各种肝病患者血清层粘连蛋白.透明质酸.IV型胶原检测
摘要
目的：探讨各种肝病患者血清层粘连蛋白（LN），透明质酸（HA）和IV型胶原（IV-C）水平及临床意义。方法：应用放射免疫法（RIA）测定115例各种肝病患者血清层粘连蛋白（LN）、透明质酸（HA）和IV型胶原（IV-C）水平及肝功能指标（ALT、A／G、Bil）。结果：各种肝病时LN、HA、IV-C三者皆有不同程度的增高，其值在肝硬化时达最高峰。同时将其三者检测结果与肝功能指标（ALT、A／G、Bil）做直线相关分析，在急性肝炎组、慢性肝炎轻度组无显著相关性；在慢性肝炎重度组、肝硬化组与Bil呈正相关（P＜0．05）；与A／G比值呈负相关（P＞0．05）。结论：各种肝病患者，当血清胆红素升高，A／G比值低下，应及早行血清LN、HA、IV-C的检测，当二者超过正常值时即应抗纤维化治疗。
关键词 肝病；肝纤维化；层粘连蛋白；透明质酸；IV型胶原
肝纤维化是肝硬化的病理基础。目前，临床常规的肝功能试验难以诊断肝纤维化，即使肝活检的常规染色技术亦难以正确判断何时进行抗肝纤维化的治疗。寻找一条非损伤性诊断途径为早期抗纤维化治疗提供依据是目前国内外研究颇为活跃的课题之一。本文对近几年文献报道可反映肝纤维化程度的几项敏感指标集中检测，探讨其在早期抗肝纤维化治疗中的临床意义。
1 对象与方法
1．1研究对象 各种肝病115例，均选自1995年12月～1997年6月在本院传染科住院和门诊的患者。诊断符合1995年全国传染病与寄生虫病会议修订的诊断分型标准，其中部分病例经病理学检查证实。男88例，女27例。诊断为急性肝炎25例，慢性肝炎轻度22例，中度25例，重度15例，肝硬化28例。
1．2 测定项目、方法 所有血标本均于晨空腹采集，离心后取血清-30℃保存待测。血清层粘连蛋白（LN）、透明质酸（HA）、IV型胶原（IV-C）用放射免疫法测定，试剂盒均由上海海军医学研究所生物技术中心提供。各项质控指标均符合标准要求。肝功能指标检测按常规方法测定，检测项目包括丙氨酸转氨酶（ALT）、总胆红素（Bil）、白蛋白（A）、球蛋白（G）。
1．3 统计方法 数据以±s表示，采用q检验及直线相关分析。
2 结果
2．1正常对照组与各组肝病血清LN、HA、IV-C测定结果 见表1。
表1 各组肝病血清LN、HA、CIV水平 （±s，ρ／μg．L-1）
组别 n LN HA IV-C
急性肝病组 25 85．74±23．26 63．69±30．31 57．25±24．27
慢
性
肝
炎
-轻度组 22 90．76±14．34＊ 100．28±50．35＊ 69．71±31．95＊
-中度组 25 119．98±40．47＊ 175．69±47．76＊ 117．16±34．53＊
-重度组 15 126．80±45．87＊ 200．39±55．66＊ 187．68±61．39＊
肝硬化组 28 132．69±45．49＊＊ 302．10±109．67＊＊ 269．36±85．23＊＊
与急性肝病组比较＊P＜0．05；＊＊P＜0．01
在急性肝炎组中，LN虽较对照组升高但无差异性（P＞0．05）；在慢性肝病中，中、重度组、肝硬化组LN、HA、IV-C均较急性肝病组显著性升高（P＜0．01、P＜0．01、P＜0．01）。随着肝病的进程各指标均逐渐上升，高峰值均在肝硬化组。
2．2 各种肝病患者肝功能指标结果 见表2。
表2 各个组肝病患者肝功能指标结果
组别 例数 ALT（m／L） A／G Bil
（c／μmol．L-1）
急性肝炎 25 142±87 2．0±0．4 39．8±12．7
慢
性
肝
炎 －轻度 22 93±72 2．0±1．1 13．2±3．8
－中度 25 131±95 1．8±0．7 29．7±9．2
－重度 15 138±36 1．6±0．9 36．8±11．2
肝 硬 化 28 125±102 1．0±0．6 15．5±8．2
将LN、HA、IV-C检测结果与肝功能指标（ALT、A／G、Bil）做直线相关分析，在急性肝炎组和慢性肝炎轻度组无显著相关（r＝2．231～2．516，P＞0．05）。在慢性肝炎中、重度组和肝硬化组与血清Bil呈显著正相关（r＝0．837～0．952，P＜0．05），在肝硬化组与A／G比值呈显著负相关（r＝－0．7826～－0．9213；P＞0．05）。
3 讨论
肝细胞外基质成份（ECM）的增加是慢性肝病向肝纤维化、肝硬化进展的中心问题［1］。利用各种肝病时血清LN、HA、IV-C（均为ECM）水平的动态变化来判断慢性肝病纤维化形成及转变的观察指标，对临床诊断肝纤维化有着重要的意义。
层粘连蛋白是细胞外间质中非胶原糖蛋白的主要成份，广泛分布于基底膜的透明层中，是细胞外骨架中的支持结构，并对细胞外ECM的其它成份有粘附作用［2］。在正常肝脏肝窦内无基底膜存在，LN含量较少，当肝内发生慢性炎症时，肝细胞、内皮细胞以及上皮细胞均参与合成LN，并在肝窦内大量沉积。
透明质酸是一种大分子氨基多糖，由间质细胞合成，在体内参与基质的构成，主要由肝窦内皮细胞摄取和分解［3］。当肝细胞受损时，肝内皮细胞亦同时受损，数量、功能减退，导致HA分解减少，此外肝间质细胞合成HA增加，门一腔分流，使HA逃逸肝脏的降解，故血清HA水平升高。
IV型胶原是一种胶原蛋白，是构成基底膜的主要成份，胶原蛋白在肝脏内约占蛋白总量的5％～10％。当肝脏发生纤维化时，基底膜遭受破坏，胶原蛋白可增加50％左右，在胶原增生过程中，IV型胶原大量沉积。
本文研究结果表明，随着肝病的慢性化，血清LN、HA、IV-C均渐增高，呈现慢性肝炎轻度＜慢性肝炎中度＜慢性肝炎重度＜肝硬化的规律。其中LN水平在各种肝病不同进程中均高于急性肝病组，但在慢性肝病重度、肝硬化这一阶段增高较为显著。HA升高较早，因此认为HA水平能反映慢性肝病纤维化程度，同时也能反映急性肝病时肝损害表现。IV-C在慢性肝病中，随着病变的进展水平逐步升高，对肝纤维化的早期诊断有一定的临床意义。将LN、HA、CIV检测结果与肝功能指标（ALT、A／G、Bil）做直线相关分析，在急性肝病组与慢性肝病轻度组无显著相关性，而在慢性肝病重度组、肝硬化组与血清Bil呈显著正相关，与A／G比值呈显著负相关。
综上所述，肝纤维化是一种慢性病变的过程，仅通过临床表现很难察觉，因此，对于各种肝病患者，当血清胆红素升高，A／G比值低下时，应及早行血清LN、HA、IV-C的检测，当三者超过正常上限值时，即应抗肝纤维化治疗。
作者单位：（黄静 张武英 龙列明 冯冰）广东医学院附属医院 感染内科
（葛湛）放射科
（赵玉兰）同位素科，湛江 524001