鹿瓜多肽的基础研究

　　【中图分类号】R927.1 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）02-0157-02 　　鹿瓜多肽是一种复方制剂，主要含有骨诱导多肽类生物因子、甜瓜籽提取物、多种游离氨基酸和有机钙磷等成分1），目前在骨科广泛应用。现将鹿瓜多肽的基础研究综述如下。 　　1 BMPs方面的研究 　　1965年，Urist首先发现BMP能诱导骨组织形成， 1988年Wozney等[3]复制了BMP-2和BMP-4的cDNA，发现BMP以二聚体形式存在，其化学结构表明BMP是转化生长因子β（TGF-β）超家族的成员。通过DNA重组技术已经克隆出17种不同的BMPcDNA。BMP-2在骨折愈合的中早期表达较强（骨折后3-14 d），且在骨祖细胞、间充质细胞、成骨细胞、成软骨细胞、单核巨噬细胞、多核巨细胞等多种细胞和骨基质、骨折端肌肉等多种组织中表达，但骨折中晚期（21-42 d）BMP-2表达逐渐减弱（4）。而BMPs对已经分化成熟的骨和软骨细胞基本上无促进增殖作用。其中，BMP-2被认为是活性最强、唯一能单独诱导骨形成的因子，BMP-2可加快新骨生成的速度以及新骨与骨皮质结合的速度，但并不能影响矿物质沉积和骨生成的速度。因此，只有在多种调节因子的共同参与下，BMPs才能更好地诱导新骨形成。陈学明等（6）实验表明，大鼠骨折模型建立后，分别给予鹿瓜多肽和生理盐水，鹿瓜多肽组BMP-2阳性染色阳性细胞出现早、数量多。BMP-2表达主要在软骨细胞和成骨细胞中，当软骨细胞成熟并转化为骨细胞时它们的表达趋于减少。 　　2 TGF-β方面的研究 　　近30年来的研究证明新骨形成是一系列生长因子调控，其中TGF-β超家族最引人注目，TGF-β超家族是一类结构相关的多肽类调控蛋白。这一家族成员主要包括TGF-β、BMPs、ACT参与细胞增殖、分化和转化的调节（7）。TGF-β与多种疾病的发生、发展和愈合有关，如与肿瘤的发生，与瘢痕发展和骨折的愈合有关。Joyce等（9） J评价了外源性TGF-β对新骨形成的调节作用，向新生小鼠大腿骨膜下局部注射TGF-β1或TGF-β2，然后观察局部骨和软骨的形成，在基因水平测量发现TGF-β2有促进TGF-β1生成的作用，并且TGF-β2在体内比TGF-β1有更强的刺激骨形成的作用，同时发现TGF-β有刺激骨膜中间叶前体细胞分裂增殖的作用，可以作为胚胎学骨发生和治疗早期骨折的实验参考。田卫东等发现TGF-β对体外培养的人胚成骨样细胞DNA合成有抑制作用，对胶原蛋白和碱性磷酸酶合成有促进作用。许多研究（11-13） 表明生长因子基因表达水平随着骨折愈合时期的不同而异：在骨折愈合初期，TGF-β1基因没有表达；在骨折愈合早期， TGF-β1的表达微乎其微；但是TGF-β1基因在软骨形成和软骨内骨化过程中表达水平很高，而在膜内成骨时则显著降低。因此，TGF-β的作用随着成骨过程中是否存在软骨作为中介而不同。李章华等（14） 研究证实鹿瓜多肽注射液能改变多种细胞因子的表达时间与表达量， 在注射入动物体内后， 能促进骨折端各种生长因子早期大量的表达（与对照组比较） ， 说明鹿瓜多肽注射液除了自身含有的多种生长因子外， 还具有聚集骨折端生长因子及诱导骨折端生长因子自分泌的作用 　　3 FGF方面的研究 　　FGF在人体内含量最多的是aFGF和bFGF，两者均能刺激内皮细胞复制和新血管形成。已证明其对骨折发育和愈合有重要作用。骨愈合是骨折或骨缺损的修复过程，其实质是骨损伤后的再生过程，也是骨组织的形成过程。研究表明，在骨折愈合过程中有许多生长因子参与了骨折修复过程，其中bFGF起重要作用。骨折愈合在临床上经历了：①血肿形成；②血肿机化；③骨痂形成；④骨痂改建。在细胞水平上骨折愈合则经历了骨折部的骨祖细胞聚集、调节作用和骨传导作用。 Nakajima等发现大鼠骨折愈合期间，血中FGFR的mRNA浓度明显升高， bFGF通过FGFR传递信号，成骨细胞增殖，分化活跃。Schmal等发现在体外用质粒转染的bFGF可刺激软骨细胞生长，增加葡糖胺聚糖的生成。bFGF对成纤维细胞有明显的促增殖及分化作用，而成纤维细胞能明显加速骨折愈合。在骨折修复早期， bFGF一方面使骨组织中的成骨细胞大量增殖分化，促进骨折愈合，另一方面促使成纤维细胞有丝分裂，直接参与纤维骨痂的形成。鹿瓜多肽通过机体旁分泌和自分泌方式促进骨折愈合从而促进早期骨折愈合。 　　综上所述，鹿瓜多肽中骨诱导多肽类生物因子可有效促进机体内影响骨形成和吸收的骨源性生长因子的合成，包括骨形态发生蛋白（BMPs）、β-转化生长因子（TGF-β）、成纤维细胞生长因子（FGF）等。 　　参考文献： 　　[1] 马永刚，陶海莉，等.松梅乐注射剂促进骨折愈合的实验研究[J].中华实验外科杂志.2003，20（9）：831-832. 　　[2] Wozney JM， Rosen V， Celeste AJ， et a.l Novel regulators ofbone formation： molecular clones and activities [J].Science，1988，242∶1528-1534 　　[3] 曾中华，余黎，等.骨折愈合过程中BMP-2和VEGF的表达[J].武汉大学学报（医学版），2005， 26 （4）：467-469. 　　[4] 陈学明，李章华等，鹿瓜多肤注射液促进骨折愈合的实验研究[J].新疆医学，2006，36（4）：90-94 　　[5] Herpin A，Lelong C，Favrel P.Transforming growth factor-beta-related proteins： an ancestral and widespread superfamily of cytokines in metazoans[J].Dev Comp Immunol.2004，28（5）：461-485. 　　[6] oyceME，RobertsAB，SpornMB，et al.Transforminggrowth factor-beta and the initiation of chondrogenes is and osteogenesis in the rat fe-mur[J].J Cell Biol，1990，110（6）：2195-2207. 　　[7] Bolander ME.Regulation of fracture repair by growth factors [J].Proc Soc Exp Biol Med，1992，200（2）：165-170. 　　[8] rlebacher A， Filvaroff EH， Ye JQ，et al. Osteoblastic responses to TGF-beta during bone remodeling [J]. Mol Biol Cell，1998，9（7）：1903-1918. 　　[9] 苏佳灿，张春才.骨折愈合中基因直接转入的作用机制[J].现代康复，2001，5（1）：62-63. 　　[10] 李章华，王志林.鹿瓜多肽注射液对骨折愈合过程中生长因子表达的影响[J].中国骨与关节损伤杂志，2007，22（11）：919-921.