实验动物学思考题

一、医学实验动物学20160913

1. laboratory animal ，LA ：实验动物，经人工培育，来源清楚遗传背景明确，对其携带的微生物和寄生虫和健康状态进行监控，用于生命科学研究、药品与生物制品生产和检定以及其他科学研究的动物。

2. animals for research：实验用动物，一切可用于实验的动物，包括野生动物、经济动物、警卫动物、观赏动物和实验动物。

3. laboratory animalization：实验动物化，将野生动物或经济、观赏动物驯化、培育成实验动物的过程。

4. animal experiment：动物实验，为了可接受的目的而使用实验动物进行的实验，实验过程可能造成动物的疼痛、痛苦、苦恼、持久性损伤、受孕、生育等，包括实验的前、中、后过程。

5. Euthanasia ：安死术，以迅速造成动物意识丧失而至身体、心理最小伤害的处死动物的方法。

6. humane endpoint：人道终止点，考虑到对待动物的要求和实验要求，合理终止动物用于实验的时间。

7. 3R ：替代replacement 原则，要求尽可能采用低等实验动物或非实验动物，以替代高等实验动物进行实验；减少reduction 原则：要求尽可能减少实验动物的用量，甚至可以降低统计学要求；优化refinement 原则：要求优化实验设计和操作，避免或减轻与实验目的无关的疼痛和紧张。

8. 实验动物生物安全：对实验动物可能产生的潜在风险或现实危害的防范和控制。

9. 国家标准规定的实验动物品种是哪些？

大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬、猴、鸡

10. 实验动物福利（lab welfare）的五大自由

生理福利：免于饥渴；环境福利：免于不适，适当居所；卫生福利：免于痛苦伤病；行为福利：表达正常行为；心理福利：免于恐惧与焦虑。

11. 实验动物福利与动物实验伦理审查的关系

实验动物福利并不意味着就绝对的保护实验动物不受到任何伤害，而是在兼顾科学问题探索和在可能的基础上最大限度地满足实验动物维持生命、维持健康和提高舒适程度的需要；

实验动物福利贯穿实验动物整个生命过程，应考虑到实验动物的需要，尤其心理需要；

动物实验伦理审查局限于涉及实验动物的课题，在课题执行过程善待动物。

12. 动物实验伦理审查中涉及的三证；不予通过的情况；与医学伦理审查的区别(?)

动物质量合格证；设施许可证复印件及使用证明；从业人员考核合格证书。

1、 抵触、逃避，迫不得已；

2、 描述不清、证据不足、材料不全；

3、 无道理的动物实验，不必要的动物伤害；

4、 人员未经专业培训或明显违反动物伦理原则；

5、 实验动物生产、运输、实验环境不符合要求；

6、 无福利操作规程或不按规程办理，虐待动物；

7、 动物实验设计不合理；

8、 实施时不能体现善待动物、关注生命；

9、 活体解剖不麻醉等极端操作。

动物实验伦理审查：参照国际上通行的伦理基本原则，对医学科学研究项目中涉及动物的课题进行审查，并做出结论性意见。

13. 动物实验生物危害的三大重要因素

动物性气溶胶；人兽共患病；实验室相关疾病感染。

14. 实验动物废弃物类别；处理原则

分类：感染性废弃物，病理性废弃物，损伤性废弃物，药物性废弃物，化学性废弃物。原则：无害化、分类处理、专用包装。

15. 我国对实验动物实施许可证制度，包括管理环节

年检，质量抽检，现场检查等环节。

16. AAALAC的含义及认证目的

国际实验动物评估和认可委员会Association for Asscssment and Accreditation of Laboratory Animal Care 。

认证目的：内在原因：动物管理达到国际标准，设施管理达到国际标准，更快获得国际认可；

外在原因：国外市场的需求。

17. 实验动物标准化内容

实验动物质量标准化，动物实验条件标准化，动物实验的操作规范

二、实验动物遗传质量控制20160920

1. 实验动物质量控制内容

遗传控制，微生物和寄生虫控制，环境控制，营养控制

动物基因型、表现型、演出型与环境的关系。实验动物为遗传限定动物，包括哪两类？

分为相同基因类型（近交系）和不同基因类型（封闭群）两类

2. 实验动物品种品系应具备的4个基本条件，从品种品系的角度，近交系和封闭群归属。

（1）相似的外貌特征；（2）独特的生物学特性；（3）稳定的遗传性能；

（4）具有共同的遗传来源和一定的遗传结构。

近交系和突变系称为品系；封闭群称为品种

3. 近交系（inbred strain）定义、分类、特征（8）、近交衰退的原因。

近交系，也称纯系动物，是经至少连续20代全同胞兄妹交配或亲子交配培育成，遗传上高度纯合和稳定的品系动物（F20=98.6%）。

分普通近交系，重组近交系，同源近交系（同源突变近交系、同源导入近交系、分离近交系）

① 基因纯合性②遗传组成同源性③表现型的一致性④对外界因素的敏感性⑤遗传特征的可分辨性⑥遗传组成

独特性⑦分布的广泛性⑧背景资料和数据较为完善

衰退的原因：（1）随着纯和基因位点的增多，有害的隐性基因暴露增多，一般有害基因为隐性基因，其形状被正常的显性基因所掩盖，当隐性基因纯合时，常表现出一串缺陷。

（2）多基因平衡的破坏导致生命活动的异常，基因之间又相互作用，虽然相互的影响很小，但是由于长期的自然选择、优胜劣汰的结果使得有利生存的组合保存下来，近交使平衡关系破坏，引起异常。

