酵母胞内油脂提取方法
酵母胞内油脂提取方法:
取干菌体0.5 g左右,加入4 M的盐酸3 mL,在78 摄氏度水浴摇床中消化1 h(摇床转速为150 rpm),消化后冷却,然后加入3 mL甲醇和3 mL氯仿,漩涡振荡 10 min,充分混合后在8000 rpm (离心力6200×g )下离心5 min ,抽取氯仿层(溶液下层),然后再加入3 mL 氯仿提取一次(重复上面的步骤),将两次所得的氯仿层合并,在氯仿层中加入6 mL 的0.1%的氯化钠溶液,充分振荡后离心(8000 rpm,5min )。提取氯仿层,经过无水硫酸钠过滤后,用事先清洗干净并烘干至恒重(瓶子称重)的鸡心瓶收集氯仿相,并进行旋转蒸发,除去氯仿,最后所得的油脂在105摄氏度烘干(我们一般是过夜就可以),冷却称重。
油脂含量的计算: M2?M1?100% C%=M
M1:鸡心瓶的重量(g );
M2:鸡心瓶和油脂的重量(g );
M :提油中所用菌体的重量(g );
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