减少，但乳脂中
c9t11CLA和t10c12CLA的含量随着饲喂时问的增加而增加，而后在第6或第7天都达到峰值，随后保持稳定。对乳脂脂肪酸产量的分析，发现饲喂CLA及其钙盐不仅降低乳脂中从头合成的脂肪酸产量，而且同样降低乳脂中源自于循环系统的脂肪酸。同时发现饲喂CLA钙盐和游离CLA都显著抑制△9去饱和酶活性。结果表明，不同形态CLA都能引起奶牛乳脂抑制，但由于粉末状CLA钙盐不影响采食量，方便添加，所以，建议在奶牛生产中添加CLA钙盐。
(4)共轭亚油酸钙盐对热应激奶牛的影响：试验的目的是研究日粮中梯度添加CLA钙盐对奶牛抗热应激的影响。选用36头泌乳荷斯坦奶牛，采用完全随机区组设计，分为4组，试验奶牛分别饲喂基础日粮(Control)、基础日粮+100gCLA钙盐(CLA-1)、基础日粮+200gCLA钙盐(CLA-2)或基础日粮+400gCLA钙盐(CLA-3)。试验进行6周，预试期2周，正式试验期4周。饲喂CLA钙盐不会影响奶牛的采食量、乳蛋白以及乳糖，但会极显著降低
(P＜0.01)乳脂率和乳脂产量。饲喂CLA钙盐会降低乳脂中各个脂肪酸的产量，而增加了t10c12LA的产量。与对照组比较，CLA-2组的奶牛呼吸率明显(P
因此，本研究初步筛选出较优的生产共轭亚油酸钙盐的加工工艺参数，降低生产成本，有利于大规模推广应用；对共轭亚油酸钙盐进行了质量研究、初步稳定性研究，初步建立了共轭亚油酸钙盐的质量标准，为国家与企业评价共轭亚油酸钙盐的质量提供了依据；并观察共轭亚油酸钙盐对奶牛的营养调控和抗热应激的影响，为奶牛抗热应激找到了新的途径，为大规模推广应用提供基础数据，更有利于奶牛养殖业的发展。
9.期刊论文 日粮添加Trans-18:1亚油酸钙盐或共轭亚油酸钙盐后泌乳期奶牛乳脂的变化 -中国畜牧兽医2005,32(2)
10.期刊论文 刘仕军. 卜登攀. 王加启. 梁松. 刘亮. 魏宏阳. 周凌云. LIU Shi-jun. BU Deng-pan. WANG Jia-qi. LIANG Song . LIU Liang. WEI Hong-yang. HOU Ling-yun 日粮添加LA和DHA对乳脂脂肪酸含量及比值的影响 -动物营养学报2008,20(5)
本试验选用带有永久性瘤胃、十二指肠和回肠瘘管的泌乳荷斯坦奶牛4头,采用4×4拉丁方试验设计,研究日粮添加亚油酸(LA)和二十二碳六烯酸(DHA)对乳常规组成、消化道各段食糜pH以及乳脂脂肪酸构成的影响.试验结果表明:添加LA和DHA不影响乳蛋白和乳糖含量(P>0.05),而添加DHA有显著降低乳脂含量的趋势(P>0.05);日粮共同添加LA与DHA能提高十二指肠前消化道的pH,但差异不显著(P>0.05),而单独添加DHA显著降低了回肠的
pH(P
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下载时间：2011年4月11日