4. 近交系数和血缘系数都表示近交程度，二者含义。

近交系数coefficient of invreeding：根据近亲交配的世代数，将基因的纯化程度用百分比来表示，理论上，随着同胞交配或亲子交配世代数的增加，近交系数上升到20代时，近交系数可达98.6%，杂合基因仅剩1.4%。

血缘系数coefficient of relationship：群体中个体之间的基因组成的相似程度用数值来表示，同卵孪生子之间的基因组成完全相同时，血缘系数为100%，子代从双亲中获得基因各一半，亲子之间的血缘系数为50%。随着近交代数增加，血缘系数相应升高，到第20代时血缘系数可以达到99.6%。

5. 亚系分化的3个原因；支系形成原因和命名方法。

亚系：（1）残留杂合：分支发生于F20-F40之间

（2）突变：长期处于分离状态，大于F100

（3）遗传污染：与非本品系动物杂交

命名：在原品系的名称后加一道斜线后表明亚系的符号

1. 数字，如DBA/1

2. 培育或产生亚系的单位或人的缩写英文名称，第一个字母大写，随后字母小写，如CBA/J，表示由美国杰

克逊研究所保持的CBA 的亚系。

3. 当一个保持者保持的一个近交系具有两个以上的亚系时，可在数字后再加保持者的缩写英文名称来表示

亚系，如C 57BL/6J和C 57BL/10J表示美国杰克逊研究所保持的C 57BL 的两个亚系。

4. 一些建立及命名较早，广为所知的近交系，亚系名称可用小写英文字母表示。

支系：饲养环境改变，或进行技术处理（代乳、胚胎移植、冷冻保存、人工哺乳）的动物。

命名：1. 经人为技术处置 形成的支系，应在原品系名称后附加一个小写英文字母表明处理方式：受精卵e ；卵巢

移植o ；代乳f ；人工喂养h ；人工喂养+代乳fh ，例如C3HfC 57BL/6，表示由C 57BL/6品系代乳的C3H 近交系

2. 由引种形成的支系，在原品系或亚系名称后加一斜线，然后表明引入单位的英文缩写名称，如NC/S

3．用代乳等人为技术处置的目的之一是去除或植入垂直感染的病毒，当去除或植入的病毒十分明确时，在品系名称后加一斜线，用大写英文字母表明病毒的名称，最后加上一个+或-的符号分别表示植入或去除，如C3H/HeN-MTV+

6. 祖系定义，C X B1含义，同源突变近交系定义，同源近交系的应用。

祖系：为重组近交系提供亲代的两个近交系。

C X B1：BALB/c和C 57BL 两个近交系杂交育成的一组重组近交系

同源突变近交系：两个近交系除了一格指明位点等位基因不同外，其他遗传基因全部相同的品系

应用：在同一遗传背景下比较某基因位点上不同等位基因的遗传效应；

在不同遗传背景种研究同一基因与遗传背景及其他基因的关系；

消除杂合遗传背景对某些突变基因表达的影响，以获得更为稳定的实验动物模型；

对复杂的多基因性状进行遗传分析。

7. 近交系动物的繁育包括的3个群

基础群：严格以全同胞兄妹方式交配

血缘扩大群：全同胞兄妹方式交配

生产群：从基础群和血缘扩大群引入动物随机交配，繁殖代数不超过4代

8. 基因频率；封闭群定义、特点和应用

基因频率gene frequency：在一个群体中某一种基因的数量与占据同一基因座的全部等位基因总数的比例，取值范围在0到1之间，通常写成小数的形式。

封闭群：以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个种群，在不从外部引入新的血缘条件下，至少连续繁殖4代以上称为封闭群。

特点：1封闭群动物避免了近亲交配，具有较强的繁殖力和生活力；

2封闭群动物（远交种）的遗传组成具有很高的杂合性，

应用：1由于封闭群动物的遗传组成具有很高的杂合性，所以在遗传学研究中可作为选择实验的基础群体，用于对一些性状遗传力的研究；

2封闭群动物的突变种携带的突变基因通常可导致动物某些方面的异常，成为生理学、胚胎学和医学研究的模型；

3由于其可携带大量的隐性有害基因，可用于估计群体对自发或诱发突变的遗传负荷能力。

9. 封闭群每代最小动物数及原因

每代动物数量不能少于25对

国际实验动物委员会规定封闭群每代近交系数增加量不得超过1%，避免近交系数随繁殖代数增加而上升过快，由△F=1/2N可得。

10. 杂交F1代定义、命名。C 57BL/6 X DBA/2(B6D2F1);C57BL X DBA(BDF1)

