普罗布考通过诱导血红素加氧酶1发挥抗动脉粥样硬化作用

分类号：Ｒ５４１．４

密级：单位代码：１０４２２学号：Ｌ０８６００８７

⑧∥菇办写

硕士学位论文

（专业学位）

论文题目：普罗布考通过诱导血红素加氧酶１发挥

抗动脉粥样硬化作用

Ｐｒｏｂｕｃｏｌｐｒｏｔｅｃｔｓａｇａｉｎｓｔａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓｔｈｒｏｕｇｈ

ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１

合作导师２０１２年４月２１日

原创性声明

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、

的法律责任由本人承担。

论文作者签名ｊ药啦日期：２堕坠哗

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（保密论文在解密后应遵守此规定）

雠撇埤新躲挚日期：型三曼塑

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目录

中文摘要………………………………………………………………………１英文摘要………………………………………………………………………４符号说明………………………………………………………………………６前言……………………………………………………………………………１／日Ｕ吾……………………………………………………………………………

材料与方法……………………………………………………………………９结果……………………………………………………………………………１８讨论……………………………………………………………………………２０结论……………………………………………………………………………３０附表……………………………………………………………………………３１参考文献………………………………………………………………………３３致谢……………………………………………………………………………４０攻读学位期间发表的主要学术论文…………………………………………４１

ＣＡＴＡＬｏＧＵＥ

ＣｈｉｎｅｓｅＡｂｓｔｒａｃｔ………………………………………………………………１ＥｎｇｌｉｓｈＡｂｓｔｒａｃｔ………………………………………………………………．４ＳｙｍｂｏｌｉｃＤｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ…………………………………………………………．６Ｐｒｅｆａｃｅ………………………………………………………………………．．７ＭａｔｅｒｉａｌｓａｎｄＭｅｔｈｏｄｓ………………………………………………………．．９Ｒｅｓｕｌｔ…………………………………………………………………．………１８Ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ……………………………………………………………………．．２０Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ……………………………………………………………………．．３０Ｔａｂｌｅｓ…………………………………………………………………………．．３１Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ……………………………………………………………………．．３３Ａｃｋｎｏｗｌｅｄｇｅｍｅｎｔｓ……………………………………………………………４０ＰａｐｅｒｓＰｕｂｌｉｓｈｅｄ………………………………………………………………４１

普罗布考通过诱导血红素加氧酶１发挥抗动脉粥样硬化作用

作者姓名：张建宁

专业：内科学（心血管）

指导教师姓名郭媛教授

中文摘要

研究背景

随着对氧化型低密度脂蛋白（ｏｘｉｄｉｚｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＯＸ．ＬＤＬ）参与动脉粥样硬化（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，ＡＳ）形成和发展的学说认识的加深，国内外学者已经将抗氧化剂用于抗ＡＳ的研究。其中普罗布考是ＦＤＡ唯一认证的抗氧化药物，最初以降脂药应用于临床，近几年发现其具有抗氧化、降脂外的其他作用，如改善血管内皮功能、抑制平滑肌细胞增殖等。动物实验及临床研究显示普罗布考具有抗ＡＳ作用，但其具体作用机制尚未完全阐明。

血红素加氧酶（ＨｅｍｅＯｘｙｇｅｎａｓｅ，ＨＯ）系统是血红素氧化的起始酶和限速酶，其主要功能是分解血红素生成胆绿素、一氧化碳和游离铁，胆绿素随后被进一步还原成胆红素，游离铁与转铁蛋白结合。ＨＯ在体内有ＨＯ．１、ＨＯ．２、ＨＯ．３三种同工酶。ＨＯ．１为诱导型，广泛分布于脾脏、肝脏、网状内皮系统和骨髓等组织，能在血管内皮细胞和平滑肌细胞中低水平地表达。现已证实，ＨＯ．１是一种应激蛋白，在应激状态下适量表达可以减轻细胞损伤、蛋白质氧化及脂质过氧化。近来的动物实验表明，增ＪＪＨＨＯ．１表达可明显减轻ＡＳ病变程度；临床研究亦发现，人类ＨＯ．１表达水平与冠心病发病和冠脉支架术后再狭窄相关，更体现ＨＯ．１在ＡＳ中的重要作用。最近有国外文献报道，普罗布考可在动物体内外上调ＨＯ．１ｍＲＮＡ的表达，因此我们推测，普罗布考有可能通过诱导ＨＯ．１的产生进而发挥其抗ＡＳ作用。本研究通过建立兔腹主动脉粥样硬化模型，应用锡原卟啉．９抑制体内ＨＯ．１的活性，观察斑块形态、组成及血清氧化、炎性因子的水平，进一步研究普罗布考对斑块进展及稳定性的影响，探讨ＨＯ．１在普罗布考抗动脉粥样硬化作用机制中的地位。

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研究目的

（１）建立兔腹主动脉Ａｓ模型；

《２）研究在Ａｓ发生发展中，口服普罗布考对主动脉壁内Ｈｏ．１表达及活性的影响；（３）通过检测血清中氧化因子、炎症因子的水平，观测斑块的病理形态及组成，探讨普罗布考抗Ａｓ的作用；

（４）探讨ＨＯ．１在普罗布考抗动脉粥样硬化作用中的地位，为ＡＳ的临床防治提供理论和实验依据。

研究对象及方法

高脂饮食加腹主动脉内膜剥脱术建立兔动脉粥样硬化模型后，６０只成模雄性新西兰兔随机分为高脂对照组、锡原卟啉．９（ＳｎＰＰ．ＩＸ，ＨＯ．１抑制剂）组、普罗布考组、普罗布考＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组，每组１５只，持续药物干预１２周，２４周木检测各组血脂，血清中氧化低密度脂蛋白、白介素．１８、基质金属蛋白酶．９和超敏感Ｃ反应蛋白的水平；观测斑块的病理形态及组成；通过免疫组织化学法观察腹动脉组织中ＨＯ．１的表达，实时定量ＲＴ．ＰＣＲ检测ＨＯ．１ｍＲＮＡ的表达，酶法检测ＨＯ活性的变化。

结果

与对照组相比，普罗布考组斑块内ＨＯ．１的表达及活性显著增加，主动脉斑块面积、内一中膜厚度显著减小，斑块纤维帽厚度增加，斑块内巨噬细胞浸润减少，血清中氧化低密度脂蛋白及炎症因子的水平降低（Ｐ均＜０．０１）。使用锡原卟啉．９抑制ＨＯ．１的产生及活性，促进了斑块的进展，增加了血浆中氧化及炎症因子的水平（Ｐ均＜０．０１）。普罗布考干预的同时抑制ＨＯ．１的活性，显著减弱了普罗布考的抗动脉粥硬化作用（各项检测指标普罗布考组ＶＳ．普罗布考＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组．，Ｐ均＜０．０１）。

结论

普罗布考通过诱导ＨＯ．１产生发挥其抗炎、抗氧化作用，从而抑制动脉粥样硬化进展，增加斑块的稳定性。ＨＯ．１可能是普罗布考抗动脉粥样硬化的作用２

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靶点。

关键词普罗布考；血红素加氧酶；动脉粥样硬化

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Ｐｒｏｂｕｃｏｌｐｒｏｔｅｃｔｓａｇａｉｎｓｔａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓｔｈｒｏｕｇｈ

ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１

ＡＢＳＴＲＡＣＴ

ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ

（１）Ｔｏｓｅｔｕｐａｎａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｏｆａｂｄｏｍｉｎａｌａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｐｌａｑｕｅｓ；（２）ＴｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｐｒｏｂｕｃｏｌｏｎＡＳｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｐｌａｑｕｅｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ；（３）Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｐｒｏｂｕｃｏｌｏｎｐｌａｑｕｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎａｎｄｐｌａｓｍｌｅｖｅｌｓｏｆｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎａｌａｎｄｏｘｉｄａｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｓ；

（４）Ｔｏ

ａｓｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｐｏｓｓｉｂｌｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇｐｒｏｂｕｃｏｌ’Ｓｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ＳＯｔｏｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｂａｓｅｓｆｏｒｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇＡＣＳ．

Ｒｅｓｅａｒｃｈｏｂｊｅｅｔｓａｎｄｍｅｔｈｏｄｓ

Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｐｌａｑｕｅｓｗｅｒｅｉｎｄｕｃｅｄｉｎａｏｒｔａｓｏｆ６０ｍａｌｅＮｅｗＺｅａｌａｎｄｒａｂｂｉｔｓｂｙａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃｄｉｅｔｆｏｒ１２ｗｅｅｋｓａｆｔｅｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＷｈｉｔｅｉｎｊｕｒｙ．Ｒａｂｂｉｔｓｗｅｒｅｔｈｅｎｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｉｎｔｏ４ｇｒｏｕｐｓｗｈｉｃｈｒｅｃｅｉｖｅｄ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｎｏｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｐｒｏｂｕｃｏｌ，ＳｎｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎＩＸ（ＳｎＰＰＩｘ），ｏｒｐｒｏｂｕｃｏｌｐｌｕｓＳｎＰＰＩＸｆｏｒ１２ｗｅｅｋｓ．Ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ，

ｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄ．ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ，ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｔｕｄｉｅｓ

Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓ

ＰｒｏｂｕｃｏｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｄｕｃｅｄＨＯ一１ｍＲＮＡ，ｐｒｏｔｅｉｎ，ａｎｄｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎ

ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈａａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｐｌａｑｕｅｓ．Ｔｈｉｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎｗａｓｒｅｄｕｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅ

ｏｆｐｌａｑｕｅｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｌａｑｕｅｓｉｚｅ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｔｈｉｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｅｄｉｎｆｅａｔｕｒｅｓ

ｓｔａｂｉｌｉｔｙｓｕｃｈａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｆｉｂｒｏｕｓｃａｐｔｈｉｃｋｎｅｓｓａｎｄｌｅｓｓｍａｃｒｏｐｈａｇｅｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ．４

Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅＳｅＴＢｍｌｅｖｅｌｓｏｆｏｘｉｄｉｚｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｆａｃｔｏｒｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ一９，ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一１８ａｎｄｈｉｇｈｓｅｎｓｉｔｉｖｅＣ．ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎｗｅｒｅｒｅｍａｒｋａｂｌｙｒｅｄｕｃｅｄｂｙｐｒｏｂｕｃ０１．Ｉｎｃｏｎｔｒａｓｔ，ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＨＯ．１ｂｙＳｎＰＰＩＸａｕｇｍｅｎｔｅｄｐｌａｑｕｅｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｖｕｌｎｅｒａｂｉｌｉｔｙａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｒｏｂｕｃ０１．

Ｃｏｎｅｌｕｓｉｏｎ

ＯｕｒｒｅｓｕｌｔｓｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｔｈａｔｐｒｏｂｕｃｏｌｔｒｅａｔｍｅｎｔｍａｙｉｎｈｉｂｉｔａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｐｌａｑｕｅｓｔａｂｉｌｉｔｙｂｙｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｒｉＯ一１．Ｋｅｖｗｏｒｄｓ√

Ｐｒｏｂｕｃｏｌ；Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ；Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ５

符号说明

缩略语英文名称中文名称ＯＸ．ＬＤＬｏｘｉｄｉｚｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ氧化型低密度脂蛋白ＡＳ

ＨＯ

ＩＬ．１８

ＭＭＰ－９

Ｈｓ．ＣＲＰ

ＩＭＴ

ＴＣ

ＴＧ

ＨＤＬ．Ｃ

ＬＤＬ．ＣａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓＨｅｍｅＯｘｙｇｅｎａｓｅＩｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓｈｉｇｈ．ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙＣ．ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｉｍａ－ｔｏ．ｍｅｄｉａｔｈｉｃｋｎｅｓｓｔｏｔａｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒ０１ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｈｉｇｈ．ｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ动脉粥样硬化血红素加氧酶白介素．１８基质金属蛋白酶．９高敏Ｃ反应蛋白内中膜厚度总胆固醇甘油三酯高密度脂蛋白低密度脂蛋白６

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．▲＾．—ＪＬ

刖吾

近年来心脑血管疾病发病率呈逐渐上升趋势，这与社会经济水平的提高和社会的老龄化同益明显有一定关系。部分专家预测１０年后全球范围内死亡总人数中将有３６％死于心脑血管疾病，心血管疾病将第一次成为首要的致死原因［１１。多种心脑血管疾病的主要病理基础和共同病理过程是动脉粥样硬化（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ａｓ）。既往研究多强调Ａｓ病变所造成管腔的狭窄程度，把治疗重点放在Ａｓ斑块的消退。近年的研究发现，Ａｓ是一个稳定期和不稳定期交替的非线性过程，这一过程取决于斑块的稳定性。稳定斑块可不产生临床症状或仅表现为劳力型心绞痛，而不稳定斑块即易损斑块（ｖｕｌｎｅｒａｂｌｅｐｌａｑｕｅｓ）可导致急性冠脉综合征（ａｃｕｔｅｃｏｒｏｎａｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅｓ，ＡＣＳ）的发生。ＡＣＳ，包括不稳定型心绞痛（ｕｎｓｔａｂｌｅ

ｍｙｏｃａｒｄｉａｌａｎｇｉｎａ，ＵＡ）、急性心肌梗死（ａｃｕｔｅｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ，ＡＭＩ）和心性猝死，主要是由于ＡＳ

易损斑块的破裂、血栓形成造成冠脉急性闭塞所致【２】。研究表明易损斑块具有较薄的纤维帽、较大的脂质核、较多的炎性细胞浸润、较少的胶原和平滑肌细胞含量及新生微血管增加等特点【３１，而斑块足否破裂取决于斑块的内在组织特性和斑块处的机械应力，其中内因起着主导作用。因此，探讨Ａｓ斑块易损性和破裂的分子生物学机制，寻找稳定斑块，预防斑块破裂的措施对于减少急性心脑血管事件的发生具有十分重要的意义。

随着对氧化型低密度脂蛋白（ｏｘｉｄｉｚｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＯＸ—ＬＤＬ）参与ＡＳ形成和发展的学说认识的加深，国内外学者已经将抗氧化剂用于抗ＡＳ的研究。其中普罗布考是ＦＤＡ唯一认证的抗氧化药物，最初以降脂药应用于临床，近几年发现其具有抗氧化、降脂外的其他作用，如改善血管内皮功能、抑制平滑肌细胞增殖等。动物实验及临床研究显示普罗布考具有抗ＡＳ作用【４‘６】，但其具体作用机制尚未完全阐明。

血红素加氧酶（ＨｅｍｅＯｘｙｇｅｎａｓｅ，ＨＯ）系统是血红素氧化的起始酶和限速酶，其主要功能是分解血红素生成胆绿素、一氧化碳和游离铁，胆绿素随后被进一步还原成胆红素，游离铁与转铁蛋白结合。ＨＯ在体内有ＨＯ．１、ＨＯ．２、ＨＯ一３三种同工酶。ＨＯ．１为诱导型，广泛分布于脾脏、肝脏、网状内皮系统和骨髓等组织，能在血管内皮细胞和平滑肌细胞中低水平地表达【７１。现己证实，ＨＯ．１是一种应激

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蛋白，在应激状态下适量表达可以减轻细胞损伤、蛋白质氧化及脂质过氧化。近来的动物实验表明，增ｉＪ［ＩＨＯ．１表达可明显减轻ＡＳ病变程度［８－１０］；临床研究亦发现，人类ＨＯ．１表达水平与冠心病发病和冠脉支架术后再狭窄相判１卜１２１，更体现ＨＯ．１在ＡＳ中的重要作用。最近有国外文献报道，普罗布考可在动物体内外上调ＨＯ．１ｍＲＮＡ的表达【１３。１４１，因此我们推测，普罗布考有可能通过诱导ＨＯ．１的产生进而发挥其抗ＡＳ作用。本研究通过建立兔腹主动脉粥样硬化模型，应用锡原卟啉．９抑制体内ＨＯ．１的活性，观察斑块形态、组成及血清氧化、炎性因子的水平，进一步研究普罗布考对斑块进展及稳定性的影响，探讨ＨＯ．１在普罗布考抗动脉粥样硬化作用机制中的地位。

材料与方法

１材料

１．１实验动物：新西兰大白兔６０只，体重１．６～２．０ｋｇ，由山东省农业科学院提供。单笼、自由饮水，适应性饲养２周后进入实验。

１．２实验仪器

（１）彩色多普勒超声显像仪：ＨＰＳｏｎｏｓ７５００型，荷兰飞利浦公司生产，该机具有Ｍ型超声、二型超声、脉冲多普勒、连续多普勒、彩色多普勒血流显像及声学密度定量分析等功能，高频血管探头频率为４一－－ｉ０ＭＨｚ。该机器备有多种应用软件，可以自动计算流速、压差、面积和容量等多种指标。同时，该机器具有声学密度定量分析系统，其分析能力为每一像素点２５６灰阶，可以定量分析心动周期中血管壁回声强度的变化。

