真菌(1-3)-D葡聚糖检测反应机理

真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测反应机理

目前临床上随着广谱抗生素、各类免疫抑制剂、移植插管等新技术的不断发展应用,其真菌感染尤其是深部真菌感染出现明显上升趋势,而作为临床诊断的细菌培养其阳性率很低,且检测周期长,不能适应临床治疗诊断的要求,因此迫切需要快速、准确的检测方法.因此对血液中的早期(1-3)-β-D葡聚糖快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。人体血浆中(1-3)-β-D葡聚糖快速检测对早期诊断深部真菌感染具有重要的参考价值。该试验的基本原理是试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量(1-3)-β-D葡聚糖能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应,通过测定凝集反应过程中的浊度变化从而定量检测血浆中(1-3)-β-D葡聚糖含量.

内毒素定量检测的反应机理

细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁外层中的脂多糖成份(LPS), 具有多种的生物活性, 微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 因此对血液中的早期内毒素快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。人体血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值。反应试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量革蓝氏阴性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应形成凝胶,通过测定在形成凝胶过程中的浊度变化从而定量检测血浆中革蓝氏阴性菌内毒素.

一、检测体液内毒素的临床意义

由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。在各类抗生素杀灭革兰氏阴性菌的同时，也会使后者释放出一定数量的内毒素，从而加重内毒素血症。早期诊断的细菌学培养需时长，而且由于抗生素的应用，其培养阳性率低。早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键，临床医师仅能根据临床特征与体征推断病源学而带有一定的盲目性，因此，早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。过去的内毒素检测能定性而不能定量，而且个体差异和实验室间的误差较大，无法成为有价值的临床检验项目，北京金山川公司研制的MB-80微生物快速动态检测系统能定量检测体液内毒素的含量，经国内多家单位使用现已在其他省市开始作为临床检验项目进行收费。该仪器检测内毒素具有结果稳定、检测快（1小时）、重复性好、准确率高、不同的检测人员操作引起的误差小等优点。

内毒素定量检测在重症病人、感染病人（如脑膜炎）以及其他有严重创伤等疾病的病人均有重要的临床意义，这使得内毒素研究一直是热点，但过去由于方法的限制，内毒素检测也是临床的难点。

二、深部真菌检测的临床意义

动态定量检测体液中真菌含量是应用MB-80微生物快速动态检测系统进行的。该方法可以快速诊断用常规方法难以确诊的深部真菌

感染，应用MB-80检测真菌，其检出率远远高于传统的血培养方法，使病原体的监测更加准确，更快速，MB-80系统具有很高的灵敏度和优异的数据分析功能，检测低限5pg/ml的真菌1-3--β-D葡聚糖量。

因近年来，一些罕见的条件致病真菌引起深部感染，临床重症病人，特别是广谱抗生素和化疗药物的应用，真菌感染已成为感染导致死亡的重要原因之一，而有研究发现早期发现并给予适当的治疗，真菌感染可以较好地得到控制，这就要求一种能迅速确定有无深部真菌感染的方法，因系统抗真菌药物种类较少，抗菌谱较广，不因真菌种类而异。当检测到标本中葡聚糖含量较高时，即刻予以系统治疗，不必等鉴定出种属，否则会贻误最佳治疗时机。而常规真菌血培养需时长，鉴定过程复杂，阳性率低，不能快速提供明确临床指示。MB-80应用试剂盒及仪器检测，能快速地检测出体液中真菌1-3-β-D葡聚糖的实际含量，对重症病人，有着非常重要的临床意义，对长期住院病人应用广谱抗生物，肿瘤化疗等等病人，必将带来一定的临床效益。

三、MB-80微生物快速检测系统技术指标及功能

1. 灵敏度：最小检出值1pg/ml；

2. 精密度：批间差CV

3. 准确性：回收率75-125%；

4. 标准曲线范围：1-9000pg/ml；

5. 相关系数r：绝对值≥0.980；

6. 检测时间：60分钟。

可定量检测人体体液（血液、尿液、脑积液、胸积液、腹水等）中细菌内毒素、深部真菌的

含量，为临床医生早期确诊内毒素血症及真菌感染症提供有价值的参考依据。

一、 MB-80微生物快速定量检测系统原理

采用光电转换原理，通过测定生物试剂与微生物细胞的特定成分反应产生的浊度变化，建立反应时间（T）与微生物含量（C）关系的标准曲线，从而定量测定样品中细菌内毒素、真菌葡聚糖的含量。

二、 MB-80微生物快速定量检测系统用途

1.人体体液（血液、尿液、血清、腹水、脑脊液等）细菌内毒素、真菌葡聚糖、革兰阳性菌肽聚糖定量检测；

2.人用及兽用注射药品、生物制品及医疗器械（一次性血袋、血小板的一次性管道、一次性注射器、消毒棉棒、注射生理盐水等）的细菌内毒素（热原）的定量检测；

3.血小板保存液、红细胞保存液及血液制品中的细菌内毒素、真菌葡聚糖、革兰阳性菌肽聚糖定量检测；

三、 MB-80微生物动态快速检测测定系统检测方法

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动态比浊时间分析法 动态显色时间分析法 凝胶法