[状元笔记]生物--高三党必看的颜色反应
【状元笔记】生物:高三党必看的颜色反应
1、斐林试剂检测可溶性还原糖
原理:还原糖+斐林试剂—水浴加热→砖红色沉淀(Cu2O )
注意:斐林试剂的甲液(质量分数为0.1g/ml的NaOH 溶液)和乙液(质量分数为0.05g/ml的CuSO4溶液)要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配;条件需要水浴加热;本身带有红色的物质不适合作为反映材料,如西瓜。
应用:检验和检测某糖是否为还原糖;根据一定量的斐林试剂完全反应所需还原糖量,来测定不同生物组织中的含糖量;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎。
2、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪
原理:苏丹Ⅲ染液+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ染液+脂肪→红色
注意:实验中滴加体积分数为50%的酒精溶液的作用是洗去浮色;脂肪的鉴定需要用显微镜观察。
应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪。
3、双缩脲试剂检测蛋白质
原理:蛋白质+双缩脲试剂→紫色
注意:双缩脲试剂在使用时,先加A 液(质量分数为0.1g/ml的NaOH 溶液),摇匀后再加B 液(质量分数为0.01g/ml的CuSO4溶液)摇匀,反应条件为常温(不需要加热) 。
应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定。
4、碘液检测淀粉
原理:淀粉+碘液→蓝色 碘分子能进入淀粉分子的螺旋内部,形成淀粉-碘的复合物,显蓝色。
注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘。
应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉。
5、吡罗红甲基绿染色剂对DNA 和RNA 染色
染色原理:甲基绿和吡罗红对DNA 和RNA 的亲和力不同,DNA+甲基绿→绿色;RNA+吡罗红→红色。
应用:可以显示DNA 、RNA 在细胞中的分布。
注意:染液是甲基绿和吡罗红混合染色剂,且需要现用现配;水解时使用的质量分数为8%的盐酸的作用是:改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA 和蛋白质分离,有利于DNA 与染色剂结合。
6、二苯胺使DNA 呈现蓝色
鉴定原理:DNA+二苯胺→蓝色
应用:用于DNA 粗提取实验的鉴定试剂。
注意:DNA 与二苯胺混合均匀后,沸水浴加热5min ,冷却后观察颜色反应;二苯胺试剂要现用现配。
7、台盼蓝使死细胞染成蓝色
原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能阻止台盼蓝进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。
应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。
8、线粒体的染色
原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。
应用:用高倍镜观察细胞中线粒体的存在。
9、酒精的检测
原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下(重铬酸钾的浓硫酸溶液)与酒精发生化学反应,变成灰绿色。
应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶。
10、CO2的检测
原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
应用:根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况。
11、染色体(或染色质) 的染色(解离→漂洗→染色→制片) 原理:染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液) 染成深色。
应用:用高倍镜观察细胞的有丝分裂。
注意:解离是用盐酸:酒精=1:1的混合液,使组织细胞相互分离开来;漂洗是用清水,目的是洗去解离液,防止解离过度。
12、亚硝酸盐的检测:出现玫瑰红
原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
应用:将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
13、脲酶的检测
原理:细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH 升高,从而使酚红指示剂变红。
应用:在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素。
14、伊红美蓝检测大肠杆菌
原理:在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物(有机酸) 与伊红美蓝结合使菌落呈现黑色。
应用:用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量。
15、刚果红检测纤维素分解菌
原理:刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维
素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
应用:筛选纤维素分解菌。