（２）自动脱水机：ＬＥＩＣＡＴＰｌ０２０型，德国Ｌｅｉｃａ公司生产。

（３）石蜡切片机：ＬｅｉｃａＲＭ２２４５型，德［］Ｌｅｉｃａ公司产品。

（４）快速冰冻切片机：ＬｅｉｃａＣＭ１９００型，德国Ｌｅｉｃａ公司产品。

（５）自动染色机：ＬｅｉｃａＳＴ５０ｌＯＸＬ型，德国Ｌｅｉｃａ公司产品。

（６）高速离心机：ＴＧＬ．１６Ｂ型，上海科学仪器厂产品。

（７）低温高速离心机：ＢｉｏｆｕｇｅＳｔｒａｔｏｓ型，德匪Ｉ－Ｋｅｎｄｒｏ公司产品。

（８）烤片机：ＬＥＩＣＡＨＩｌ２２０型，德国Ｌｅｉｅａ公司生产。

（９）滩片机：ＬＥＩＣＡＨＩｌ２１０型，德国Ｌｅｉｅａ公司生产。

（１０）冰台：ＬＥＩＣＡＥＧＩｌ５０型，德国Ｌｅｉｃａ公司生产。

（１１）数字凝胶成像系统：Ｆｌｕｒｏｅｈｅｍ．９９００．５０型，美国ＡＩｐｈａＩｎｎｏｔｅｅｈ公司产品。（１２）电热恒温水浴箱：ＨＳ一４型，太仓市科教器材厂。

（１３）转移电泳槽：ＤＹＺ．４０Ｂ型，北京市六一仪器厂产品。

（１４）电泳槽：ＤＹＣｚ．２４Ｄ型，北京市六一仪器厂产品。

（１５）转移电泳仪：ＤＹＹ．７Ｂ型，北京市六一仪器厂产品。

（１６）恒温循环器：ＷＤ．９４１２Ａ型，北京市六一仪器厂产品。

（１７）实时定量ＰＣＲ仪：ＬｉｇｈｔＣｙｅｌｅｒ２．０，德国ＲｏｃｈｅＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ公司产品。（１８）ＰＣＲ自动扩增仪：Ｅｐｐｅｄｏｒｆ５３３２型，德国Ｅｐｐｅｄｏｒｆ公司产品。

（１９）光学显微镜：ＯｌｙｍｐｕｓＢＸ－５１型，日本Ｏｌｙｍｐｕｓ公司产品，

（２０）超净工作台：ＨＦｌ２００型，上海力申科学仪器有限公司。

（２１）电热压力蒸汽消毒器：山东新华医疗器械股份有限公司出品。

（２２）ＹＸＱＧ０２型电热式蒸汽消毒器：山东新华医疗器械厂产。

（２３）自动双重纯水蒸馏器：ＳＺ９３型，上海亚荣生化仪器厂产。

（２４）超低温冰箱：ＭＤＦ．ＵＳＯＶ型，同本ＳＡＮＹＯ公司产品。

（２５）冰箱：ＫＧｌ９Ｖ２１型，德国Ｓｉｅｍｅｎｓ公司产品。

（２６）超声波清洗器：ＴＣＱ２５０型，北京医疗设备二厂产。

（２７）病理图像分析系统：ＪＤＳ０１系列形态学分析软件，江苏省捷达科技发展有限公司产品。

（２８）电子天平：ＭＰ２００Ａ型，上海精科仪器厂产品。

以上仪器和设备由教育部和卫生部心血管病重构与功能研究重点实验室提供。（２９）全自动生化分析仪：７１７０型，日本日立公司产品，山东大学齐鲁医院中心实验室提供。

１．３主要试剂、液体及配制

（１）胆固醇：熔点１４７’１５０℃，河南省平顶山市东珠生物制品有限公司产品。（２）Ｈｅｍｉｎ：购于美Ｉ雪Ｓｉｇｍａ公司，配制：称取一定量，用０．２ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ溶解，用１ｍｏｌ／Ｌ的ＨＣｌ凋ｐＨ值至７．４。

（３）ＳｎＰＰ：购于美国Ｓｉｇｍａ公司，配制：称取一定量，用０．２ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ避光溶解，加３倍体积的生理盐水，用Ｉｍｏｌ／ＬＨＣｌ调ｐＨ值至７．４—８．０，用生理盐水稀释使终浓度为１０

ｍｍｏｌ／Ｌａ

（４）羊抗鼠ＨＯ．１多克隆抗体：美国，ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司。

（５）ＲＡＭＩＩ单克隆抗体：美国，ＬａｂＶｉｓｉｏｎ公司。

（６）辣根过氧化物酶标记的山羊抗小

司。ＩｇＧ：购白北京中杉盒桥生物技术有限公

（７）辣裉过氧化物酶标记的兔抗山羊ＩｇＧ：购自北京中杉金桥生物技术有限公司。（８）浓缩型ＤＡＢ试剂盒：购自北京中杉会桥生物技术有限公司。

（９）ＯＸ．ＬＤＬ、ＩＬ－１８、ＭＭＰ一９、ｈｓ—ＣＲＰＥＬＩＳＡ试剂盒：购自ＢＰＢＢｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ公司。（１０）ＲＮＡ提取液：美国，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司。

（１１）Ｍ—ＭＬＶ逆转录酶体系：美国，Ｐｒｏｍｅｇａ公司。

（１２）实时定量ＰＣＲ试剂盒：内含ＤＮＡ聚合酶、反应用Ｂｕｆｆｅｒ、ｄＮＴＰ、ＳＹＢＲ等试剂，大连宝生物有限公司。ＧＲＥＥＮＩ

２方法

２．１兔动脉粥样硬化模型的建立及药物干预

６０只新西兰兔饲养观察２周后，给喂高脂饲料（１％胆固醇，５％猪油，

１２０＂－－－１４０∥ｄ），２周后行腹主动脉内膜球囊损伤术。戊巴比妥钠（３％，３０ｍｅｇｋｇ）麻醉动物后，穿刺右股动脉，沿Ｏ．０１４导丝将内径３．５ｍｉｌｌ、长１５ｒｎｎｌ的球囊导管送入腹主动脉约２０ｃｎｌ，８个大气压充盈球囊并缓慢回拉球囊平切口处，反复回拉３次，以造成腹主动脉内膜损伤。术后继续高脂饲料喂养，１２周后进行分组给药，即将动物随机分为４组，每组１５只：高脂对照组、卟啉锡（ＳｎＰＰ．ＩＸ，ＨＯ．１抑制剂）组、普罗布考组、普罗布考＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组。继续喂养高脂饲料，ＳｎＰＰ．ＩＸ组及普罗布考＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组分别经腹腔注射ＳｎＰＰ．ＩＸ７．５ｍ眺昏隔日１次，高脂对照组和普罗布考组腹腔注射等体积生理盐水。普罗布考组、普罗布考＋ＳｎＰＰ—ＩＸ组给予普罗布考５００ｍｇ／ｋｇ－１・ｄ。１口服，高脂对照组、ＳｎＰＰ—ＩＸ组经饮水给予淀粉５００ｒａｇ／ｋｇ－１・ｄ～。持续药物干预１２周。

２．２血液生化检查

第２６周木空腹抽取实验兔耳中动脉血液测量血清总胆固醇（Ｔｃ）与甘油三酯《ＴＧ），测定采用酶动力学法ｊ高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ—Ｃ）测定采用免疫比浊法；低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ—ｃ）测定按Ｆｒｉｅｄｗａｌｄ公式计算：ＬＤＬ—Ｃ＝（ＴＣ．ＨＤＬ，Ｃ．ＴＧ／２．

２）．酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法检测血清中氧化低密度脂蛋白（ＯＸ．ＬＤＬ）、白介素．１８（ＩＬ．１８）、基质金属蛋白酶．９（ＭＭＰ．９）和超敏感Ｃ反应蛋白（ｈｓ．ＣＲＰ）的水平。抽取兔耳缘静脉血２ｍＬ，将血清分装－于Ｅｐｐｅｎｄｏ艚中，于－８０。Ｃ冰箱中冻存，按ＥＬＩＳＡ试剂盒说明进行测定。取样品血浆５０ｐｌ，按１：１００稀释待测。将标准血清稀释为５０、２５、１２．５、６．２５９９／ｄｌ。然后将待测样品和系列标准１００１ａＬ加入酶标板，３７＂Ｃ保温１小时，取出反应板，弃去孔内反应液。除空白孔外，每孔加入酶结合物ｌＯＯｐＬ，３７＊（２保温ｌ小时，洗板５次拍干。每孔加底物１００９Ｌ，３７℃孵育１５ｍｉｎ显色，每孔加终止液终止反应。用酶标仪在４５０ｎｍ处测定。

２．３组织病理学检测

分离动物腹主动脉，取基因转染段血管置于４％多聚甲醛固定２４小时后，分别制成４¨ｍ厚的石蜡切片及６¨ｍ厚的冰冻切片，给予苏木素一伊红（ＨＥ）、油红Ｏ和天狼猩红染色及免疫组织化学检测。

