植物组织破碎提取法及闪式提取器的创制与实践
・专论・
植物组织破碎提取法及闪式提取器的创制与实践
刘延泽‘
河南中医学院,郑州450008
【摘要】本文在对中药提取的原理与实现过程进行深割剖析的基础上,首次对组织破碎提取法的基本原理、宾现过程、阎式提取器的构造覆八太优势和应用实战进行了系统论述。用十余年的妻践过程证明,闪式提罩器集粉碎、浸泡、搅拌、振动等技术优势于一体,使完成一次提取只需敷秒至敷十秒同,俚为常规回流提取的数十王教百分之一,不但避免了不耐热成分的破坏,且收率高,操作简便.有利环保等。
【关键词】提取方法;组织破碎提取法;闪式提取嚣
【中图分类号】R284I文献标识码】A【文章编号】1672—365l(2附7)06—0401.07
作为中草药化学成分研究的基本步骤和中药现代化过程中的关键环节,提取这一过程的成功与否及其对后期环节和昂终疗效的影响越来越引起人们的重视。其主要评价标准除了提取物收宰高低.有数成分含量多少及表现出的疗效强弱外,快速,节能、安全、方便和环保即成为最为重要的因素。其中的安全包括两方面的内容,即操作安全和成分不被破坏。传统提取方法如煎煮法、回流法、连续回流法、浸渍法、渗漉法等已被人们熟知…,超声波提取
部分鲜果、鲜根及非韧性全草进行提取。通过试验,取得了可喜的效果,尤其是提取速度和室温进行所体现的优势优于所有方法。在河南省教委的支持下,与洛阳工学院章琛教授等合作,自主研制出了首台能用于硬组织破碎提取的样机”1并用于实践。之后,相继试制数台陆续被国内部分学校及研究机构所采用。但由于随后技术升级、市场运作及相盖人员相继出国而搁浅。毫无疑问地说,如果没有这一方法和与之呼应的提取嚣.近十余年对椎花叶川,诃子“】、柳兰”】、鬼灯整”…、千屈菜““、桃金娘“”等巾草药中丹宁、多元酚类化合物的研究几乎是不可能的。实践不仅充分验证了这一方法和仪器在中草药丹宁与多元酚类化合物研究方面的优越性,同时还展示出了在其他多类化舍物方面的潜在优势和与其他方法相比所显示出的无可比拟的特性。
为了能对组织破碎提取法和闪式提取器具有更好的了解和应用,现将从其基本原理、基本结构,优势分析及应用实例作简要介绍。l提取过程的再剖析
在中草药常用提取方法中,除了专属性强的压榨法、升华法和水蒸汽蒸馏法外,所有方法都与溶剂有关,故又
法”1馓液提取法”o及超临界萃取法“o等渐被人们接受,
其优缺点及应用潜力正在经受实践的检验。近年来,最新用于研究的组织破碎提取法及闪式提取器经过十余年的初步实践已显示出独特的优势。本文将对组织破碎提取法的刨制与实践进行简要介绍,尤其是对其特性、优缺点及发展前景作一较客观的比较分折,以期对致力于中药现代化研究的同行有所参考。
植物组织破碎提取法作为中草药化学及相关学科中一种科学的提取方法于1993年首次提{n”J,当时是利用日本阔山大学奥田拓男教授所赠送的日本三菱JM—E3l型混台器而完成的,这一仪器其实就是现今十分流行的家用果科帆。由于该仪器是专用于鲜果软组织打碎混台的目的,所用材料也多不耐有机溶剂,所以当时只能对植物叶类、
提取为中药现代化和中草药研究过程中的重要一步。刘延泽教授多次受国家自然科学基空资助,在对中草药丹宁研究过程中首次提出了植物组织破碎提取法,作为一种创新方法经过lO余年的实践已取得显著效果并渐成熟。据此方法研制出的闲式提取器已成功用于实践。本文从方法的提出,基拳原理.应用实例,优缺点分析及发展前景作了较客观描述.相信将时谈领域研究起到积极作用。本人从事中草药研究50奈栽,深为此创新方法与技术而欣慰并能先睹为快,特以小序推荐。
(谢晶曦)
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【基金项目】国家自然科学基士、国家科技郜厦郑州市科技创新基盘、坷南省杰出青年基金、河南省教委自然科学基金等资助