杂交F1代：由两个无关的近交系杂交生育的第一代动物，其遗传组成均等的来自两个近交系，遗传均一、基因型相同、表现型一致的动物。

命名：雌性亲代名称在前，雄性亲代名称在后，二者之间以大写英文字母X 相连表示杂交，将以上部分用括号括起，再在其后表明杂交的代数。

11. 近交系及封闭群遗传改变原因

近交系：1残余杂合性2遗传污染3遗传突变4品系在各地隔离繁殖引起变异

封闭群：核心群过小

12. 实验动物遗传学监测方法有哪几种

形态学特征：毛色基因检测法，下颌骨形态法

免疫学特征：皮肤移植法，混合淋巴细胞培养法

酶和蛋白质：生化标记法

分子生物学：限制性酶切片段多态性，DNA 指纹图，小卫星DNA 标记，微卫星DNA 标记

13. 小鼠毛色基因检测操作方法及结果判断

小鼠毛色等位基因A(2)B(4)C(7)D(9)中，C 为上位基因：cc-白化

A-B-C-D-:野生色；A-bbC-D-：桂皮色；aaB-C-D-：黑色；aabb-C-D-：棕色

使用复等位基因小鼠（DBA/2淡巧克力色aabbCCdd ）与待测小鼠交配，由F1毛色推测被检测小鼠基因型。 结果：F1仔鼠的毛色为同一颜色者，即可判断被测品系毛色基因纯合；

同窝F1仔鼠内若出现两种以上颜色者即说明被测小鼠已发生基因污染和变异

14. 皮肤移植成功的标志及不同时间段脱皮的含义

成功标志：每个品系抽取至少4只相同性别的成年动物进行同系异体皮肤移植，移植全部成功者为合格，发生非手术原因引起的移植物的排斥判为不合格。

1. 皮片在第一周内苍白、干瘪，脱落，则为技术失败，对照自体移植，技术失败率不得少于10%；

2. 皮片在第2-3周内发炎、水肿、坏死、结痂直至脱落，则为急性排斥，遗传污染通常引起急性排斥；

3. 皮片在第3-9周内逆毛逐渐脱落，直至无毛，或者因排斥留下凹陷疤痕，都为慢性排斥，遗传突变通常引起

慢性排斥；

4. 皮片在100d 的观察期内，始终有逆毛，则为永久接受的标志

补：常用近交系小鼠缩写

三、实验动物感染性疾病20160927

1. 传染病流行的三个基本环节，传播途径分类。

传染源、传播途径、易感动物

直接传播：水平传播；垂直传播（支原体，细小病毒）

间接传播：非生物传播（尘埃；饲料；垫料；用品；笼具）

生物传播（节肢；野生；人；购入实验动物）

2. 实验动物微生物感染的危害的表现（4）

对宿主有益；对动物和实验产生不良影响；实验动物全部毁灭；影响人类健康。

3. 染源、传播途径、在人和动物的症状

猴疱疹病毒病：猴组织器官、神经节；人接触传染；脑脊髓炎症状，死亡率高。

狂犬病：狂犬、携带病原的猫、猪、牛、马等家畜和野兽等温血动物；咬伤，消化道。呼吸道，损伤皮肤，粘膜。狂暴型（极度兴奋，全身衰竭）麻痹型（全身麻痹）

流行性出血热：携带汉坦病毒的野鼠；气溶胶吸入，污染的血、尿通过破损皮肤，昆虫叮咬，带毒排泄物经消化道；高热，出血，肾损伤。

淋巴细胞脉络丛脑膜炎：感染LCM 病毒的野小鼠或实验小鼠；分泌物、排泄物、吸血昆虫传播，可胎盘垂直传播；在实验动物多呈隐性感染，人感染后表现类流感样症状，严重者侵犯中枢神经引起脑膜炎。

4. 猴免疫缺陷病毒包括哪四种，猴感染后的主要症状

猴逆转录D 病毒（SRV ）、免疫缺陷病毒（SIV ）、T 细胞趋向性病毒1型（STLV-1）和泡沫病毒。

主要症状：猴亚临床携带，免疫抑制、肿瘤形成。

5. 鼠痘慢性感染的症状。兔病毒性出血症、犬瘟热是动物烈性传染病，可接种疫苗预防。

脚、尾和鼻部出现皮疹和溃疡，严重者可见脚、尾坏死脱落。

6. 仙台病毒和小鼠肝炎病毒感染的临床症状，对实验的影响

仙台病毒：肺炎；影响小鼠繁殖及免疫功能，肿瘤实验。

小鼠肝炎病毒：肝炎、脑炎、乳鼠肠炎和消耗综合征；免疫参数（IL-6升；IL-2、IL-10降），酶异常（谷草转氨酶，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶升；肝氧化酶琥珀酸脱氢酶降），影响裸鼠肿瘤免疫学研究。