２．３．１动脉组织ＨＥ染色

（１）常规脱蜡至水：

二甲苯ｌ２０ｍｉｎ；

ｒａ‘ｍ；二甲苯¨２０

无水乙醇１０ｒａ’ｍ；

无水乙醇ｌＯｍｉｎ；

９５％乙醇１０

７５％乙醇１０

５０％乙醇１０ｒａ‘ｍ；ｒａｉｎ；ｍ‘ｍ；

（２）蒸馏水冲洗５ｍｉｎ×２次；

（３）苏木素染色１０

（４）水洗３０ｓｅｃ；

（５）１％盐酸酒精分化１５．－．一３０ｓ；

（６）流水冲洗５ｍｉｎ；

ｓｅｃ；ｍｉｎ；（７）Ｉ％氨水返蓝３０

（８）自来水冲洗５

（９）伊红染色２ｍｉｎ；ｍｉｎ；

（１０）流水冲洗３０ｓｅｃ；

（１１）７５％酒精、８５％酒精、９０％酒精、９５％酒精脱水数秒ｊ

（１２）无水乙醇Ｉ、ＩＩ脱水各５ｍｉｎ；

（１３）二甲苯Ｉ、Ｉｌ透明各２ｍｉｎ；

（１４）中性树胶封片。

２．３．２油红０染色

（１）冰冻切片室温干燥２０ｍｉｎ；

（２）油红０染液中１０ｍｉｎ；

（３）温水冲洗至背景透明为止；

（４）Ｈａｒｒｉｓ苏木素３ｒａｉｎ，水洗３０ｓｅｃ；

（５）ｌ％盐酸酒精分化１０ｓｅｃ；

（６）流水沈５ｍｉｎ；

（７）甘油明胶封片。

２．３．３苦昧酸天狼星红染色

（１）常规脱蜡至水：

二甲苯Ｉ２０ｍｉｎ；

二甲苯ＪＩ２０ｍ。ｌｎ；

无水乙醇１０ｍ‘ｌｎ；

无水乙醇ｌＯｍｉｎ；

９５％乙醇１０ｍ。ｌｎ；

７５％乙醇１０ｍ’ｌｎ；

５０％乙醇１０ｍ‘ｌｎ；

（２）蒸馏水冲洗５ｍｉｎＸ２次；

（３）Ｏ．１％天狼星红饱和苦味酸染液染９０ｒａｉｎ；

（４）１％盐酸酒精分化１５．－－－一３０ｓ；

《５）７５％酒精、８５％酒精、９０％酒精、９５％酒精脱水数秒；

（６）二甲苯透明：

二甲苯ＩＩ５ｍｉｎ：

二甲苯Ｉ５ｍｉｎ；

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（７）中性树胶封片。

（８）结果分析：

普通光镜下观察，胶原纤维呈红色，其他部分呈黄色。偏振光显微镜下观察，Ｉ型胶原纤维呈红色或橙色，排列紧密，具强双折光性，川型胶原纤维为黄色或绿色的细纤维，具弱双折光性。

２．３．４免疫组织化学检测

（１）石蜡切片常规脱蜡至水化；

（２）微波抗原修复处理：修复液是ＰＨ６．０的０．０１ｍｍｏｌ／Ｌ枸橼酸盐缓冲液，９２－－一９８℃，１０－－一１５ｍｉｎ：

（３）冷却至室温后，ＰＢＳ冲洗５ｍｉｎｘ３次；

（４）３％Ｈ２０２室温孵育１０ｍｉｎ，以消除内源性过氧化物酶的活性；

（５）ＰＢ５冲洗５ｍｉｎｘ３次；

（６）滴加封闭用正常山羊血清工作液，室温孵育２０ｍｉｎ，倾去，勿洗；

（７）滴加适当比例稀释的一抗工作液（ＨＯ一１抗体１：１００，ＲＡＭｌｌ抗体１：４００），４ｏＣ过夜；

（８）ＰＢＳ冲洗５ｍｉｎｘ３次；

（９）辣根过氧化物酶标记的二抗室温３０ｒａｉｎ；

（１０）ＤＡＢ显色，阳性表达呈棕黄色。

２．３．５分析

采用Ｉｍａｇｅ．ＰｒｏＰｌｕｓ５．０图像分析软件分别测量腹主动脉内中膜厚度（ｉｎｔｉｍａ．ｔｏ—ｍｅｄｉａｔｈｉｃｋｎｅｓｓ，ＩＭＴ）、斑块纤维帽厚度、斑块内阳性染色面积及阳性染色面积占内膜面积的比例。每个样本取４～５张切片的平均值。

２．４主动脉ＨＯ活性测定

取腹主动脉组织，置于预冷中性磷酸盐缓冲液中，冰浴中匀浆，１５０００×ｇ离心２０ｍｉｎ，以沉淀线粒体，然后取上清液，１０００００×ｇ离一１二，６０ｍｉｎ以分离微粒体组分。取ｏ．５ｍｇ微粒体，加入ｏ．４ｍｌ的反应混合液（含２ｍｇ大鼠肝细胞，０．８ｍｍｏｌ／ＬＮＡＤＰ，２ｍｍｏｌ／Ｌ６一磷酸葡萄糖和０．２ｕ６．磷酸葡萄糖脱氢酶，２０ｍｍｏｌ／Ｌ血红素），在３７℃富含氧的水浴箱中避光孵育１小时后，ＮＡ５０ｕｌ１０％ＨｇＣｌ２终止反应。在４６４－－。５３０ｎｍ用双波长紫外分光光度计测定所生成的胆红素量Ｈ肖光系数为４０

ｍｍｏｌ／（Ｌ．ｃｍ）】，并以此代表Ｈ０的活性。

２．ｓ斑块内ＨＯ．１的表达，采用实时定量ＰＣＲ检测

２．５．１组织，营，ＲＮＡ的提取

（１）冰上称取５０ｍｇ血管组织，加入Ｉ

浆，用枪头吹打均匀；

（２）将组织匀浆转移到无Ｒｎａｓｅ的１．５ｍＩｍｌＴｒｉｚｏｌ，用玻璃匀浆器在冰上将组织制成匀ＥＰ管中，室温放置５

ｍｉｎ：ｍｉｎ；（３）力ＨＡ２００ｐｌ氯仿，充分振荡３０ｓｅｃ，室温放置２～３

（４）４℃，１２０００ｒｐｍ，离心１５ｒａｉｎ。

（５）吸取上清液（约０．５ｍＯ转移到另一无ＲＮａｓｅ的１．５ｍｌＥＰ管中，加入等体积的异丙醇，室温放置１０ｍｉｎ；

（６）４℃，１２０００ｒｐｍ，离心１０ｍｉｎ；

（７）倒掉上清液，用无水乙醇冲洗：

（８）４℃，１２０００ｒｐｍ，离心１５ｍｉｎｉ

ｐｌ（９）弃上清，室温下干燥１０ｍｉｎ使酒精挥发，加入２０

（１０）ＲＮＡ样品鉴定：

ａ．ＲＮＡ的浓度测定：取ＩｐｌＤＥＰＣ・Ｈ２０溶解ＲＮＡ；ＲＮＡ溶液在紫外分光光度计测出Ａ２６０及Ａ２８０的值，计算所提。营，ＲＮＡ的含量，重复测定３次，所有试验样品要求Ａ２６０与Ａ２８０的比值在１．７～２．０，以保证提取的ＲＮＡ的纯度。

ｂ．ＲＮＡ质量鉴定：配置１％凝胶，取ＩｐｌＲＮＡ溶液进行电泳观察，电泳后显现条带，分别为２８Ｓ，１８Ｓ，５Ｓ亚基，以前两者为主，说明提取的ＲＮＡ质量稳定。

２．５．２目的基因的引物

所有引物均参照Ｇｅｎｅｂａｎｋ提供的序列，用Ｐｒｉｍｅｒ５．０合成，由上海生物工程公司合成，ＨＯ．１的引物序列：上游５７．ＴＧＧＡＧＣＴＧＧＡＣＡＴＧＧＣＣＴＴＣ．３７，下游５’．ＴＣＴＧＧＧＣＧＡＴｃＴＴｃＴＴＡＡＧＧ．３

ＧＧＡＡＡＣＴＣＡＣ．３７；ＧＡＰＤＨ的引物序列：上游５７．ＧＡＧＣＴＧＡＡｃＧ７。７，下游５７．ＧＧＴＣＴＧＧＧＡＴＧＧＡＡＡＣＴＧＴＧ．３

２．５．３逆转录（ＲＴ）反应：

反应体系：

ＡｇｅｎｔＶｏｌｕｍｅ

１¨Ｉ

１ｐｌＯｌｉｇｏ（ｄＴ）ｄＮＴＰ

ＤＥＰＣ—Ｈ２０

Ｍ—ＭＬＶ１０ｉｌｌ１¨Ｉ

３ｇｌ

４Ｉａｌ

２０ＵＩ样本ＲＮＡ５ｘＲＴＢｕｆｆｅｒＴｏｔａｌＶｏｌｕｍｅ

２．５．４实时ＰＣＲ反应体系

ＡｇｅｎｔＶｏｌｕｍｅ

１０“Ｉ

５．６ＵＩＳｙｂｒｄｄＨ２０

上游引物

下游引物

ｃＤＮＡ１．２ｕＩ１．２ｕｌ２１１１

２０ｌＪｌＴｏｔａｌＶｏｌｕｍｅ

２．５．５定量分析

实时ＰＣＲ的结果以阈循环数（ｃｔ值）的形式给出，其定义为扩增曲线与荧光本底基线的交叉点（Ｃｒｏｓｓｐｏｉｎｔ，Ｃｐ）处相应的反应循环数。本实验采用标准曲线相对定量的方法。根据标准曲线和被测标本的ｃｔ值，计算出每一标本中靶基因及内参照基因ＧＡＰＤＨ的拷贝数（ＮＴ／ｒｅａｃｔｉｏｎ）。目的基因的ＮＴ值与内参基因的ＮＴ值比较即得至ｌＪｒａｔｉｏ，ｒａｔｉｏ且，［Ｊ代表目的基因ｍＲＮＡ的数量．

