显微图像分析法与人工计数法在免疫组化结果判读中的应用_张鸣号
第31卷 2期 2009年4月宁夏医科大学学报
JournalofNingxiaMedicalUniversity
文章编号:1674-6309(2009)02-0261-02
#技术与方法#
显微图像分析法与人工计数法在免疫组化结果判读中的应用
张鸣号1, 彭 亮2, 曹 军1
(11宁夏医科大学基础学院病理生理学教研室,银川 750004;21宁夏医科大学基础学院生命科学实验中心,银川 750004)
摘要:为探讨显微图像分析法与人工计数法在免疫组化结果判读中的优劣,实验组为18例感染性休克大鼠肺组织NF-JB(P65)免疫组化切片,对照组为18例正常大鼠肺组织NF-JB(P65)免疫组化切片,各组均为显色较好且非特异性背景染色控制良好的标本,所有切片分别用MoticImagesAdvanced312显微图像分析系统和人工计数方法进行分析。结果使用显微图像分析系统判读,实验组肺组织NF-JB(P65)阳性细胞的平均灰度值、阳性细胞百分比与对照组比较差异均有统计学意义(P
免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)技术是用特异性抗体显示组织化学成分的重要方法,自开展以来日益受到人们的重视。随着免疫组织化学技术的不断成熟,已被广泛地应用到病理诊断及其它研究领域
[1]
片进行分析。
11311 图像采集分析方法 (1)数码显微镜捕捉免疫组化图片(jpg格式):启动MoticImagesAdvanced312系统,点击/采集窗0,通过数码显微镜捕捉到采集窗口所见的实时图像。如图-1所示,见封2。(2)分割与自动计算:选定整幅图像作为分割的范围,点击/分割0按钮选择手动分割,根据IHC阳性染色区域的不同,通过灰度直方图或RGB三种颜色直方图来调节分割的范围及阈值(如图-2所示,见封2)。点击/自动计算0按钮,对已分割好的图像自动计算每个阳性细胞的平均灰度值及阳性细胞占总细胞数的百分比。(3)导出分析结果:点击/设置0按钮,将分析结果以Excel表单或文本文档方式导出(如图-3所示,见封2)。11312 人工计数方法[3] 阳性细胞百分比记分按视野内阳性细胞所占总细胞数的比例记分,[25%、26%~50%、51%~75%、>75%分别记分为0、1、2、3、4分。着色强度记分:按阳性细胞着色(颜色)无、弱(淡黄)、中(棕黄)、强(棕褐)分别记分为0、1、2、3分。结果判定:本实验中每张切片随机取5个400倍视野,每个视野均进行阳性细胞百分比计分与着色强度记分,上述两种记分结果相加,0分为阴性(-);2~3分为弱阳性(+);4~5分为中等阳性(++);6~7分为强阳性(+++)。
114 统计学方法 图像采集分析方法所得结果用均数?标准差(