7. 大鼠细小病毒感染的抗肿瘤作用

有高度抗癌特性，杀伤多种肿瘤，干扰肿瘤研究。

8. 实验动物常见人畜共患细菌性疾病（结核、志贺菌、沙门氏菌、布氏杆菌病）的病原、易感动物、传播途径、

在人和动物的症状

结核：结核分枝杆菌；猴；呼吸道；反复咳嗽，肺部啰音，低热消瘦，食欲减退。

志贺菌：志贺菌即痢疾杆菌；猴；经口传播；细菌性痢疾，急性表现为高热呕吐、排脓血便、剧烈腹痛，出现脱水和循环衰竭。

沙门氏菌：沙门氏菌；啮齿类、兔；消化道；腹泻，突然死亡。

布氏杆菌病：布氏杆菌；犬、牛、猪、羊；接触感染（口、皮肤、粘膜）；体重减轻、睾丸炎、不育。

9. 实验动物真菌感染的致病特点；感染实验动物的寄生虫；弓形虫病的宿主、危害

特点：病原真菌感染多为人畜共患病，一般慢性感染，散发。病变多位慢性增生性炎症。

原虫、蠕虫（吸虫，线虫）、节肢动物

中间宿主：大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、犬、猴、人；终末宿主：猫

危害：弓形虫感染可引起肠粘膜和肠系膜淋巴、心、眼、肾上腺、脾、脑、肺、肝、胎盘及肌肉组织的坏死和损伤。小鼠感染后会严重影响实验结果。弓形虫感染会改变白血病、乳腺癌、肝癌对化学致癌物的反应性。影响妊娠期胎儿发育。

10. 我国常用实验动物的微生物、寄生虫级别

大鼠/小鼠：3个级别，清洁级，SPF 级，无菌级

豚鼠/地鼠/兔：4个级别，普通级，清洁级，SPF 级，无菌级

犬/猴：2个级别，普通级，SPF 级

11. 普通级动物（conventional animal, CV）概念、使用注意

概念：不携带所规定的人兽共患病和动物烈性传染病的病原及寄生虫。

使用注意：到具有动物生产许可证的单位去购买动物；在具有动物使用许可证的环境下实验，犬、兔可接种一些指定的疫苗；购回动物后要严格检疫。

12. 清洁级动物（clean animal, CL）概念、特点

概念：根据我国国情而设立的等级动物，除普通级动物应排除的病原和寄生虫外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原和寄生虫。

来源于SPF 动物或剖腹产动物，饲养在屏障系统中；不应有异常的死亡；不应有明显的疾病症状；尸体解剖时，主要脏器、组织无论是眼观还是病理均不应有病变。

13. SPF 动物（specific pathogen free animal, SPF）概念和管理要点

概念：无特定病原体动物，除清洁动物应排除的病原和寄生虫外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验感染大的病原和寄生虫。

管理要点：空气净化，控制落菌；相邻房间有压力梯度；饮水、饲料、垫料除菌后使用；人员穿无菌服，严格按规范操作，定期检测动物和环境。

14. 无菌动物（germ free animal, GF）概念、理论依据、特点

概念：无可检出的一切生命体的实验动物。隔离环境饲养，用品灭菌，手套进行间接实验操作。

理论依据：胎盘屏障和屏障观念

特点：消化系统：肠道肌层薄，盲肠肥大，肝脏重量相对下降；

营养：体内不能合成维生素B 和K ；

代谢：代谢周期长，无菌动物血液中含氮量少，肠管对水的吸收率低；

寿命：长；

免疫系统：不发达。胸腺、淋巴结、脾脏小；产生丙种球蛋白的能力很弱，血中无抗体；

循环系统：心脏相对缩小，白细胞数少且值恒定。

15. 悉生动物（gnotobiotic animal, GN）概念，为什么无菌动物是各级别动物的先驱

概念：无菌动物体内人为植入一种或数种微生物，又称已知菌动物或已知菌丛动物。

饲喂细菌 悉生动物

无

菌 饲喂无抗原饲料 无抗原动物

动

物 作为种子 SPF 动物 作为种子清洁级动物

16. 实验动物微生物寄生虫监测的采样量和检测频率

采样量：群体大小500，不少于20只。

检测频率：普通级、清洁级、SPF 级动物每3个月检测1次，无菌动物每年检测一次。

四、实验动物环境与营养20161011

1．R=(A+B+C)*D+E的含义。复合环境状态。

实验动物的总反应=（动物种的共同反应+品种品系特有的反应+个体反应（个体差异））*环境影响+实验误差 环境对动物的影响并非单一因素的作用，而是受到多种因素的复合作用。在论述实验动物的环境时，有必要经常按复合环境状态加以考虑。

2. 影响实验结果环境因素包括的6个方面

人为因素；营养因素；理化因素；居住因素；生物因素；气候因素

3. 动物实验中适宜的温度和湿度范围，气流速度和换气次数要求。湿度过高或过低对动物的影响。动物实验室中压力梯度、工作照度、动物照度、噪音要求。

温度：20-26℃；湿度：40%-70%；气流速度：不大于0.2m/s；换气次数：不小于8次/h(普通环境)15次/h(屏障环境) ；压力梯度：相同区域最小静压差10Pa(屏障)50Pa(隔离环境) ；工作照度：不小于200lx ；动物照度：小动物15-20lx ，大动物100-200lx ，昼夜明暗交替时间12/12或10/14；噪音要求：小于60dB 。