２．６统计学处理

采用ＳＰＳＳ１１．５统计软件包进行数据分析。计量资料数据以ｘ±ｓ表示，组间两两比较采用ｔ检验，多组间比较用ｏｎｅｗａｙＡＮＯＶＡ方差分析，方差齐性者两两比较采用ＬＳＤ法，方差不齐者采用Ｄｕｎｎｅｔ’ＳＴ３检验。Ｐ＜Ｏ．０５为差异有统计学意义。

结

１动物的意外死亡情况果

整个实验过程中家兔意外死亡３只，其中除对照组外，其他三组各死亡１只，

分别死于麻醉意外、，Ｉｉ，肌梗死和尿潴留，对照组１５只全部存活。最终完成实验的共５７只。

２血脂水平的变化

第２６周末，普罗布考组和普罗布考＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组血清总胆固醇（ｔｏｔａｌ

ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＴＣ），高密度脂蛋白胆固醇（ｈｉｇｈ—ｄｅｎｓｉｔｙ

ＨＤＬ．Ｃ）及低密度脂蛋白胆固醇（１０ｗｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＬＤＬ．Ｃ）水平较对照组明显降低（Ｐ均＜Ｏ．０１）；普罗布考组和普罗向考＋ＳｎＰＰ—ＩＸ组间无显著差异；普罗布考对ＴＧ无明显影响。各组兔的体重在实验过程中差异无显著性。（表１）

３各组兔ＯＸ．ＬＤＬ与血清炎性因子检测结果比较，见表２

与对照组相比，普罗布考组血清中ＯＸ．ＬＤＬ、ＩＬ．１８、ＭＭＰ．９弄ｉｌｈｓ—ＣＲＰ的水平显著降低（尸均＜Ｏ．０１）。而卟啉锡组血清中上述四种指标的水平显著高于对照组（Ｐ均＜Ｏ．０１）。普罗布考＋ＳｎＰＰ—ＩＸ组血清中上述四种指标的水平显著高于普罗布考组（Ｐ均＜Ｏ．０１），而与卟啉锡组间无显著差异。

４ＨＯ．１在兔腹主动脉粥样斑块中的表达及活性，见表３，图１

与对照组相比，普罗布考组兔斑块内ＨＯ．１ｍＲＮＡ及蛋白的表达量明显增高，ＨＯ．１的活性增强（Ｐ均＜０．０１）。相反，锡原卟啉显著降低了斑块内ＨＯ．１ｍＲＮＡ（尸＜０．０５）、蛋白（Ｐ＜０．０１）的表达量及活性（Ｐ＜Ｏ．０１）。石蜡切片免疫组化染色显示ＨＯ．１蛋白主要表达于腹主动脉斑块内的巨噬细胞，并少量表达于内皮细胞及中膜平滑肌细胞。

５各组兔主动脉斑块病理形态学变化，见图２。

对照组、普罗布考组、卟啉锡组、普罗布考＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组斑块面积占整个内膜面积的百分比分别为５２．９７士１０．２４％，２９．６２士８．４８％，７３．９４士１１．４８％，７８．００－Ｊ：１３．９１％，三个干预组与对照组相比差异均具有显著性（尸均＜Ｏ．０１），普

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罗布考＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组斑块面积显著高于普罗布考组（Ｐ＜０．０１），卟啉锡组与普罗布考＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组间差异无显著性。

与对照组相比，普罗布考组腹主动脉内．中膜厚度显著减小［（５０３＋８２）岬比（８２６士１０４）１．ｔｍ，Ｐ＜０．０１）】，纤维帽厚度显著增力Ｈ［（２０８士３２）１．ｔｍＬ匕（１３５士１８）１．ｔｍ，Ｐ＜０．０１）】，而锡原卟啉干预显著降低了纤维帽的厚度，增加了ＩＭＴ测值［分别为（１０２＋１５）１．ｔｍ比（１３５士１８）ｇｍ，（９８９ｉｌｌ７）ｌａｍｂＬ（８２６＋１０４）１．ｔｍ，Ｐ均＜Ｏ．０１］。普罗布考－ｔ－ＳｎＰＰ．ＩＸ组腹主动脉内．中膜厚度及纤维帽的厚度与卟啉锡组相比，差异无显著性［分别为（９６士１７）ｌａｍＬｔ（１０２士１５）１．ｔｍ，（９６３ａ：１０２）１．ｔｍｋＬ（９８９士１１７）Ｉ．ｔｍ，Ｐ均＞Ｏ．０５］。

６各组兔腹主动脉斑块中巨噬细胞含量的比较，见图３。

与对照组相比，普罗布考组兔斑块内巨噬细胞的含量显著降低［（１０．７１士３．３２）％比（２０．９２１５．０５）％，Ｐ＜０．０１）】，而卟啉锡组斑块含有较多的巨噬细胞［（３１．４２士５．７２）％比（２０．９２士５．０５）％，Ｐ＜Ｏ．０１）】。普罗布考＋ＳｎＰＰ．Ｉｘ组的巨噬细胞含量与卟啉锡组相比无显著差异［（３３．９０士４．８５）％ｋＬ（３１．４２士５．７２）％，尸＞０．０５）］

讨论

１易损斑块的特征

动脉粥样硬化是一种慢性、进行性的内皮损伤和炎症反应引起的血管内膜病变，是成年人致死致残的主要原因之一。斑块通常由脂质核心和纤维帽组成，脂质池包括富含脂质的泡沫细胞、退化的血液成分、坏死组织碎片和胆固醇结晶等。纤维帽覆盖在脂质核的表面，主要由胶原细胞和细胞外基质组成。传统观点认为，Ａｓ是一个进行性的线性发展过程，血管平滑肌细胞大量增殖及脂质的沉积，导致管腔狭窄甚至闭塞，最终导致急性心脑血管事件的发生，因此人们多关注能够引起血流动力学障碍的病变，即大于７５％狭窄程度的斑块，治疗的目标也集中在斑块的消退上。但近年来的研究发现，ＡＣＳ多发生于冠脉轻～中度狭窄的患者，急性心肌梗死前近期冠脉造影的研究表明，６５％的患者冠脉内径狭窄＜５０％，８５％的患者冠脉内径狭窄＜７０％，提示管腔狭窄的严重程度并非引起急性心血管事件的最主要因素。】７

１９１２年，Ｈｅｒｒｉｅｋ等首次提出急性心肌梗死（ＡＭＩ）是血栓形成引起冠脉狭窄闭塞和心肌缺血坏死所致【１５】。１９６６年，Ｃｏｎｓｔａｔｉｎｉｄｅｓ等研究发现冠脉血栓是在斑块破裂的基础上形成的【１６】。随后，Ｄａｖｉｅｓ对ＡＭＩ、不稳定型心绞痛和猝死的大样本人群的研究，进一步证实ＴＡＣＳ是由于斑块破裂、血栓形成造成冠脉闭塞所致［１７】。１９９５年，美国心脏病协会（ＡＨＡ）根据ＡＳ病变的严重性将其组织形态学变化分为６种类型，其中Ⅳ型为斑块出现了脂质核心，但没有厚的纤维帽；Ｖ型是在有较大脂质核心上出现了纤维帽；当Ⅳ型和Ｖ型出现继发性病理改变时为Ⅵ型。Ⅵ为复合病变，分为三个亚型：Ｖｉａ为斑块表面破裂或溃疡，Ⅵｂ为斑块内血肿或出血，ＶＩｃ为血栓形成。从Ⅳ型起病变不可逆转，从Ｖ型开始动脉管腔出现明显狭窄，斑块容易破裂、出血和形成血栓等。Ⅵ型可以很快出现管腔闭塞，也可以纤维化至Ｖ型使斑块厚度及硬度增加，因此有重要临床意义，称为“易损斑块”。２００３年发表的一份由全球５０余位专家参与的国际共识性文件【１８】将易损斑块定义为所有具有破裂倾向、易于发生血栓形成，可能快速进展成为罪犯病变的粥样病变，并提出了易损斑块的组织病理学标准，即主要标准：（１）活动性炎症（单核细胞／巨噬细胞／Ｔ淋巴细胞浸润）；（２）大的脂质核、纤维帽薄；（３）内皮剥脱，表面血小板聚集；（４）斑块裂隙；（５）狭窄程度＞９０％。次要标准：（１）表浅钙化小结节；（２）斑块呈浅黄色；（３）斑块内出血；（４）内皮功能障碍；（５）血管正性重构。

