温度.PH.激活剂和抑制剂对酶活性的影响
（一）、温度、PH对酶活性的影响 一、实验目的
了解温度对酶活性的影响。了解酶活性的最适PH及掌握一种检测最适PH的方法。 二、实验原理 三、实验步骤
1、温度对酶活性的影响
取3支试管，编号后按下表加入试剂
试剂
0.2%淀粉溶液 稀释唾液/ml
煮沸过的稀释唾液/ml
试管编号 1 2 3 1.5 1.5 1.5 1 1 无
无 无 1
摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。10min后
取出，将2号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。
注意事项： 1、 唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5~1min
后，使其流入量筒，并稀释到50ml。
2、 PH对酶活性的影响
取4个标有号码的20ml试管。用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液以制备PH=5.0~8.0的4种缓冲液。
试剂
0.2mol/L磷酸氢二钠/ml 0.1mol/L柠檬酸/ml PH
1 5.15 4.85
5
试管编号 2 3 6.05 7.72 3.95 2.28 5.8 6.8
4
9.72 0.28 8
从4个试管中各取缓冲液3ml，分别注入到4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。将各试管内容物混匀，并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。
第四管加入唾液2min后，每隔1min由第二管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起，均为1min。
观察各试管内容物呈现的颜色，分析PH对唾液淀粉酶活性的影响。 注意事项：
1、 从第三管中取混合液，是因为它的PH接近唾液淀粉酶的最适PH。
2、 间隔1min，是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色，保证各
试管反应时间相同。
四、实验结果 1、温度
1
浅蓝
2
一半暗褐
一半浅蓝
深蓝
3
2、PH
1
深蓝
浅蓝
2 浅紫
3 深紫
4
分析：
酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。唾液淀粉酶的最适温度为37摄氏度。低温抑制酶的活性，高温使酶失活。淀粉遇碘显蓝色，按其分解程度由低到高会依次出现蓝色、紫色、暗褐色、无色。所以可用碘来检验其水解程度。
PH也能影响酶的活性，在最适PH下，酶的活性最大，偏酸、偏碱都降低酶的活性，唾液淀粉酶的最适PH为6.8。
（二）、激活剂和抑制剂对酶活性的影响 一、实验目的
了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 二、实验原理 三、实验步骤
取4支试管按下表加入试剂，观察现象并记录。
试管编号
1 2 3 4
0.1%淀粉溶液/ml 1.5 1.5 1.5 1.5 1%CuSO4溶液/ml 0.5 无 无 无 1%Nacl溶液/ml 无 0.5 无 无 1%Na2SO4溶液/ml 无 无 0.5 无 蒸馏水/ml 无 无 无 0.5 稀释唾液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5
37摄氏度恒温水浴5min
碘化钾-碘溶液/滴 2 2 2 2
试剂
四、实验结果
1
深蓝
浅蓝
2 中蓝
3 中蓝
4
分析：
酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。激活剂使酶的活性升高，抑制剂使酶活性降低。
加入Na2SO4是为了消除Na+和SO42-对酶活性的影响。