植物组织培养实习报告2

植物组织培养课程实习报告 —茅膏菜的组织培养

课程名称 植物组织培养

实习内容 茅膏菜的组织培养

指导教师 杨爽

系（院）别 食品科学学院 实习班级 xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 报告人 xxxxxxxx 报告日期 xxxx年xx月x日

目 录

1.前言………………………………………………………………3

2.实习项目…………………………………………………………3

3.实习目的…………………………………………………………3

4.实习时间安排……………………………………………………4

5.实习地点…………………………………………………………4

6.实习材料及工具…………………………………………………5

7.实习内容………………………………………………………5

8.实习总结…………………………………………………………8

一、前言

(1)植物组织培养是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。该技术能应用于植物离体快繁、无病毒苗木培育、培育新品种或创制新物种、次生代谢产物生产、植物种质资源的离体保存、人工种子等。而组织培养的实习能够将课本中所学的理论知识应用于实践，开拓我们的视野，扩大我们的知识面，对于提高我们的探究意识和创新、动手操作能力具有很重要的意义。

（2）植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础，是指每一个植物细胞带有该植物的全部遗传信息，在适当的条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同类型的细胞，形成不同类型的器官甚至胚状体，直至形成完整再生植株。

(3)茅膏菜具有较大的药用价值和研究价值但种子萌发率低，因此可利用种子繁殖获得无菌苗后在进行快繁。

二、实习项目

茅膏菜的组织培养

三、实习目的

（1）复习、巩固和植物组织培养的基本理论和基本知识，同时进一步丰富所学知识；

（2）了解茅膏菜的形态、习性、种类、用途的多样性以及它们与环境的关系，激发学习的积极性；

（3）理论联系实际，通过自主学习和研究性学习培养独立工作能力和创新意识；

（4）重点掌握茅膏菜组织培养的基本操作技术及方法；

四、实习时间安排：

（1）2012-11-18、2012-11-24、2012-11-25在图书馆查阅茅膏菜及组织培养的相关资料；

（2）2012-12-1至2012-12-2去奇正藏药厂药材种植基地参观，采集茅膏菜种子；

（3）2012-12-8至2012-12-13在植物组织培养实验室进行茅膏菜的快速繁殖实验；

（4）2012-12-14至2012-12-16撰写实习报告；

五、实习地点

（1）西藏农牧学院图书馆、电子阅览室

（2)奇正藏药厂药材种植基地（奇正藏药厂药材种植基地位于西藏林芝地区，全地区海拔500至7800多米，特殊的地形和气候，使这里各种物种资源十分丰富，而且没有受过污染。该种植基地目前已成功种植西藏高山红牡丹、茅膏菜、波棱瓜、翼首草、独一味、藏麻黄等多种药用植物）

(3)西藏农牧学院植物组织培养实验室（植物组织培养实验室具有进行该项技术的完整设备和条件 ，便于进行茅膏菜的组织培养）

六、实习材料及工具：自封袋 、采集箱 、三角纸袋 、高压灭菌锅、超净工作台、烧杯、镊子、剪刀、培养皿、三角瓶、酒精灯 、医用

脱脂棉、培养架、医用小推车、蛭石、河沙、园土、泥炭土、育苗盘、喷雾器、配制MS培养基所需母液、75%酒精、70%酒精、0.1%升汞、NAA、6-BA、甲醛、高锰酸钾、0.1%多菌灵、活性炭、茅膏菜种子

七、实习内容

（1）查阅资料

借助图书馆，电子阅览室查阅关于茅膏菜的生长习性，和其组织培养相关知识为实习提供技术支撑。

茅膏菜：【别名】石龙芽草、山胡椒、胡椒草、夏无踪、白花叶、黄金丝、滴水不干、山地皮、捕虫草、食虫草、柔鱼草、苍蝇草、捕蝇草、苍蝇网、珍珠草、露珠草、无风自动草。为茅膏菜科植物茅膏菜或光萼茅膏菜的全草。多年生草本，直立或有时呈攀援状，高9-32cm，有紫红色汁液。鳞茎状球茎紫色，直径约6mm。基生叶密集成近一轮或最上几片着生于节间伸长的茎上；退化基生叶线状钻形，长约2mm；不退化基生叶圆形或扁圆形，花时枯凋；茎生叶互生，盾状，半月形或半圆形，长2-3mm，边缘或叶上面有多数头状腺毛，分泌粘液，形成露珠状。茅膏菜属植物叶面密被分泌黏液的腺毛，当昆虫停落在叶面时，即被黏液粘住，而腺毛又极敏感，有物触及，便会向内和向下运动，将昆虫紧压于叶面。当昆虫逐渐被腺毛分泌的蛋白质分解酶所消化后，腺毛重新张开再次分泌黏液，故能常在叶片上见到昆虫的躯壳。这类植物本身有叶绿素，可以进行光合作用，但根系极不发达，因此靠捕食昆虫就能弥补其氮素养分的不足。