湿度过高，微生物繁殖和传播，饲料垫料霉变；湿度过低导致呼吸道疾病。

4. 动物实验室中颗粒物的来源及危害，动物实验室中氨控制要求

来源：室外空气未经过滤处理直接带入；

动物体表被毛、皮屑、饲料和垫料等材料的碎屑被气流携带或动物活动扬起在空气中悬浮，形成颗粒物污染。 危害：过敏原—呼吸道疾病，皮炎

病原载体—螨、霉菌孢子，细菌，芽孢，病毒

氯浓度是衡量动物实验室空气质量的指标：小于14mg/m3

5. 实验动物的环境13项指标，普通实验室与屏障实验室环境指标差别（3）

温度，最大日温差，相对湿度，最小换气次数，气流速度，静压差，空气洁净度，沉降菌，氯浓度，噪声，动物照度，最低工作照度，昼夜明暗交替时间

差别：普通环境缺少日温差、压强梯度、空气洁净度三项参数

6. 实验动物设施按照空气净化程度分哪3类。隔离环境的细菌状态及人员、空气、物品状态。屏障环境压力梯度布局。动物进入屏障实验室的要求。IVC 结构、使用环境及匹配设备。

普通环境设施，屏障环境设施，隔离环境设施3类

隔离环境：采用无菌隔离装置以保持无菌状态或无外源污染物；工作人员只能通过附于隔离器上的橡胶手套，对隔离器内的实验动物进行饲养和实验操作，而不可能直接接触实验动物；进入隔离器的空气要经高效过滤并维持正压；进入隔离器的物品须包装消毒后，通过灭菌渡舱或传递窗移入。

屏障设施压力梯度布局：单走廊式正压屏障设施：实验动物生产区（动物实验区）压力最高

双走廊式（多走廊）正压：洁净走廊>动物实验区>污物走廊

要求：实验动物为清洁剂或以上：质量合格证原件、生产许可证复印件

合格的包装：运输盒必须以高效滤膜封闭窗口。胶带封口，封口破损或滤膜破损者不能进入屏障系统

IVC （独立通气动物笼架）结构：生命窗，搭扣，密封圈，进排气孔，网盖，鼠盒盖

使用环境：空气净化达到1万级，最好在屏障实验室使用

匹配设备：净化控制柜；导风通道式笼架；独立供气动物笼；超净工作台

7. 3类动物实验室饲养动物级别。动物实验室具有人流、物流、动物流。

隔离环境：SPF 级，悉生及无菌级

屏障环境：清洁级，SPF 级

普通环境：教学等用途的普通级动物

8. 实验动物饮用水的要求，3类特殊动物实验设施名称

普通环境：符合城市饮用水要求；

屏障环境：饮用水和屏障内用水均为无菌水；

隔离环境：无菌水

感染性动物实验室；放射性动物实验室；有害化学物质动物实验室

9. 实验动物环境监测指标分哪3类，日常性检测指标包括哪几项？静态检测哪些指标，何时进行？

日常性检测：温度、相对湿度、压差

监督性检测：日温差、噪声、气流速度、照度、氨气浓度

必要时检测：空气洁净度、换气次数、沉降率最大平均浓度、昼夜明暗交替时间

静态检测除氨浓度外的所有指标；何时：新建或重启设施，引进动物前

10. 必要检测指标有哪些，何时进行？

指标见上题。何时：设施设备调试，更换过滤器后

11. 空气过滤系统3级过滤材料的更换时效

根据使用频率及环境空气质量确定过滤器更换时间，勤换初中效，可延缓高效的使用

初效：2周-3个月；中效：3-18个月；高效：1-3年

12. 混合饲料的缺点

①原料的营养成分随收获季节和地理位置波动，批次间的营养成分含量有变化，不利于很好地阐明实验结果； ② 料原料如豆粕含植物激素，影响与雌激素有关的疾病（肥胖，动脉粥样硬化和癌症等）的发生；