【’通讯作者】刘延泽诤E搜.连续三班获得国家自然科学基金(1991_1999)和-河南省杰出青年科学基盘费助(1996),完成国享九五科枝
攻关蹲目。现为黄圆哈佛大学医学院生物有机与天然产物实验宣研兜员。Bl∞rsmdcalld
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统称为溶剂提取法,在溶剂提取法中影响提取效率的主要因素有溶剂(介质)的性质、物料的性质、外力的影响和介
物料粒度和外力作用也是影响平衡时间和提取效率的关键因素,其中物料粒度虽然可通过粉碎来实现,但实际应用仍有不少限制与不便。如对于根、茎、时、花果等不同质地的药材需要不同的粉碎方法,对新鲜药材更需要特
质的温度。无论是植物的初生代i身i成分(糖类、脂类、蛋白、
激素等)或次生代谢成分(生物碱、黄酮漕娄、萜类等)和异
常次生代谢成分(如树脂、树胶等),在植物体内多是以分子
状态存在于细胞内或细胞间的,少数以盐的形式(如生物碱、有机酸)、结晶形式(如草酸钙结晶)、分子团形式(如五倍子丹宁)等存在。当与其周围的新鲜溶剂介质相比.植物组织内外浓度差无限大,此时.随着时问的延长,溶剂将自动向植物细胞内渗透、充盈甚至破坏细胞膜而彻底打开内外通道,同时细胞内的成分因溶剂分子的渗入、包围而使细胞内的原存状态解离并开始向低浓度的细胞组织外扩散,经过一定时间即达到内外平衡,此时过滤,即是前所述及的浸渍法。在这一过程中,溶剂的选择极为重要。可以想像,如果用水去浸泡花生、大豆中的油脂是几乎不可能的.同样用石油醚等非极性溶剂去提取各种植物中的多精电是完全无效的。除了溶剂本身的渗透能力外,各种溶剂的溶解特性起关键性作用。对于通常所讲的“相似相溶原理”可以用图1更好地表现出来,图的中心代表中等极性溶剂,该类溶剂一般既可以溶解出极性成分,又可溶解出非极性成分。当溶剂极性增强时,所溶出成分的极性也增强,同时极性成分增多,非极性成分减少,当达到足够强时,将不再溶出非极性成分;同样.当溶剂极性减弱时,所溶出成分的极性也减弱,同时非极性成分增多,极性成分减少,当达到足够弱时,即完全非极性溶剂时。将不再溶出任何授性成分。
曦丹极性
殊的粉碎方法。对于像熟地、玄参等的粉碎几乎是不可能
的。另外。粉碎过细又会对后期的过滤带来很大麻烦,尤
其是当用水作溶剂时就更为突出。因此,靠粉碎来缩短平
衡时间、提高提取效率的可行性十分有限。在溶剂和物料粒度决定之后,外力的作用即成为影响提取效率的关键因
素。如前述的超声波、微渡、磁辐射,超I临界动态连续萃
取、高压连续渗漉罐及通过进一步改进可实现的搅拌浸渍法、振动浸渍法等,这些方法均在某些方面有一定改进,但均未实现重大突破,甚至是提取效率的显著提高。此外,溶剂用量大小也是一个很矛盾的因素,溶剂用量小.显然可很快达到组织内外平衡,但间时也因过早饱和作用而影响提取收率,此时,往往需要多次重复提取方可达到完全。如溶剂用量过大,一是造成直接浪费,二是达到平衡的时间显著延长,同样影响提取效率。因此,组织破碎提取法和稠式提取器方可以崭新而貌面世并给中药提取领域带来革命性变化。
2组织破碎提取法的基本思想
由上述对影响提取效率的因素进行的分析即可看出,物料粒度越小,溶剂与被提取的成分极性越接近,适当外
力作用越突出。提取效率就会越高。组织破碎提取法通过
闪式提取器的巧妙设计,在适当溶剂存在下,将物料高速
弱。积
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非楹性成分
勰强
强
概性成分
粉碎至适当粒度,同时伴有高速搅拌、振动、负压渗滤等外
