器官移植的进展

器官移植的进展

1. 慢性排斥反应与晚期移植物功能丧失

慢性排斥反应的发病机理目前尚不明了，主要困难在于：(1)慢性排斥反应从病理表现上不易与长期药物治疗所造成的血管病变相区别；(2)针对慢性排斥的药物学研究几乎处于空白状态；(3)缺乏理想的研究慢性排斥反应的动物模型。 关于慢性排斥反应的新概念：(1)慢性排斥反应由多种病理因素所造成，因而并非单一免疫抑制治疗所能克服。(2)非免疫因素，如缺血、再灌注所造成的损伤、手术所造成的损伤等对移植物存活有着长远的影响，这些因素对免疫抑制治疗、免疫耐受的诱导亦有着不可忽视的阻碍作用。(3)早期频繁发生的急性排斥所造成的组织损伤亦可成为晚期移植物功能丧失的病理学基础。因此，慢性排斥反应更确切地说应为晚期移植物功能丧失。由此可见，减少晚期移植物功能丧失，可以采取预防为主的方针，如尽量减少缺血和再灌注损伤、减少手术损伤、有效控制急性排斥反应等。

2. 第3、4代免疫抑制剂的开发

免疫耐受的临床研究比预料的慢得多。主要困难在于小动物实验结果难以在大动物实现，例如在小鼠或大鼠比较容易通过控制抗原呈递过程或免疫活性细胞之间信息传递而诱导耐受，但这仅能在少数大动物实验中得以重复。就临床而言，至少目前还离不开传统的非特异性免疫抑制剂的联合应用。因此继续开发新一代特异性免疫抑制剂，从而造就类似于动物实验所展示的耐受结果便成了临床医师和医药界的共同愿望。免疫抑制剂划分为：

第1代：以皮质激素、硫唑嘌呤、抗淋巴细胞球蛋白(ALG)为代表，主要作用为溶解免疫活性细胞，阻断细胞的分化，其特点为非特异性、广泛的免疫抑制。 第2代：以环孢素A(CsA)和FK506为代表，主要阻断免疫活性细胞的白细胞介素2(IL-2)的效应环节，因其以淋巴细胞为主而具有相对特异性。

第3代：以单克隆抗体、雷帕霉素、霉酚酸脂为代表，其作用于抗原呈递和分子间的相互作用，与第2代制剂有协同作用。

第4代：以抗IL-2受体单克隆抗体、FTY20等为代表，主要针对改变cytokine环境，如抑制TH1，增强TH2。

3. xenosis--阻碍异种移植临床应用的新“抑制剂”

不少研究表明，动物所携带的微生物可以通过异种移植而感染人类，某些病毒甚至可以感染神经细胞。对此，动物学家早已有所警告。目前主要关注的问题是：(1)动物病毒经移植物传染给患者；(2)移植患者再将这些病毒在人群中传播。于是一个新的名词“xenosis”应运而生，它专指人类经异种移植而感染或传播的疾病，即“异种移植感染”或简称“异种感染”。

4. 微嵌合体现象与免疫耐受、移植物抗宿主(GVH)以及自身免疫性疾病之间的关系

微嵌合体现象最早由T.Starzl提出。他认为微嵌合体的存在可能与肝移植长期存活和个别病例的耐受有关。关于微嵌合体是否是免疫耐受的机理之一争议很大。

移植术后，严格地说是自开放血流时起，供体器官和受体之间的细胞双向互移便开始发生。骨髓移植可以看作是一种放大了的微嵌合体。在免疫抑制治疗之下受体可出现完全不同的结果：宿主抗移植物(HVG)、GVH和耐受。

新的研究表明，微嵌合体不仅与GVH有关，而且也是某些自身免疫疾病的根源。J.L.Nelson发现：(1)骨髓移植后形成的以干细胞为主的嵌合是引起GVH的根源；(2)GVH的临床表现与病理学特征均与某些自身免疫性疾病相似。于是，他推测微嵌合体也许与自身免疫性疾病有关。

5. 转基因在异种移植中的应用

由于供临床移植的器官严重缺乏，而且使用人体器官供移植也还存在各种伦理、法律问题，所以很久以来人们就试图使用动物的器官来替代丧失功能的人体器官。但一直无法克服跨物种间遇到的主要障碍即异种排斥反应，特别是超急性排斥反应，以及迟发性异种移植排斥反应，因此以往的一切尝试均未能成功。进入90年代以来，由于对异种移植超急性排斥反应的发生机理有了更深入的研究，此外，分子生物学、基因工程等相关学科也得到飞速地发展，有可能通过各种基因工程的手段对供体动物的某些基因进行修饰，使动物有可能作为人体异种移植的供体。现在已经获得的转人补体调节蛋白(CRP)基因的动物，实验证明能够抑制超急性排斥反应，并已达到临床可接受的要求。今后也可能通过基因工程的各种手段针对异种排斥反应的其他有关主要因素修饰供体猪。

要将人抗排斥反应的相关基因转入动物并得到表达，首先要构件目的基因表达载体，载体主要包括目的基因序列、转录调控序列以及标记基因等，然后将表达载体导入靶细胞，导入的方法包括物理(显微注射)、化学(磷酸钙共沉淀法和脂质转染法)和生物化学法(配体-DNA结合物和腺病毒-配体-DNA结合物)等多种手段。目前转基因动物用于异种移植的研究中，主要采用显微注射和病毒转染的方法。

一般采用显微注射和转染的手段将抗排斥反应的人源基因转到异种器官上。显微注射是将外源DNA溶液导入受精卵的雄原核内，然后再将受精卵植入假孕的动物体内，使其生长发育。出生的子代作DNA检测筛选出转入基因整合和表达的子代。目前用显微注射的方法已成功获得转入各种基因的小鼠和猪。