③ 农药残留、重金属或其他潜在污染可能影响毒理学（低浓度的污染物很敏感）免疫学（饲料中抗原）研究。

13. 纯化饲料的概念及特点

将每一种营养物质以单独的纯化成分精确添加而成

特点：1纯化饲料配比精确，营养成分明确，与研究者苛刻的研究标准及过程完全匹配，便于研究成果的发表；

2纯化饲料每一批次之间同种饲料无差异，给研究者提供了一个纯净而一致的科研背景，重复性、一致性好； 3纯化饲料不含植物雌激素及其他外源物

4营养成分可根据实验要求进行精确修改

14. 实验动物配合饲料质量要求；饲料检测包括的3个方面

质量要求：饲料水分含量小于10%；

清洁级以上实验动物饲料包装，经高压或辐照灭菌；

饲料保质期3个月，雨季2个月。

饲料检测：感官性状的检验；营养成分的测定；化学污染、卫生指标的测定。

五、常用实验动物

1. 小鼠胃容量，灌胃给药最大剂量；小鼠不宜开展的实验。

胃容量小，约1-1.5ml ，最大剂量：1ml

研究体温变化的实验：因为小鼠体温变化不稳定；

慢性支气管炎的实验：因为小鼠气管及支气管腺不发达；

催吐实验：因为小鼠无呕吐反应；

动脉粥样硬化实验：因为小鼠不易形成动脉粥样硬化。

2. 大鼠、小鼠的性周期、妊娠期、哺乳期。

小鼠：性周期4-5天，妊娠期19-21天，哺乳期20-22天；

大鼠：性周期4-5天，妊娠期19-23天（平均21天），哺乳期25-28天。

3. C57BL/6，BALB/c，C3H ，DBA/2小鼠的生物学特点。

C57BL/6：乳腺癌发病率低，对放射物质耐受力强，对结核杆菌百日咳组织胺易感因子敏感。

BALB/c：乳腺肿瘤发生率低，但对致癌因子敏感，对放射性照射极为敏感。

DBA/2：听源性癫痫发作36日龄小鼠为100%，对鼠伤寒沙门氏菌补体有抗力，对百日咳组织胺易感因子敏感。 C3H ：乳腺癌发病率为97%，对致肝癌因素敏感，对狂犬病病毒敏感，对炭疽杆菌有抗力。

5. 小鼠选择原则：小鼠健康外观检查内容。

选择：1, 首先要考虑小鼠是否符合国家标准；

2, 按照实验目的和要求来选择；

3, 不同季节和昼夜不同时间，动物机体反应性有一定改变；

4, 不同种、同种而不同品系的小鼠对同一实验处理反应有很大差别；

5, 年龄应尽可能一致，体重应大致相近，一般不应相差10%；

6, 小鼠性别在实验研究中，如无特殊要求，一般宜雌雄各半，以避免由于性别差异而造成的误差，有

些药物的作用不受性别影响，则可不分雌雄，任意选用一种性别。

7, 生理状态和健康情况，小鼠处于怀孕哺乳等生理状态时，对外界刺激的反应常有变异，无特殊的实

验目标管理的，避免混入，以减少个体差异。

外观检查：①食欲旺盛；②眼睛有神，反应敏捷；③体毛光滑，肌肉丰富，活动有力；④身无伤痕，尾不弯曲，体表孔腔无分泌物，无畸形。

6. 大、小鼠的性周期分为哪4期，其中动情前期和动情期阴道涂片的特征。

动情前期，动情期，动情后期，动情间期。

动情前期：有核上皮细胞；动情期：角化上皮细胞。

7. 写出近交系和封闭群大鼠的名称各两个。举例说出大鼠在生物医学中的应用（4）

近交系：ACI 系，F344/N大鼠；

封闭群：Wistar ，SD 。

应用：1. 内分泌研究：大鼠垂体-肾上腺系统发达，应激反应灵敏，适宜作应激模型，如尿崩症、糖尿病、甲状腺机能衰退和甲状旁腺功能低下造成的新生儿强直性痉挛；

2. 营养、代谢性疾病研究：大鼠对营养物质缺乏敏感，可发生典型缺乏症，如各种维生素缺乏症，蛋白质、氨基酸和钙磷等代谢的研究，营养不良、动脉粥样硬化的研究；

3. 药物研究：（1）药物毒理学：药物亚急性毒性试验、慢性毒性实验、致畸试验和药物毒性作用机制的研

究，以及某些药物不良反应的研究；

（2）药物药效研究：神经系统药物的评价；心血管系统药物的评价；抗炎药物的筛选和评价。

4. 肿瘤学：可用二乙基亚硝胺、二甲基偶氮苯复制大鼠肝癌模型；

5. 感染性疾病研究：用幼年鼠进行流感病毒传代，进行厌氧菌等细菌实验；

6. 肝胆研究：大鼠肝再生能力强，切除60-70%肝叶仍有再生能力，肝胆外科实验常用大鼠；大鼠无胆囊， 可从胆管直接收集胆汁，可用于胆道疾患，消化功能及急性肝功衰竭模型。

7. 行为学研究：大鼠行为多样，情绪反应敏感，适应新环境快，可进行(1)迷宫训练：测试大鼠学习和记忆 能力；(2)奖励和惩罚效应：采用特殊的电击装置，测试大鼠记忆判断和回避惩罚的能力；(3)药物效应：测试大鼠饲以酒精、咖啡因、鸦片后的行为；(4)高级神经活动：神经官能症、狂郁精神病及精神发育阻滞。

