[色谱分析法]复习题答案
《色谱分析法》复习题
1. 色谱法作为分析方法的最大特点是什么?
1）色谱法的突出特点是具有很强的分离能力。所以，色谱法成
为许多分析工作的先决条件和必需的步骤。2） 近二十年来，
随着与色谱法相关的一系列技术，如填料与柱制备技术、仪器
一体化技术、检测器技术、数据处理技术的发展与创新，色谱
法已具有分离效率高、分析速度快、样品用量少、灵敏度高、
分离和测定一次完成、易于自动化等优点。
2. 一个组分的色谱峰可用哪些参数描述? 这些参数各有何意义?
色谱峰的特征
一个组分色谱峰特征的描述:
峰高或峰面积（用于定量）
峰位（用保留值表示，用于定性）
峰宽（用于衡量柱效）
3. 衡量色谱柱效的指标是什么? 请作简要的说明.
色谱峰的柱效参数 (区域宽度 )
标准差(σ):正态分布曲线上两拐点间距离之半. σ的大小说明组分在流经色谱柱的过程中的分散程度。σ小，分散程度小，极点浓度高，峰形“瘦”，柱效高。反之，σ大，峰形“胖”，柱效低。
峰宽（W ）:在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点间的距离. W = 4σ
半峰宽（W1/2）:通过峰高的中点作平行于峰底的直线，此直线与峰两侧相交两间的距离.
W1/2= 2.355σW = 1.699W1/2
4. 简述谱带展宽的原因.
5. 什么是分离度? 要提高分离度应从哪两方面考虑?
分离度是相邻两组分色谱峰保留时间之差与两峰峰宽均值之比。分离度是总分离效能指标。R =tR2－tR1/（W1+W2）/ 2=
6. 下列参数发生何种变化可使理论塔板高度减小?
(1) 流动相速度;(2)固定相颗粒;(3)组分在固定相中的扩散速度;(4)柱长. Ven Deemter 方程式H ＝A + B/u + Cu H ：理论塔板高度 A ：涡流扩散系数 B ：纵向扩散系数影响塔板高度的C ：传质阻抗系数 u ：流动相线速度在填充色谱柱中，由于填料粒径大小不等，填充不均匀，使同一组分的分子经过多个不同长度的途径流出色谱柱，使色谱峰展宽。涡流扩散的程度由下式决定：A ＝2λdp
7. 名词解释: (1)噪声和飘移;(2)灵敏度和检测限;(3)线性和线性范围.(4)梯度洗脱.
8. 写出分离度(R)与柱效(n)、分配系数比(α) 及容量因子(k)间的关系式. 指出各项的含义. 当分别增加n 、α、k 时,R 有什么样的改变?
9. 色谱分析法进行定量分析的依据是什么?
10. 简述Van Deemter方程在气相色谱和高效液相色谱中表达形式的异同.
11. 某色谱柱的理论塔板数很大, 是否任何两种难分离的组分一定能在该柱上进行分离? 为什么?
12. 什么是正相色谱? 什么是反相色谱? 讨论正、反相色谱中流动相强度与极性的关系.
13. 在RP-HPLC 中使用的甲醇-水流动相体系中加入磷酸盐时, 流动相的洗脱能力是增大还是减小? 为什么?
14. HPLC的光二极管阵列检测器可以得到那些信息?
15. 用方程式说明反相离子对色谱法分离强酸、强碱的机制.
16. 何谓化学键合相? 常用的化学键合相有哪几种类型?
17. 常用的HPLC 定量分析方法是什么? 内标法的特点是什么?
18. 以液相柱色谱方法分离纯化蛋白质的分离模式有几种, 各自的基本特点是什么?
19. 用HPLC 建立一种测定生物材料中某种活性成分的含量的方法时, 进行课题设计需要从哪几个基本方面来考虑?