力。实现了这3种因素的最佳结合。达到了充分提高提取效率之日的。在这一过程中,为了在既能充分发挥粒度小易达到组织内外平衡的优势,叉不至于因颗粒度太细而影
川∥/黼臌性
弱
响后期的过滤,故在破碎刀具的设计方面控制『{波碎颗粒
范围在40~60目左右。由于这样细小的颗粒与溶剂在一起,在高速搅拌与振动下,组织内外的化学成分在极短的时间内即可达到平衡。因此,完成一次提取一般在l耐n之内即可,药渣在抽滤过程中略经洗滤即可达到提取基本完全的目的。
国l溶剂极性与被提取成分极性关系图
3闪式提取器的基本结构
在所选溶剂的极性决定后.影响提取效率的因素就剩
物料粒度、外力作用和介质温度了,其中介质温度影响的一般规律是温度越高,分子运动速度加强,从而使达到植物组织内外平衡的时间缩短,即提高提取效率。如煎煮法、回流提取法即是这一原理。但值得注意的是,有些植物成分在一定溶剂中随温度丹高而溶解度降低,如葛根素(pu棚mn)在甲醇溶剂中随温度升高而溶解度降低”“,这一现象在提取时应引起注意。此外,有些成分在一定溶剂中受热分解或变性,如含淀粉多的材料甩水傲溶剂提取时,加热可使淀粉糊化而阻碍一些成分的继续溶出和影响过滤。加热提取丹宁类化合物也易造成成分分解和氧化破
根据前述组织破碎提取法的基本思想,闪式提取器由
破碎刀具、动力部分、升降系统、控制系统及物料容器所组
成,其中破碎刀具和动力部分为关键部件。破碎刀头的设计充分吸收了用于动物组织匀浆化的均质器的优点,避免了普通组织捣碎机的单刀切碎,“欺软怕硬”的不足。内外刃之问保持0.5一llIⅡII问隙,这一间隙的大小不仅决定了破碎颗粒度的大小.而且影响双刃间的切割效率与锋利性。
双刃通过精密的同心轴相连,外刃固定,内刃在高速电机的
带动下旋转,从而对被破碎的材料产生破碎作用(见图2)。
本仪器的动力部分是由单相高速电机完成,根据破碎
刀具的大小配置不同功率,电机通过电阻或电压控制系统
实现无级连续变速或阶梯档位调速。物料容器采用配套且具密封装鹭的耐有机溶剂材料制成,也可用适当容器替代。
坏。因此,利用加热缩短平衡时问,提高提取效率的得失
兼具,需依具体情况具体考虑。
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图2闪式提取器的基本结构图4闪式提取器的基本原理
完成一次提取一般在30s左右,其速度与任何传统方法相比,可说是眨眼功夫.因此被称之为闳式提取器。对其进行仔细剖析,不难发现整个过程包含了以下基本原理:4.1快速破碎
本仪器内刃的转速为15O∞~30000r・Ⅱ】iII一。可以想像,对于100g的中等脆陛的中草药根、茎等饮片,在普通研钵或碾槽中,手动反复研磨15000遍,将会是如何细碎的程度,但达到这一目的即使在不停的情况下(2次/s),可能要花2
h以上,而本仪器仅需不足1哪。
4.2剧烈搅拌
在内刃高速转动并与外刃问发生切割作用过程中.在内刃中心形成强力涡流,并带动已粉碎的物料内外翻动,从而产生剧烈搅拌作用,使整个体系处于快速的浓度变化之中。物料中被提取的物质分子随着破碎颗粒的变小而暴露于溶剂环境中并迅速转移至溶剂中。提取溶剂与物料颗粒问化学成分的分布随着破碎的进行在平衡、不平衡之
间快速交替进行,最终达到彻底粉碎烷全平衡的提取。
4.3超速动态分子渗透作用
在工作状态,整个体系处在一个高速动态体系之中,内外刃之间不仅发生了对物料的剪切作用,同时借助内刃旋转、外刃固定而产生一种涡流负压,在这种负压的作用下,在外刃窗口的内外发生分子渗透现象,即已通过剪碎面充分暴露的物质分子(被提取成分)在负压的作用下,被
溶剂分子包围、解离、替代,最后脱离药材进入溶剂中而实
现提取的目的。4.4强力振动作用