8. 心血管疾病研究：适宜于直接描述血压，进行降压药及心血管疾病的研究；

9. 计划生育研究：致畸试验，去除卵巢或睾丸模型、避孕药物筛选及毒性试验、老年病学研究；

10. 中医中药研究。

8. 豚鼠不宜开展的实验（3）；举例说出豚鼠在生物医学中的应用（4）

不宜开展：急性实验：豚鼠易感染，皮肤厚，不宜注射，血管神经不易分离；

慢性支气管炎症实验：豚鼠气管、支气管腺体不发达；

呕吐实验：豚鼠呕吐反应不敏感。

应用：1. 传染病学研究：豚鼠对许多病原微生物都十分敏感，尤其是结核杆菌，感染后酷似人类病变，是结核杆菌分离、鉴别、疾病诊断以及病理研究的首选动物；

2. 免疫学研究：过敏性休克和变态反应的研究；是常用动物血清中补体含量最多的动物，制备补体；

3. 药理学研究：如研究化妆品和外用药物对局部皮肤的刺激作用；由于妊娠期长，胎儿发育完全，适用于药物或毒物对胎儿后期发育的影响实验；

4. 坏血病研究：体内不能合成VC ，一旦缺乏则引起一系列坏血病症状；

5. 内耳实验研究

6肺水肿研究：切断颈部两侧迷走神经可以引起肺水肿；

7. 其他：耐缺氧能力强，适于作缺氧耐受性和测量耗氧量实验；对辐射损伤引起的出血症敏感。

8. 地鼠生物学特征（3）举例说出黄金地鼠在生物医学中的应用（4）

特征：冬眠，颊囊，好斗

应用：1. 肿瘤移植、筛选和治疗等研究：地鼠的颊囊可移植肿瘤的组织细胞；黄金地鼠无原发性肺肿瘤，最适

合诱发支气管肺癌和肺肿瘤；

2. 生殖生理和计划生育研究：成熟早，动情周期准确，妊娠期短，繁殖快；

3. 血管生理学的微循环研究：地鼠的颊囊粘膜薄、色淡、透光性好、微血管致密清晰，适合观察淋巴细

胞、血小板、血管反应；

4. 营养学研究：对维生素缺乏敏感，可应用于维生素B2，A ，E 缺乏症的研究；

5. 传染病研究：自发感染病少，但实验诱发疾病很容易，如狂犬病、乙型脑炎病毒的研究及其疫苗的生

产与小儿麻疹病毒研究；

9. 兔胸腔纵膈、刺激排卵；兔不宜开展的实验（3）

纵膈将胸腔分左右两室，互不相通；

刺激排卵：交配后10-12小时排卵。

不宜开展：观察呕吐的实验：兔对呕吐反应不敏感；

放射病实验：兔对射线非常敏感，射线照射后，常发生休克或死亡；

甲状旁腺切除术。

10. 举例说出兔在生物医学中的应用（4）

1. 发热研究及热源试验：(1)给家兔注射细菌培养液和内毒素可引起感染性发热；(2)给家兔注射化学药品或异性蛋白等可引起非感染性发热；(3)药品生物检定中热源的检定常用兔；

2. 免疫学研究：家兔最大用处是产生抗体，制备高效价和特异性强的免疫血清，如病原体免疫血清、间接免疫血清、抗补体抗体血清、抗组织免疫血清、制备畜用兔化组织疫苗；

3. 心血管疾病和肺心病研究：家兔颈部神经血管和胸腔的特殊构造，很适合做急性心血管实验；适合复制心血管和肺心病的各种动物模型；采用兔耳灌流、离体兔心研究药物对心血管的作用；胆固醇代谢和动脉粥样硬化：兔的模型有高脂血症、主动脉粥样硬化斑块、冠状动脉粥样化病变，与人类病变基本相似；

4. 皮肤刺激试验：毒物、药物、化妆品等；

5. 眼科研究：手术操作和观察，也常用于眼科药物筛选和疗效研究；

6. 生殖生理和避孕药研究：可准确检测排卵时间并容易取得胚胎材料；

7. 急性动物实验：失血性、肠毒素休克、微血管缝合、阻塞性黄疸。

11. 为什么毕格犬是公认的标准实验用犬。

体型小，利于实验操作；易于驯服和抓捕，亲近人；遗传稳定，遗传性疾病少；反应性一致；性成熟早(8-12m)，产仔数多。

12. 最常用试验猴名称（2），举例说出猴在生物医学中的应用（3）

恒河猴，食蟹猴。

应用：1. 生理学研究：可用于脑功能、血液循环、血型、呼吸生理、内分泌、生殖生理、神经生理、行为学及老年学等研究；

2. 传染病研究和疫苗试验：制造和鉴定脊髓灰质炎疫苗时，猕猴是唯一的实验动物；

3. 生殖生理学研究：人类避孕药研究极为理想的实验动物；

4. 行为学和精神病及神经生物学研究：新镇静剂进入临床前要用猴进行实验；

5. 其他疾病研究：复制动脉粥样硬化模型、慢性气管炎模型。

13. 小型猪生物学特点（3），举例说出小型猪在生物医学中的应用（4）

猪(50kg)脏器重量接近于人(70kg);

