超声波细胞破碎
02-09
超声波细胞破碎
一、实验目的
1. 了解超声波细胞破碎基本原理。
2. 掌握超声波细胞破碎的基本技术。
二、实验原理
超声波细胞破碎仪工作原理基于超声波在液体中的空化作用,换能器将电能量通过变幅杆在工具头顶部液体中产生高强度剪切力,形成高频的交变水压强,使空腔膨胀、爆炸将细胞击碎。另一方面由于超声波在液体中传播时产生剧烈地扰动作用,使颗粒产生很大的加速度,从而互相碰撞或与器壁互相碰撞而击碎。三、器材与试剂
1、 细菌溶液
2、 烧杯
3、 75%酒精棉球
四、实验步骤
1. 使用前根据所破碎的对象选择合适的超声破碎头。
2. 插电源,打开超声破碎仪电源开关,电源指示灯(绿灯)亮。
3. 按下override 键,时间指示灯(黄灯)亮。
4. 超声时间可通过定时器定时,也可不定时,手动控制强度旋钮来控制。
5. 最上方旋钮为超声强度旋钮,控制超声波强度大小。
6. 放样品时,通过立杆旋钮来调节底盘位置与高度,破碎头应当伸进液面以下。
7. 确保门关闭后再进行超声操作。
8. 用完后,清洗超声破碎头:超纯水超3遍。清洁底盘、台面。
9. 依次关闭时间指示灯(黄灯),电源指示灯(绿灯)。
10. 拔下电源离开。
五、盐析注意事项:
1. 超声过程产热量大,样品应在冰浴中超声,一次不超过3秒,不建议超声次数过多,根据样品需要重复3-8次即可。
2. 一般情况下,细胞样品电流设置在10A ,组织样品电流设置在15A 。
3. 超声过程中,会产生泡沫,属正常现象,若没有泡沫产生或声音较大,则应调整破碎头,确保其再液面以下,不要贴近试管壁。