超声渡对浸渍法的加速作用早已被公认,振动对植物组织问结构的破坏作用及对改变一种分散体系的作用也不言丽喻。本仪嚣在高速旋转中能够产生相当于超声波1,60的振动,在这种振动作用下,无疑对达到化学成分在被破碎物料颗粒内外的溶解平衡起到强力促进作用。
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方数据5破碎提取与先粉碎后提取
简单从表面来看,不难有这样的疑问,即可以先用普通粉碎机把药材粉碎,然后再用浸泡或搅拌浸泡的方法进行提取。这种想法仅从一种周紊考虑当然可以适当提高效率,但略作分析,二者本质不同即不难看出:(1)从操作来看.就一般材料粉碎而言,至少需要一个适当大小的粉碎机.而这种粉碎机要同时适合软、磋材料、新鲜材料、肉质材料、韧性材料等的需要几乎是不可能的。(2)对于易粉碎的材料,粉碎后往往形成大量细粉,而这种细粉无论
再用什么溶剂提取都会对后期过滤带束极大麻烦。(3)对
粉碎后的物料提取如采用浸渍法,就必然再加上搅拌装置,否则,被粉碎的物料要么漂浮在表面+要么沉在底部,靠自然力量实现药材内外教提取成分在短肘阃内达到浓
度平衡是几乎不可能的,至少失去了粉碎的意义。如果用于渗滤或回流提取,则前者极易域被细粉堵塞而滞留,后
者则会因细鼢沉底丽爆沸甚至危险。(4>从提取的时间效
率来说,后者无论如何费时都会比前昔高数百倍以上,如
果用于生产,由时间与人力所造成的损失将为数倍至数百
倍之多。(5)按后者最简单的操作程序来评价,至少需要两件动力设备,即粉碎机和搅拌机。此外,尚需要各自的配套器具,而破碎提取器仅相当于其一。(6)从环境保护分析,破碎提取占用空间小,设备简单,无粉尘污染,而后者与其则完全相反。
6闪式提取器的优越性小结6.1省时
在一定规模情况下,完成一次提取仅需30s左右。6.2室温提取.无点分破坏
本仪器一般在室温条件对物料进行提取,避免了任何不耐热成分破坏的可能性。必要时可采用定制的加热容器,或使用预热的溶剂。
63适用于各种材料
本仪器可用于各种植物的根、茎、叶、花、果实、种子(细小的种子除外)等,一般在预粉碎至普通中药饮片大小,新鲜材料,坚硬材料、韧性材料等均可。6.4可用孟各种成分的提取
根据成分的性质不同,选用不同溶剂,如提取糖类、蛋白,多肽、氨基酸等可用水作溶剂,提取黄酮等各种苷类成分可用乙导或含水乙醇,提取丹宁及多元酚类成分可选用不同浓度丙酮进行。6.5适应于多数溶荆
常采用水、乙醇、甲醇.丙酮等桨它们的含水溶剂,一般以既能提取出所需成分,又适于后期过滤为宜。对于乙醚、乙酸乙酯等易燃有机溶剂一般不宜选用,必要时严格按易燃有机溶剂的使用注意事项在通风、安全的地方进行。提取生物碱需用酸农时,应先用常水破碎提取,然后再加入适量酸调至所需酸度,搅拌过滤即可,以免对刀头
产生腐蚀作用。
6.6高效节能
按提取100g中等硬度的根类药材计算,用常规加热凰流提取,一般用5∞w电热套或电炉作为热源提取2次,每次lh,总耗电为1kw・h~,即一度电。若用f^J式提取器提取,可在20s完成,按800w功率计算,即20÷36(】0×O.8=O.0∞度,仅为前者的l,250,如果扩大至中试规模或生产化规模,其节约程度将十分显著。对于松散软材料如叶、花、全草类,由于其质轻而在常规提取中将浪费巨大空间及相应溶剂用垦,而用闪式提取器则会在瞬闸将其变为浆粉,且可在提取过程中分次加料直至物料,溶制比合适为止.从而可发挥出闪式提取器的巨大威力。比起超声提取也要快数十倍之多。6.7操作简便
本仪器不仅是单人按键式操作,避免了同流提取中在烧瓶内装掏药渣的苦恼,也避免了煎煮法中热源控制及长时间看守的不便。但仍应严格按照操作规程进行操作。6.8有利环保