上皮绒毛膜型胎盘，母源抗体不能通过；

皮肤结构、上皮修复再生性、皮下脂肪层相似，烧伤后内分泌与代谢改变相似。

应用：1. 皮肤烧伤的研究：猪的皮肤与人非常相似，是进行实验性烧伤研究的理想动物；

2. 肿瘤研究：美洲辛克莱小型猪是研究人类黑色素瘤的良好模型；

3. 免疫学研究：剖腹产仔猪，在几周内体内γ球蛋白和其他免疫球蛋白很少，无菌猪体内没有任何抗体，一旦接触抗原，会产生极好的免疫反应；

4. 心血管病研究：猪冠状动脉循环在解剖学、血液动力学上与人类相似，对高胆固醇食物的反应与人一样，很容易出现动脉粥样硬化的典型病灶；

5. 营养学研究：仔猪像婴儿一样，也患营养不良症，蛋白质、铁、铜、维生素A 的缺乏症，可广泛应用于儿科营养学研究；

6. 遗传疾病研究：如先天性红眼病，卟啉病，先天性小眼病，先天性淋巴水肿等遗传性疾病；

7. 牙科研究：是复制龋齿的良好动物模型；

8. 外科手术方面研究：在猪腹壁安装拉链且对猪正常生理机能无干扰，这为解决治疗和科研中需进行反复手术的问题提供了较好方法；

9. 毒理学研究：在国外用于新药安全性评估。

14. 树鼩特殊的分类地位和应用举例（4）

攀鼩目，灵长类动物以外和人最接近的动物。

应用：1. 神经系统研究的模型：抑郁、老年痴呆；

2. 肿瘤研究：自发性肿瘤如乳腺癌，淋巴肉瘤，肝细胞瘤，霍奇金病，恶性淋巴瘤，骨癌等；

3. 病毒研究：肝炎病毒，轮状病毒，疱疹病毒，登革热病毒，流感病毒；

4. 视觉系统模型：近视眼模型。

15. 常用实验动物中杂食性、肉食性、草食性的类别

草食性：豚鼠，地鼠，兔；

肉食性：犬；

杂食性：小鼠，大鼠，小型猪，猴；

16. 我国小型猪资源（4）

滇南小耳猪，广西巴马小型猪，贵州小型猪，五指山小型猪。

六、人类疾病动物模型

1. 人类疾病动物模型(Animal models of human diseases, AMHD)概念和意义(6)

概念：指生物医学研究中建立的具有模拟人类疾病表现的实验动物和相关材料（相关材料：以器官、组织、细胞为研究对象）。

意义：（1）避免人类实验造成的危害

（2）使用动物复制临床少见疾病

（3）可方便地研究潜伏期长、病程长、发病率低的疾病

（4）可以严格控制实验的条件，增强实验材料的可比性

（5）可简化操作和样品收集

（6）利于认识更全面疾病本质

2. 人类疾病动物模型分类（按发生原因(4)；按系统范围(2)）

按发生原因：自发、诱发、基因修饰、阴性动物模型

按系统范围：基本病理过程、各系统疾病动物模型

3. 疾病基本病理过程动物模型概念

奔豆芽工作组

概念：指各种疾病共同性的一些病理变化过程模型。如发热、缺氧、水肿、休克、弥散性血管内凝血、电解质紊乱、酸碱平衡失调等。

4. 自发和诱发动物模型优缺点

自发动物模型：优点：疾病发生、发展与人类的相似，应用价值高。

缺点：来源有限，种类有限；价格昂贵，饲料要求高。

诱发动物模型：优点：可短时间内大量复制，实验条件易控制，复制性好。

缺点：和自然产生的疾病模型在某些方面存在一定差异。

5. 转基因动物模型分类

转基因、基因敲出、基因敲入、基因敲低。

6. 阴性动物模型概念

概念：利用特定疾病不在某种动物发生的现象，探讨该动物的天然抗病机制及进行该疾病发病机制研究。

7. 动物模型设计的原则

（1）与人类疾病的可比性，相似性越高越好 （2）复制动物模型可重复性

（3）可靠性 （4）适用性和可控性 （5）易行性和经济性

8. 论文中对实验动物的描述内容包括哪些

标题中实验动物的种名描述要准确；

动物的品种（系）表述要正确、书写要完整

动物的来源、遗传背景等详细资料要标明

对动物的性别、年龄、体重表述要清楚、一致

说明动物的饲养方式甚至饲料配方

记录完整的饲养或实验环境指标

标明实验动物许可证号（生产许可证、动物试验许可证）

在文章中要说明麻醉剂的使用情况、施加的处理因素、动物的处死方式等

9. 诱发肺癌、胃癌、肝癌的动物模型举例（各一）；移植肿瘤模型常用接种部位

诱发肺癌：二乙基亚硝胺； 诱发胃癌：甲基硝基亚硝基胍；

诱发肝癌：黄曲霉素、二乙基亚酰胺、亚胺基偶氮甲苯

常用接种部位：实体瘤可接种腋窝皮下，肌肉接种用大腿肌；腹水瘤接种于腹腔。

10. 先天性免疫缺陷动物的分类和举例

T 淋巴细胞功能缺陷动物：裸大鼠和裸小鼠

B 淋巴细胞功能缺陷动物：性连锁性免疫缺陷小鼠(XID)

NK 细胞功能缺陷动物：Beige(bg)小鼠

T 、B 联合免疫缺陷动物：严重联合免疫缺陷小鼠SCID ；

T 、B 、NK 细胞免疫功能低下：虫蛙小鼠(Motheaten mice)

其他免疫缺陷动物：显性半肢畸形的无脾小鼠

11. 列举心肌梗死模型制作方法(2)

结扎冠状动脉法、介入法

12. 最常用高脂血症动物模型造模法

通过给动物喂食或灌胃高脂食饵来复制高脂动物模型的方法是目前最常用的方法，又称喂养法。