冰片对BMSCs透过血脑屏障的影响
冰片对BMSCs透过血脑屏障的影响
摘 要:目的:探讨冰片对骨髓基质干细胞(BMSCs )透过血脑屏障(BBB )的影响。方法:复制脑缺血再灌注大鼠模型,将大鼠随机分为BMSCs+冰片组、BMSCs 组、冰片组、模型组和正常组5个组;MCAO 术后24小时, 灌服冰片30min 后,以3×106 BMSCs 经右颈总动脉注射入大鼠体内;分别于脑缺血再灌注后第1、14、28天检查各组大鼠的神经功能,并于实验结束时采血检测血象、肝肾功能。结果:BMSCs+冰片组和BMSCs 组神经功能显著改善,而前者又优于后者;各组大鼠血象、肝肾功能都正常,主要器官组织未见肿块形成。结论:冰片能够促进BMSCs 透过BBB ,改善神经功能;血管内移植BMSCs 未见明显的副作用。
关键词:冰片; 骨髓基质干细胞; 血脑屏障
不少研究表明,开窍药冰片具有促进其它药物透过血脑屏障(BBB )的作用,但对于开窍药能否促进相关细胞透过BBB ,目前尚未见报导。近年不少学者就骨髓基质干细胞(BMSCs )治疗神经系统疾病的相关问题进行了探讨,为研究开窍药对BMSCs 透过BBB 的影响,我们进行了初步的探讨,现报道如下。
1 材料和方法
1.1 主要仪器和试剂
CO 2恒温细胞培养箱(美国力高),倒置相差显微镜(日本奥林巴斯),离心机(上海安亭);754紫外线可见分光光度计(上海第三分析仪器厂);SDQ-30C 双极射频电凝器(上海手术器械厂)。
SD 大鼠骨髓基质干细胞专用培养基,CYAGEN 公司生产,批号:[1**********]01;PBS ,南京凯基生物科技发展有限公司,批号:KGB-500-1;胰蛋白酶,Invitrogen Corporation公司生产, 批号1356182;青霉素钠, 华北制药股份有限公司生产,批号:U0511641;硫酸链霉素, 华北制药股份有限公司生产, 批号:050506。谷丙转氨酶(ALT )测定试剂盒,批号200509113;谷草转氨酶(AST )测定试剂盒,批号:20050913;γ-L-谷氨酰转肽酶(γ-GT )测定试剂盒,批号:20050914。肌酐测定试剂盒,批号:20051124;尿素氮定试剂盒,批号:20051126;以上试剂由南京建成生物工程研究所提供。
1.2 实验动物及分组
SD 大鼠,雄性,SPF 级,280-320g ,40只,随机分为以下五组:(1)BMSCs+冰片组:急性脑缺血再灌注模型,以BMSCs 移植和冰片治疗;(2)BMSCs 组:急性脑缺血再灌注模型,以BMSCs 移植治疗;(3)冰片组:急性脑缺血再灌注