前已述及,与先粉碎后提取相比,避免了事气杉l尘的污染;与回流提取法相比,掏取药渣时有机溶剂易对人体造成一定伤害,且易在药渣内残留大量溶剂对进一步处理造成困难。用闪式提取器只需抽滤即可把大部分残留有机溶剂除去,少量残余可通过抽滤出提取液后用适量水抽洗即可。基本除尽溶剂在药渣中的残留。除净溶剂的粉碎药渣可视能否再利用情况参与自然生态循环。7缺点及注意事项分析
由于受提取容器大小、动力的额定功率及破碎刀具臂长的影响,对于目前市场上的JHBB50s型闪式提取器单次提取量受一定限制。对于质地硬脆、密度大的干果、根茎饮片类.一次可提取loo一300g,但对于密度小,蓬松的计、花及全草类,由于体积大,敢单次加入药材晕就小。但无论什么材料。均可通过分次加人而达到所希望之目的。对于非饮片、质地坚硬的根及根茎、干果类等应先加工成饮片大小或适当打碎,否则因无法进入内外刃之间而使破碎无法进行。有时会因使用不当而造成刀头被卡现象,此时应立即停机按操作说明及故障排除方法处理即可。当用水作溶剂时往往会因水溶性成分太多、牯稠性增大及混悬、乳
幽删雠)的干燥叶。具有清热止泻,活血止血的功效。用于
治疗暑热泄痢、扭闪伤筋、创伤出血、目痛喉疮等症。眦
丹宁及有关多元酚类化合物的结构及生物活性,受国家青年科学基金资助对其进行了较系统研究。由于丹宁类化合
初步分析表明。苴中古有丰富的丹宁类化☆物.为了趟岍萁
物的不稳定性,苗先对其提取方法进行了摸索试验,同时进行试验的还有芫花叶等6种材料。由于被试材料均为干燥叶类,故本研究采用了日本产三菱JN-E3l型混合器,对所选用的6种植物材料分别用95%n0H和70%M岛c0作溶剂进行室温破碎提取,同时选用回流提取法中的最佳条件进
行回流提取作为对照,将二法所得干燥提取物的收率和11c
行为等进行比较分析,从而说明破碎提取法的优越性。所
选用的6种试验材料分男4为:(1)芜花叶(n枷耻舻l‰m),主要含有黄喇及绿原酸类化台物;(2)长白瑞香叶(D.鼠脚一
伽d),主要含有香豆素类化合物;(3)柳叶(删h缸叫轨妇)含
有黄酮类化合物;(4)尖瓣瑞香(D.珊眦豇。沁)含香豆素类化
台物;(5)木瓜叶(晶凹研以目曲踟厶)含丹宁类化合物;(6)
算盘子叶(儡埘锄胁删6e凡肌)含丹宁类化台物。
研究结果表明:I)当用70%M龟co作溶剜时,6种材料分别用两法所得干燥提取物的收率几乎一样。由于破碎提取仅用1删n完成,且不需加热,而回流提取1次就需要2h,困此就等于提高效率l∞倍以上,且节约了大鼍能源。2)在2种方法中,70%M色co比95%Et0H对所用的6种材料及所含成分来说,具有更强的穿遗性和溶解能力,收率远高于后者。因此,对于上述材料中成分的提取米说,以酋选
70%M晚co为宜。3)将两法所得各提取物进行初步瞰比
较分析,结果基本一样。由于丹宁类成分即使受热破坏也很雕在普道11c上显示,但破碎提取法中由于避免了加热,其安全性是十分可靠的。因此,对J|fI|花叶中丹宁的提取主要采用了这种方法,效果十分满意。总提取物收率达到25%以上,HHc分析显示该提取物由大小不同的可水解丹宁分子组成mJ,经Toyop.衄1Hw,40和Mcl窟el反复分离纯化,从中分离鉴定了30余个可水解丹宁及多元酚类化合物。尤其是从中分离到了由可水解丹宁单元体(如n,目商n
A
等)、二聚俸(如n・胖inD等)和三聚体(r咐捌nG等)及具大
环结构的可水解丹宁(0e."t}leinB)等组成的一系列化台物。从所证明的结构本身即可充分显示该提取方法的安全性。
8.2诃子中诃子酸类成分的挺斟”
化现象等而使过滤硐难,此时可依所需成分特性进行处理,
如先用纱布粗滤去药渣再精滤,或用适当有机溶剂如乙醇处理等。正像任一处膏难包治百病一样,阕式提取器尚无足蜉证据或倾向完全替代目前的提取方法。对于各种复杂多变的情况应灵活处理,更尚需长时间的摸索检验。8闪式提取器的实践