大量研究表明【１９，２０】易损斑块有以下特征：（１）较大的脂核；（２）较薄的纤维帽；（３）细胞外基质胶原含量少；（４）局部炎性细胞浸润明显；（５）巨噬细胞、Ｔ淋巴细胞、肥大细胞数量及活性增强；（６）平滑肌细胞数量减少；（７）新生微血管增加；（８）炎症标志物表达增加；（１０）基质金属蛋白酶表达；（ｉｉ）严重的内皮功能不全；（１２）较强的凝血功能等。

Ｉ．Ｉ脂质核心的增大

粥样硬化斑块中的脂核是由游离胆固醇、胆固醇结晶和脂化胆固醇组成，这些脂质是由循环中的脂质浸润动脉壁和来自死亡泡沫细胞的脂质《主要来自巨噬细胞，少量来自平滑肌细胞），通过细胞凋亡和坏死产生。ＧｅｒｔｚａｎｄＲｏｂｅｒｔｓ［２１１证明较大的脂质核心的斑块容易发生破裂。Ｄａｖｉｅｓ等【２２’已经证明，如果脂核占据斑块容量的３０～４０％或以上，由于圆周径应力作用于斑块肩部，使斑块更易破裂，而且由于脂质核心内部有大量的组织因子表达所以此类斑块极容易诱发血栓形成。

１．２斑块炎症

在动脉粥样硬化病变发生发展过程中，从脂质条纹到纤维斑块和粥样斑块，始终都有各种炎症细胞和大量的炎症介质参与。炎症反应在不稳定斑块的发生和血栓形成过程中也起着至关重要的作用。通过对ＡＣＳ病人的尸检中发现，冠脉斑块中存在泡沫细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和肥大细胞，其中巨噬细胞和淋巴细胞是破裂斑块中细胞的主要成分。斑块的纤维帽中侵入的巨噬细胞越多，斑块就越脆弱。在斑块破裂过程中，炎症细胞表达细胞因子：白细胞介素－ｌ、白细胞介素．６、白细胞介素一Ｓ（ＩＬ．１、ＩＬ一６、ＩＬ．８）、肿瘤坏死因子ａ（ＴＮＦ．ａ）及细胞黏附分子如细胞问黏附分子．１（ＩＣＡＭ．１）、血管细胞黏附分子一１（ＶＣＡＭ一１）、Ｐ选择素、Ｅ选择素、单核细胞趋化蛋白一１（ＭＣＰ一１）等。炎症细胞通过炎症因子的作用，最终激活血小板，诱导单核细胞和内皮细胞及激活的ＣＤ４０Ｌ—ＣＤ４０系统表达组织因子，激活凝血反应，影响一氧化氮的产生而致冠脉痉挛，促使斑块破裂，并使血小板聚集，凝血系统激活，破裂处血栓形成，最后导致ＡＣＳ的发生。研究发现‘２３１ＡＣＳ患者血中Ｔ细胞、巨噬细胞大量活化增殖、可溶性ＣＤ４０Ｌ及ＣＲＰ、ＩＬ一６等炎性介质浓度升高，且均与ＡＣＳ患者猝死或心肌梗死的危险增加有密切关系，同时也是其预后和再发的强烈预测指标。最近的研究ｆ２４】发现：全身性感染能够使Ａｓ患者冠脉的局部炎症反应加强，诱导ＡＣＳ急性炎症反应。

１．３ＬＤＬ与ｏｘＬＤＬ的作用

血管壁内膜层中过多胆固醇沉积是形成不稳定斑块过程的关键因素。在ＡＣＳ病人中可观察到细胞外脂质在血管壁上沉积。但体外研究发现，天然ＬＤＬ本身不能起诱发动脉粥样硬化的角色。“氧化假说＂认为：在粥样斑块处血管细胞产生过量活性氧簇（ＲＯＳ），包括超氧负离子（０２。）、过氧化氢（Ｈ２０２）、过亚硝酸盐（ＯＮ００－）等。高胆固醇血症的过量ＬＤＬ在血管壁被氧化修饰成氧化型低密度脂蛋白（ＯＸ—ＬＤＬ）。ＯＸ．ＬＤＬ致动脉粥样硬化的机制：

①泡沫细胞形成的关键泡沫细胞的形成是动脉粥样硬化进程中最重要的病理学标志。ＯＸ．ＬＤＬ可以通过ｓＲ．ＡＩ被巨噬细胞无限制的摄取，导致巨噬细胞内大量的胆固醇脂质颗粒蓄积，最后形成泡沫细胞。

②促进细胞黏附并向内皮下趋化单核细胞对动脉内皮黏附的增多是动脉粥样硬化早期表现之一。ＯＸ．ＬＤＬ可以通过剌激多种黏附分子的表达，使单核细胞、中性

粒细胞和淋巴细胞黏附于内皮细胞。同时，在ＯＸ．ＬＤＬ的作用下，内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞可以分泌特定趋化因子，促进单核细胞向内皮下趋化。

③加剧动脉粥样硬化的炎症反应ＯＸ．ＬＤＬ可以刺激巨噬细胞分泌产生一种特定的巨噬细胞集落刺激因子并介导巨噬细胞的激活、分泌、增殖、聚集、退化。ＯＸ．ＬＤＬ可以刺激ＴＮＦ．Ｑ、ＩＬ．１、ＩＬ．８、ＮＦ．ＫＢ等炎性因子表达，加剧动脉粥样硬化的炎症反应。

④损伤内皮细胞ＬＤＬ氧化过程中产生的脂质过氧化物可以直接损伤内皮细胞，使内皮细胞对ＬＤＬ的通透性增高，胞浆发生空泡变性，浆膜皱缩，甚至可使细胞最终坏死。

⑤诱导平滑肌细胞增生、移行ＯＸ．ＬＤＬ诱导巨噬细胞和平滑肌细胞产生血小板源生长因子（ＰＤＧＦ），促进平滑肌细胞移行。通过诱导内皮细胞产生碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）、表皮生长因子（ＥＧＦ）、内皮素一１《ＥＴ．１），促进平滑肌细胞从内膜基底部移行入内膜层，最终导致内膜增厚。

⑥促进血小板黏附、聚集、血栓形成ＯＸ．ＬＤＬ可刺激组织因子（ＴＦ）、ＰＤＧＦ、促凝因子．１（ＰＡＩ．１）等因子的表达，抑制前列腺素１２（ＰＧｌ２）合成酶，使ＰＧｌ２合成减少；激活血小板环氧化酶，使血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）产生增加，促进血小板黏附、聚集、血栓形成。

１．４细胞外基质合成减少及降解增强

易损斑块的破裂是由于基质降解增加或基质合成减少二者失衡引起。基质分解增加是由于金属蛋白酶（ｍｅｔａ¨ｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ，ＭＭＰｓ）及其抑制因子金属蛋白酶组织抑制因子（ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ，ＴＩＭＰｓ）水平失衡导致ＭＭＰｓ增加了对基质的降解。ＭＭＰｓ通过炎性细胞（巨噬细胞、泡沫细胞、少量平滑肌细胞、内皮细胞）在粥样硬化斑块中表达，其活性在基因复制水平上调节，同时和ＴＩＭＰ共分泌。所以增加基因复制或提高ＭＭＰｓ的活性或减Ｉ＇Ｌ毛ＴＩＭＰｓ的活性能增加基质的分解。生理状态下平滑肌细胞表达ＴＩＭＰｓ及ＭＭＰ２，两者以无活性的复合物形式存在。动脉粥样硬化时，炎细胞因子、血流动力学、氧化应激、凝血酶、衣原体热休克蛋白等诱发Ｔ细胞币１］ＣＤ２４相互作用，促进巨细胞脱颗粒产生ＭＭＰｓ。

细胞外基质主要由血小板生长因子（ＰＤＧＦ）以及转移生长因子（ＴＧＦ）．Ｂ等刺激２０

平滑肌细胞产型２５｜，减低平滑肌细胞合成功能或减少平滑肌细胞的数量，都影响纤维帽的厚度和强度，削弱斑块抗破裂的能力。斑块内细胞因子和生长因子对细胞外基质合成起调控作用。ＴＧＦ．Ｄ刺激胶原合成，而干扰素ｙ抑制细胞外基质生成；活化的Ｔ淋巴细胞可通过增加ＩＬ－ＩＢ转移酶使干扰素ｙ增多，抑制平滑肌细胞增殖，促使其凋亡并抑制平滑肌细胞合成胶原。

