葡萄籽主要含有多酚类物质
葡萄籽主要含有多酚类物质(GPS)，包括儿茶素类和原花青素类。 其中儿茶素类包括儿茶素、表儿茶素及其没食子酸酯，是葡萄籽中 主要的单聚体，也是原花青素寡聚体和多聚体的构成单位，在植物体内经生物化学反应而形成复杂的聚合物，是一种强抗氧化剂，其抗氧化功效是维生素C的20倍、维生素E的50倍；具有抗氧化及清除自由基抗辐射、抗肿瘤、抗衰老、治疗心血管疾病、提高免疫功能、预防神经退行性改变等作用。本文采用正交试验方法，
1仪器与试药
RE52CS型旋转蒸发仪；B一220型恒温水浴锅(上海亚荣生化仪器厂)；紫外可见分光光度计(上海先科分光仪器有限公司)；BSI．IOS型电子分析天平(北京市赛多利斯仪器系列有限公司)；G16型医用高速离心机(安新白洋离心厂)。儿茶素对照品(中国食品药品检定研究院，批号110877—201102)；葡萄籽，香草醛、甲醇、浓盐酸(分析纯)。 2方法与结果
21含量测定方法的建立
2．1．1 对照品储备液的制备取105℃干燥至恒重的儿茶素对照品，精密称定20.18mg，置50mL量瓶中，加蒸馏水溶解并定容至刻度，即得。
2.1.2 供试品溶液
称取葡萄籽粗粉1.0294g，置100mL圆底烧瓶中，加60％乙醇溶液 50mL，水浴回流提取2次，每次30min，滤过，合并滤液，减压浓缩回收乙醇，水相转移至100mL量瓶中，蒸馏水稀释至刻度，定容。取上
述溶液4mL，离心30min(16 000r／min)，取上清液，备用。
2．1．3 吸收波长的选择精密吸取对照品溶液和供
试品溶液各0．5mL，置lOmL比色管中(避光)，加入
3.0mL 4％香草醛甲醇溶液和mL浓盐酸，混匀，室
温放置显色15min。以纯水为空白，在200～800nm波长范围内进行扫描，结果显示，对照品溶液和供试品500nm，
溶液均在500nm处有最大吸收峰，确定吸收波长为500mm
2．1．4儿茶素标准曲线的制备分别精密移取对照
品储备液1．0mL、3．0mL、4．0mL、5．0mL、7．0mL、
8．OmL，置lOmL量瓶中，加蒸馏水定容至刻度。分别
移取上述不同浓度对照品溶液各0．5mL，置10mL比
色管中(避光)，加入3．OmL 4％香草醛甲醇溶液和
1．5mL浓盐酸，混匀，室温放置显色15min。以纯水为
空白，照紫外一可见分光光度法，在500nm处测定吸
光度(A)。以儿茶素浓度(X)为横坐标，吸光度(Y)
为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=1．773X+
0．000 1，r=0．999 8。结果显示，儿茶素对照品在
0．038 1—0．304 8mg／mL范围内线性关系良好。
2．2不同提取条件对多酚提取效果的影响
2．2．1 乙醇浓度对多酚提取效果的影响准确称取
葡萄籽粗粉5份，分别置于100mL圆底烧瓶中，依次
加入8BV 20％、40％、60％、80％、95％的乙醇溶液，回
流提取2次，每次30min，滤过，合并滤液，滤液减压浓 缩回收乙醇，水相用蒸馏水定容至100mL，摇匀，备用。 精密量取2．0mL样品溶液，置10mL量瓶中，加蒸馏水 稀释至刻度，摇匀，得各乙醇浓度项下供试品溶液。取 供试品溶液4mL，离心30min(16 000r／min)，吸取上清 液0．5mL，置10mL比色管中(避光)，照儿茶素标准曲 线制备项下的方法，测定样品溶液的吸光度，计算多酚 得率。结果显示，40％、60％乙醇多酚得率较高，
2．2．2溶剂倍量对多酚提取效果的影响考察6BV、 8BV、10BV、12BV及14BV溶剂倍量对多酚提取效果 的影响，其余操作同2．2．1。结果显示，IOBV乙醇较 为适宜
2．2．3提取时间对多酚提取效果的影响考察提取
时间30、60、90、120、150rain对多酚提取效果的影响， 结果显示，1．5h多酚得率可达90％以上