诃子为使君子科(瞄nh咖eae)诃于属植物诃子(砌耐-n以。狮出)和毛诃子(r.捌如出口)的干燥果实,具有清热
解毒、收敛养血、调和唐药的功技。作为陶家九五攻关期间80味药材质量标准化的内容之一,我们曾对住广西、云南等我国主要产地采集到的诃子样品、各大药材市场和部分院校收集到的样品进行了鉴定及成分分析,对广西产的当年干燥诃于进行了系统化学成分研究。
取干燥去核诃子4.5k,用自行研制的闪式提取器和以含水丙酮作为溶剂进行室温破碎提取,提取滚减压浩绌至干后得总提取物I5虹。对该提艘物进行的初步化学分析和}时c分析匀显示有丰富的丹宁及多元酚类成分。对其
前已述及,自从早期的家用果汁混台器、第一代试制的中低速旋转电机到目前的标准化产品,曾对数lO种中
草药进行丁实用性研究与试验,下述部分实例将会对本法的优势及实用价值作以充分说明。8.1挫花叶中丹宁类成分的提取”1
槛花叶为金缕梅科稚术属植物桃花或椹术(hrf舳fIcm
进行Dia湎HP_20,№坤咖1
加余种成分.其中诃于酸(c}曲Id“c肿id)和诃黎勒酸(c}七bL卜
II删反复柱层分析。分离得到
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图3应用实例中部分化台物的结构式
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la出肿id)为其主要成分。同样提取方法对其进行HPLc定量分析表明,诃于酸和诃黎勒酸的含量分别为7.28%和13.06%。进一步的总提取物的收率研究表明,对l,02g药材用150mL70%丙酮进行破碎提取,每次提取20s,提取液减压抽于,4次所得提取物及收率分别为第1次O.387g
(38,7%),第2次o.“0g(儿,O%),第3次0。02l《2,1%).
第4次仅为0
004
g(o.4%)。前3次的提取效率分别为
74.7%,21.2%和4.1%。因此,从经济角度考虑,提取2次即可达到95%以上。可见对于像诃子这样极硬的药材,破碎提取则更加显示出其具大威力。
8
3绿搴中茶多酚粪化合物的提取““
绿茶中主要化学成分多为水溶性或中等极性,这些成
分包括多元酚、氨基酸漕类,咖啡因等碱性成分及微量元
素等。其中的多元酚即常所称之的茶多酚主要由4种化合物组成,分别为表儿茶素(epi∞眦hin,Ec),表儿茶素褴食子
酸酯(e嘶alec}面髀l】ale,EcG),表没食于酰儿茶素(ePi酽no—
caIeclliIl,E(z)和表没食子酰儿茶素没禽子酸酯(印i日aIlocat.托hin刊】ale.EGcG),其中尤以EGOG含量最高,且为绿茶中防癌的主要成分。尽管这些成分都具有较好的水溶性,但考虑到对茶多酚提取更加充分和后期处理的方便,故采用了古水丙酮作为提取溶剂。本研究用普通信阳毛尖绿茶作为原料进行室温组织破碎提取.3次提取收率的总和选50%以上.3次提取之间的比例基本为9:3:1.说明2次提取即已基本完全,如在抽滤过程中再用适量新鲜溶剂冲洗。则会达到更好的效果。
8.4柳兰中黄酮与丹宁类成分提取一1
柳兰为柳叶荣科(O唧虻ea=)植物柳兰(出帅删循梳船删渤啪)的干燥全草,具有治疗乳汁不下、肠燥便秘、
月经不调、骨折及关节扭伤的作用。曾有报道其中舍有的大分子多元酚类化合物具有抑制小鼠移植瘤生长的作用。为了阐明其主要化学成分及可能的抗肿瘤作用.受国家自然科学基金资助对其进行了系统研究。
对采自湖北神农架的该植物干燥地上部分2k以吉水丙酮和闪式提取嚣进行破碎提取,减压浓缩去除丙酮后直接进行Di撕0nHP-20柱层析,对不同浓度甲醇洗脱部分再进行T0yopeadHw-40和McI科ⅡB20P反复柱层析,分离鉴定出包括黄酮苷.绿原酸、小分子酚类化台物及可水解丹宁单元体和二聚体的18种化合物.其中,w岫怕曲n