２．普罗布考抗动脉粥样硬化的作用及机制研究进展

２．１普罗布考抗动脉粥样硬化的作用

普罗布考（ｐｒｏｂｕｃｏ，丙丁酚）化学名４，４’．［（１一甲基亚乙基）二双】２，６一－－（１，１．二甲基乙基）苯酚，于１９７７年首先在美国上市，最初以降脂药物应用于临床，主要降低血清胆固醇。近几年对其药理作用的认识不断深入，发现其有抗氧化、抗动脉硬化的作用，能够降低氧化低密度脂蛋白水平，预防和延缓动脉硬化的发生和发展，同时还具有抗经皮冠状动脉介入术后再狭窄、预防心血管事件等作用。其中抗动脉粥样硬化的作用己在许多实验中得到证实：研究者…】将１６只家兔喂养高胆固醇饮食，８Ｎ后，随机平均分为两组：１）高胆固醇组：维持高胆固醇饮食；２）普罗布考组，同样饮食加普罗布考６周。对照组喂养普通饲料１４周。结果显示高胆固醇组，主动脉有动脉粥样硬化病变，内膜厚度明显增加，与高胆固醇组相比，普罗布考组显著降低了病变面积及内膜厚度。贾伟华等［２６】将７５例确诊颈动脉粥样硬化斑块的患者双盲随机分为实验组（ｎ＝３８）和对照组（ｎ＝３７），对照组行常规治疗，实验组在常规治疗的基础上加用普罗布考，治疗４个月后实验组低回声斑块声学密度的背向散射积分值（ＩＢＳ）比较治疗前显著升高（Ｐ＜０．０５），也显著高于对照组（Ｐ＜Ｏ．０５）。本研究发现普罗布考干预减少了斑块面积，降低了斑块内．中膜厚度，增加了斑块纤维帽厚度，减少了斑块内巨噬细胞含量，表明普罗布考不仅能抑制斑块进展，并能增加斑块稳定性。为普罗布考的临床应用提供了有利的实验依据。

２．２普罗布考抗动脉粥样硬化的作用机制研究进展

２．２．１抗氧化应激作用

大量动物实验及临床研究表明，氧化应激是导致心血管结构和功能异常的重要原因之一，是ＡＳ发生发展的中心环节。普罗布考通过强大的抗氧化作用对抗氧化应激对脂质成分的过氧化作用，抑制各种氧化脂质，尤其是ＯＸ．ＬＤＬ的产生，

从而抑制巨噬细胞摄取ＯＸ．ＬＤＬ，显著对抗ＯＸ．ＬＤＬ对血管平滑肌细胞表达小凹蛋白ｌ的抑制作用，使细胞内胆固醇流出显著增加，维持细胞胆固醇平衡，逆转ＯＸ—ＬＤＬ对亲环素Ａ表达的下调作用，改善细胞内的胆固醇蓄积，延缓了ＯＸ—ＬＤＬ介导的细胞核脂化过程，抑制泡沫细胞的形成，同时普罗布考可抑制各种氧化脂质对循坏的单核细胞的趋化作用，对血管内皮组织、平滑肌细胞等较强的细胞毒性作用。本实验中普罗布考干预组血清中ＯＸ．ＬＤＬ水平较对照组明显降低，进一步证明普罗布考具有抗氧化特性。［２７－３０】

２．２．２抗炎症作用

ＡＳ是一个慢性的炎症过程，其典型的标志物高敏Ｃ反应蛋白能独立预测冠状动脉性心脏病患者心脏事件的发生。普罗布考可抑制ＴＮＦ．０【、白细胞介素１等炎性因子的表达，阻断了ＣＲＰ形成的部分途径，抑制动脉粥样硬化的发展，稳定粥样斑块【３ｌ】。本研究中，与对照组相比，普罗布考组血清中ＩＬ．１８、ＭＭＰ．９币０ｈｓ—ＣＲＰ的水平显著降低，提示普罗布考可通过其抗炎作用来抑制ＡＳ的进展。

２．２．３改善内皮的功能

内皮功能受损不但是ＡＳ发生的始动环节，也是临床ＡＳ疾病的标志和ＡＳ发生、发展和预后密切相关。以往研究表明，普罗布考能显著改善内皮功能，其机制除了抗氧化损伤、抗炎作用外，还有抑制黏附分子表达，减少细胞间的黏附。普罗布考可减少高胆固醇血症者血浆中血管细胞黏附分子、细胞间黏附分子、Ｐ选择素等黏附分子的表达，抑制内皮细胞增生、移行。另外，普罗布考可逆转维生素Ｋ依赖的凝血因子和纤维蛋白原水平的升高，能完全抑制纤溶酶原激活物抑制剂的分泌，并使组织性纤溶酶原激活物的分泌增加，调节血小板功能，增强血管舒张功能。［３２，３３】

２．２．４诱导Ｈｏ．１的表达及活性

本实验证实普罗布考可诱导斑块内ＨＯ．１的表达及活性，与此结果一致的是，赵水平等【３４】发现普罗布考能够诱导动脉粥样硬化斑块内ＨＯ．１的表达，Ｄｅｎｇ等［１３】在兔颈动脉球囊损伤模型中也发现普罗布考能够上调ＨＯ．１。本实验通过腹腔注射锡原卟啉抑ＮＲｏ．１的表达及活性，促进了斑块的进展。为明确普罗布考抗氧化、抗炎症特性是否部分通过诱导ＨＯ．１产生及在抗ＡＳ方面的意义，设置普罗布考＋ＳｎＰＰ．Ⅸ组，即在普罗布考干预的同时，利用ＳｎＰＰ．ＩＸ抑制体内ＨＯ．１，结果证

明普罗布考的抗氧化、抗炎症及抗ＡＳ作用被抵消，表明普罗布考可通过升高ＨＯ．１水平来抑制脂质过氧化及炎症因子产生而发挥其抗ＡＳ作用。

３．ＨＯ－１抗动脉粥样硬化作用及机制

３．１ＨＯ－１抗动脉粥样硬化作用

ＨＯ．１是一种存在于人体多种组织和器官、具有细胞保护作用、并与Ａｓ等疾病的发生和发展密切相关的抗氧化酶和应激蛋白。活性氧族（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）引起的内皮细胞功能紊乱是动脉粥样硬化病变形成的起始环节。Ｔａｉｌｌｅ等【３５】发现在巨噬细胞ＨＯ一１可以降低产生ＲＯＳ的关键酶一ＮＡＤＰＨ的活性。Ａｂｒａｈａｍ等【３６１研究发现增：ＪＪ］］ＨＯ．１的表达可以；Ｊ婀ＲＯＳ介导的内皮细胞凋亡。单核细胞迁移至血管壁是动脉粥样硬化发生的标志之一。Ｉｓｈｉｋａｗａ等【３７１证明诱导ＨＯ．１的过表达或直接给予胆红素或胆绿素明显抑制ｏ×一ＬＤＬ介导的单核细胞迁移，抑审ｌＪＨＯ．１的表达则有相反的作用。Ｐｅｉ—ＣｈｕｎｇＬｅｅ等【３８】研究发现用亚砷酸盐处理鼠和人的平滑肌细胞，可以诱导血管平滑肌细胞激活ＨＯ一１基因的转录，减少单核细胞趋化因子１（ＭＣＰ．１）和ＩＬ＿６的产生，从而减轻平滑肌细胞的增殖和单核细胞的聚集。研究发现，ＨＯ．１先天缺乏者‘３９１及ＨＯ一１基因敲除小鼠【４０１的血管内皮细胞破坏严重，并有大量炎症细胞浸润。临床研究表明ＨＯ．１基因启动子区双核苷酸重复序列的长度多态性对于冠状动脉介入术后的再狭窄及严重心血管病事件的发生是一个独立的预后预测因子［４１，４２］，提示ＨＯ．１可能具有保护内皮细胞及抗血管损伤后内膜增殖的作用。Ｔｏｇａｎｅ掣４３１研究发现，在大鼠颈动脉球囊损伤处ＨＯ．１上调，用金属卟啉抑￥１ＪＨＯ一１的活性促进内皮增生，而用诱导剂上调ＨＯ－１表达可以抑制新内膜的增生。给予ＬＤＬ受体敲除小鼠高胆固醇饮食建立动脉粥样硬化模型，ＨＯ．１在动脉粥样硬化斑块内大量表达，诱导ＨＯ．１的过表达表现出减少粥样硬化病变的作用，而用锡原卟啉Ⅸ抑带ＩＪＨＯ．１的活性则促进病变的发展Ｍ４１。Ｊｕａｎ等将含人Ｈｏ一１基因的腺病毒载体注入１４周龄及２０周龄的载脂蛋白Ｅ缺Ｉ辂（ａｐｏＥ＇／＇）ｄ、鼠左心室内，发现ＨＯ．１对Ａｓ早期病变的和晚期病变的进展具有明显的抑制作用。本研究通过球囊损伤兔腹主动脉内皮后高脂喂养１２周，诱发粥样斑块的形成，然后给喂普罗布考以诱导ＨＯ一１，腹腔注射锡原卟啉抑￥１］ＨＯ．１。干预１２周后，病理实验结果显示，卟啉锡组斑块ｌＭＴ最大，对照组次之，普罗布考组最