该植物全草含矶松素、茅膏醌、羟萘醌、氢化萘醌等多种醌类成分。腺毛分泌物含类似胰酶的蛋白酶。可用于治疗疮毒、瘰病。治胃痛，赤白痢，小儿疳积，跌打损伤。

生态环境：1.生于海拔1200-3650m的山坡潮湿地的松林下、草丛中或溪沟边。⒉生于山坡、溪边草丛、灌丛和疏林下。 分布：⒈分布于四川、贵州、云南和西藏。⒉分布于江苏、安徽、浙江、江西、福建、台湾、湖北、湖南、广东、海南、广西等地。

茅膏菜萌发培养基为：1/2MS培养基（pH=5.8)，增殖培养基为1/2MS+6-BA0.1+NAA0.1，生根培养基为1/2MS+活性炭0.5g/L+NAA0.2

(2)采集茅膏菜种子

采集地点：奇正藏药厂药材种植基地

采集时间：2012-12-1上午

（3）培养基的配制

按照MS培养基的扩大倍数配制所需培养基，待完全溶解后导入三角瓶中，用封口膜封好，放入高压灭菌锅中121℃，灭菌20min后取出培养基冷却至凝固。

（4）茅膏菜无菌苗的获得

先打开超净工作台上的紫外灯，用紫外线灭菌30min，然后将其关闭。

第一步：用滤纸将茅膏菜的种子包好，并用绳子进行捆扎。 第二步：先打开超净工作台上的紫外灯，用紫外线灭菌30min，

然后将其关闭。 第三步：用自来水清洗双手后，在超净工作台上点燃酒精灯后将双手及小臂用75%酒精擦拭。将捆扎好的种子用70%酒精消毒30s，然后用无菌水冲洗2-3次。

第四步：用0.1%的升汞将种子消毒12min，然后用无菌水冲洗5-6次。 第五步：用镊子将绳子解开，将种子放入垫有滤纸的培养皿中吸取种子表面的液体。然后将种子点接在1/2MS培养基（pH=5.8)表面。 第六步：将接种好的种子封好，放置在培养架上光照3000-4000LX，室温培养,30d。

（2）茅膏菜的增殖培养

将茅膏菜萌发出的无菌苗在超净工作台上剪去根，接种到增殖培养基1/2MS+6-BA0.1+NAA0.1，放置培养架上室温，光照3000-4000LX培养40d。

(5)茅膏菜的生根培养

增殖40d后，把茅膏菜适当高度的芽（3-4cm)在超净工作台上接种到1/2MS+活性炭0.5g/L+NAA0.2,进行生根培养，并观察记录生根率。结果：生根率为85%。

（6）生根苗的驯化

将培养瓶放在温室自然光照下培养，同时昼夜有明显温差，5-7d后再打开封口膜使瓶中温度降低，通气加强，2-3d后可移苗。

（7）生根苗的移栽

第一步：移栽基质的准备。将河沙：园土：泥炭土：（1:1：2)

和蛭石搅拌均匀。用甲醛和高锰酸钾进行熏蒸消毒并密封，3d后打开取出基质在阳光下暴晒，再装入育苗盘中。

第二步：幼苗出瓶后，先洗去粘附的培养基，用0.1%多菌灵溶液浸泡后移栽于基质中，种植密度为2-3cm×4-6cm。移栽完后一次性浇透水，并用0.1%多菌灵喷雾。当叶表面水珠消失后盖好保温薄膜，保持温度15-25℃，湿度在85%以上，同时注意通风，控制光照50%左右，每7-10d喷一次杀菌剂。

第三步：待小苗成活并长新，稍后可施稀薄的MS培养液作追肥，逐渐增强通风直至约2周后打开保湿薄膜即可，并统计移栽成活率。结果：移栽成活率为30%。

由此看出，茅膏菜移栽成活率较低，其原因分析有以下几点：（1）当前温度较低不利于茅膏菜的移栽（2）幼苗水分供需不平衡（3）试管苗老化（4）移栽过程中微生物感染（4）试管苗的健壮性差（5）过渡培养的环境条件不利于试管苗的生长

八、实习总结

（1）通过本次实习让我了解了更多关于茅膏菜的知识，基本掌握了进行茅膏菜组织培养的内容、步骤以及应该注意的问题，开拓了我的视野，在一定程度上提高了我的动手实践能力和操作技能。同时也让我对课本专业知识理解的更加深刻。

（2）实习中我也掌握了超净工作台、高压灭菌锅等仪器的使用及注意事项，同时也掌握了配制培养基的方法。

（3）通过去奇正藏药厂药材种植基地采集种子和管理员的介绍我学

到了关于独一味、翼首草、藏麻黄等藏药材知识，丰富了我的知识面，增进了我对藏药材的理解，提高了我对本专业的学习兴趣和探究意识。

（4）这次实习也增进了我们班级同学之间的了解，加强了我们同学和老师之间的友谊，增强了班级的团结力和凝聚力 。

（5）本次实习给了我们一次接近大自然的机会让我感受到自然之伟大，她留给我们如此多的宝贵财富，等待我们去发掘，去保护，去利用，我们再开发其研究价值的同时更应该懂得怎样以小代价换取大创造。