I
在引起人白血病K562细胞凋亡方面显示出非常好的作用,有望成为进一步开发用于人cMLK562细胞的先导化合物‘嘲。
8.5桃金娘根中C一苷可水解丹宁的提取‘。1
桃金娘(鼢潮仲口姗吼脚)为桃金娘科药用植物,
主要分布于南方各省,其根(山稔根)具有祛风除湿、止血、止痛的功效,主要用于治疗肝炎、血崩、胃痛、风湿性关节痛、疝气及传染性肝炎等症。受国家自然科学基金资助,对其化学成分进行了系统分离鉴定。
对初步砸碎的桃金娘根用闪式提取器和含水丙酮进行破碎提取,同前述方法共分离得到lO余种D苷可水解
丹宁及其他黄酮、多元酚等类型成分,其中c越瑚a出、ca蜊十
一Ilin、咖n眦嘴ill、杨梅素.3.0一葡萄糖苷(卿dce血_3-0一一u_
万
方数据o商de)为其主要成分。8.6芜花叶水溶性部位的㈣指纹图谱厦3神黄酮苷
的定量分析…1
芜花叶为瑞香科植物芫花(执p^埘静止枷)的干燥叶,
在我们对其进行系统化学成分研究过程中,发现其水溶性部位对心血管系统有良好的作用,能明显增加麻醉猫的冠脉血流量懈J。为了寻找其活性成分,首先用含水丙酮进行室温组织破碎提取,提取液浓缩陈去丙酮后放置过滤,滤除不溶性成分,滤液准确定溶后进行HPLc分析.利用从芜花叶中已分离得到的黄酮苷类成分作为对照品,与已建立的芜花叶水溶性部位的HPLc指纹图谱进行对照,从中准确鉴定出了3种黄酮苷,它们分别是木樨草苷(列u暗0lin)、异槲
皮苷(isoql】erciⅡiII)和芫花叶苷(,啪huanin),三者的含量分
别是1.6%,0.065%和0.23%.这些成分与之前用95%乙醇回流提取的成分基本一致,但提取时间大为缩短。8.7其他
利用闪式提取嚣提取并成功进行过较详细化学成分研
究的中草药尚有:心胆草(目m出蜊P州曲幽酌啪)“…、石榴
皮(尸咖池g删啪)湎]、鬼灯檠(而嘲踟缸驯扣池)”o]、干
屈菜(£柑^nmd妇砌)““等,无论从总提取物的收率.还是从所分离得到的成分的品质方面都是十分成功的。9结语
植物组织破碎提取法是在生物化学中的常规组织捣碎技术、食品加工技术中的豆浆、淀粉等制造工艺的基础上结合中药提取的基本原理而提出的,其基本原理可以描述为:植物材料与适当溶剂在室温条件下经高速粉碎至细微颗粒,使药材内外化学成分在高速搅拌、振动及局部负压渗透等综合外力作用下迅速达到平衡,通过过滤达到提取目的。由于整个过程仅在数秒至数十秒内完成,故实现这一过程的仪器称之为冈式提取器。作为一种技术刨新,该仪器吸收了传统的粉碎、搅拌、振动、浸渍及萃取等技术的优点,使完成一次提取所需要的时间比常规方法缩短至数十分之一至数百分之一,同时由于免去了加热,从而可有效避免不耐热成分的破坏。近十余年来,该方法和仪器已非常成功用于丹宁及多元酚的提取,对于用水、乙醇、甲醇、丙酮等厦其含水溶剂提取的中药成分应均能够使用。随着新一代闪式提取器的商品化及不断扩大运用,由其所带来的方便性及实用效益,将是十分显著的。井将在中试及生产领域发挥重要作用,刨造更大的价值,加速中药现代化的进程。
致谢在此谨时所有曾对奉项目给予支持的、参与本项目有关研完的舍作者、研究生等表示卷谢。作者可应读者请求酌情提供文中所涉厦的有关材料。参考文献
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万方数据
植物组织破碎提取法及闪式提取器的创制与实践
作者:作者单位:刊名:英文刊名:年,卷(期):被引用次数:
刘延泽, LIU Yan-Ze
河南中医学院,郑州,450008
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