小，表明ＨＯ．１可抑制Ａｓ晚期病变的进展。本研究结果显示，与对照组相比，普罗布考组斑块具有较厚的纤维帽，较少的巨噬细胞，较低的血清氧化及炎症因子的表达，表明ＨＯ一１过表达可使兔腹主动脉易损斑块向稳定方向转化。本实验正在进行的时候，Ｃｈｅｎｇ等报道，在ａｐｏＥ敲除小鼠上诱导ＨＯ一１过表达对斑块的面积及斑块内巨噬细胞的含量无显著影响。与此研究结果相比，本研究结果显示了ＨＯ．１对斑块进展及构成的更为显著的影响，其原因可能与以下两点有关：１．两研究所用实验动物模型不同；２．药物干预的时间有差异，Ｃｈｅｎｇ等用ＨＯ．１的抑制剂及诱导剂干预了三周，而本研究干预了１２周。

３．２ＨＯ．１抗动脉粥样硬化可能的作用机制

３．２．１抗炎症作用

Ａｓ是血管壁内细胞、脂质、单核一巨噬细胞、血管平滑肌细胞及血小板相互作用而导致的慢性炎性反应。炎症贯穿于Ａｓ发生和发展的全过程，是稳定斑块向不稳定斑块转化的重要病理生理基础。ＨＯ一１及其产物具有较强的抗炎作用。与野生型小鼠相比，ＨＯ．１基因敲除小鼠血ＩｇＭ水平明显增高。在用脂多糖刺激后，ＨＯ．１基因敲除小鼠反常释放高水平炎性因子如｜Ｌ－１、ｌＬ－６、干扰素Ｙ和ＴＮＦ一０【等，并逐渐产生慢性炎症反应，表现为脾脏和淋巴结增大，肝脏炎症浸润及外周血白细胞增多‘４５１。目前唯一确诊的ＨＯ．１先天缺乏者被证实死于与内皮细胞氧化应激损伤有关的炎症综合征。体外研列４６１表明，ＨＯ．１过表达可减少与内皮细胞激活有关的粘附分子，如Ｅ．选择素及血管细胞粘附分子．１的表达。

最近，Ｃｈｅｎｇ掣研究发现在人颈动脉粥样硬化斑块内，ＨＯ．１蛋白的表达与炎症因子女Ｉ：ＩＭＭＰ一９，ＩＬ．８和ＩＬ－６等的表达呈正相关，提示ＨＯ．１可能为斑块内炎症反应的调节因子。本研究发现，给予ＨＯ．１诱导剂高铁血红素刺激体内ＨＯ．１的表达显著减少了斑块内巨噬细胞的含量，给予ＨＯ．１特异性抑制剂ｓｎＰＰ（Ｉ×）则有相反的效果。最近的一项研究也表明，ＨＯ．１基因敲除小鼠的动脉粥样硬化斑块内巨噬细胞的含量显著高于野生型小鼠，ＨＯ．１基因敲除小鼠的外周血巨噬细胞吞噬脂质及形成泡沫细泡显著增多。ＨＯ．１减少斑块内巨噬细胞浸润的机制尚不完全明确，可能与其减少粘附因子表达及抑制单核细胞迁移有关。另外，ＨＯ．１基囚敲除小鼠的外周血巨噬细胞表达单核细胞趋化因子．１、ＩＬ．６等炎症因子增多。本研究发现，诱导体内ＨＯ．１过表达显著减少了血清ＭＭＰ一９、ＩＬ一１８￥Ｎｈｓ．ＣＲＰ的水平，抑制Ｈ０—１２４

的活性则产生相反的结果。ＩＬ一１８是促进肝细胞产生ＣＲＰ的主要因子，在不稳定性心绞痛病人中的水平较稳定性心绞痛高，是ＡＣＳ患者死亡的独立预测因子。ｈｓ．ＣＲＰ是经典的炎症介质，对动脉粥样硬化炎症反应的激发及维持起了重要作用，与ＡＭＩ复发率和首次ＡＭＩ后心血管死亡率的升高有关。ＭＭＰ．９Ｈ…ｅ。，够促进中膜平滑肌迁移、增殖，促成Ａｓ形成，并通过降解细胞外基质蛋白，引起ＶＳＭＣ失巢凋亡，使斑块不稳定而易于破裂。因此，本研究结果为ＨＯ．１作为斑块内炎症反应的调节因子提供了实验依据，提示ＨＯ．１可能通过拮抗斑块内炎症因子的表达而发挥其稳定斑块抑制斑块破裂的作用。以往研究表明，ＨＯ．１的抗炎作用很大程度上是由ｃ０介导的。例如，ｃＯ在生理浓度范围内（１００至５００ｐｐｍ）可抑制巨噬细胞产生炎症因子ＴＮＦ．０【、ＭＩＦ及ＩＬ－１［９ｌ，也可抑制活化的Ｔ细胞产生ＩＬ－２．另外，ｃＯ可刺激抗炎因子ＩＬ－１０的产生。ＣＯ的抗炎作用部分由诱导过氧化物酶增殖物激活受体．Ｙ及抑铝ｌＪＥｇｒ一１表达，选择性激活Ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶信号途径介导的。ＨＯ．１及ＣＯ的其他作用，包括抑制血小板活化及血栓形成，抑制纤溶酶原激活物抑制剂．１的表达及保护内皮细胞等也可能介导了其在血管损伤时的抗炎作用。

【４７—５５】

３．２．２抗氧化作用

本研究通过测定血清ＯＸ—ＬＤＬ水平反映组织的氧化应激水平。与对照组相比，普罗补考组血清ＯＸ—ＬＤＬ显著降低，而卟啉锡组ＯＸ—ＬＤＬ水平显著升高，提示ＨＯ．１能够降低体内的氧化应激水平。ＨＯ一１被普遍认为能够增强细胞的抗氧化能力并且能够对抗体内的氧化应激损伤。例如，有研究表明，与Ｊ下常细胞相比，来源于ＨＯ－１基因敲除小鼠的细胞对氧化应激的抵抗能力降低。相反，转染ＨＯ．１基因的细胞能够对抗过氧化物产生的细胞毒性。Ｔｕｒｋｓｅｖｅｎ等研究发现，在糖尿病小鼠模型中，诱导ＨＯ．１表达可上调小鼠超氧化物歧化酶、内皮型一氧化氮合酶及过氧化氢酶的表达，减少超氧阴离子产生。此外，ＨＯ．１基因敲除小鼠更易受内毒素产生的氧化损伤而发生肝坏死。

ＨＯ．１的抗氧化作用可能与其氧化分解体内血红素以及其具有抗氧化作用的产物胆红素等的作用有关。胆红素和胆绿色是最强的内源性抗氧化剂，可以清除炎症时巨噬细胞产生的氧自由基，具有强效抗脂类和脂蛋白氧化的作用，尤其是能防止低密度脂蛋白被氧化成氧化型低密度脂蛋白其抗氧化能力甚至超过了维２５

生素Ｅ和维生素Ｃ。流行病学调查显示，血清胆红素水平与冠心病的发生成负相关。ＨＯ一１催化血红素降解过程中生成大量的亚铁离子（Ｆｅ２＋），可通过Ｆｅｎｔｏｎ反应参与活性氧如超氧阴离子和过氧化氢的生成，有学者提出Ｆｅ２＋是可能是体内氧化低密度脂蛋白产生的主要媒介，动脉粥样硬化的发生与体内Ｆｅ２＋的累积密切相关。并认为女性绝经期后冠状动脉粥样硬化发生增加可能与体内在体内Ｆｅ２＋的增加有关。Ｆｅ２＋作为一种氧化剂它能刺激铁蛋白合成，铁蛋白是细胞内的铁库，能螯合血红素降解生成的Ｆｅ２＋，有助于预防铁介导的细胞毒性，从此意义上讲铁蛋白具有抗氧化作用。许多体外实验证实在ＨＯ一１被诱导而活性增高的同时，铁蛋白也同时升高，与ＨＯ．１相关的铁蛋白表达量与细胞抗损伤能力成平行关系。［５６－６１１

普罗布考原是二线降脂药物，由于其具有降ＹＬ乇ＨＤＬ．Ｃ、延长ＱＴ问期的副作用，使其在临床应用一度受到限制。近年来因发现其能延缓ＡＳ的发展而又引起广泛的研究兴趣。本研究成功建立兔动脉粥样硬化模型后，发现普罗布考组兔的ＡＳ斑块面积及程度均较对照组明显下降，同时血清ＬＤＬ．Ｃ矛ＮＨＤＬ．Ｃ显著下降，证明其的确具有抗ＡＳ作用，与以前的研究结果相符【４叫。本研究还发现，与对照组相比，普罗御考组腹主动脉斑块纤维帽厚度显著增加，巨噬细胞含量显著降低，表明普罗布考可增强斑块的稳定性。

普罗布考具有降脂、抗氧化、抑制平滑肌细胞增殖、改善血管内皮功能等作用，但其抗ＡＳ的具体作用机制仍需要进一步研究。本研究发现普罗布考干预组血清中ＯＸ．ＬＤＬ水平较对照组明显降低，进一步证明普罗布考具有抗氧化特性。另外，与对照组相比，普罗布考组血清中ＩＬ．１８、ＭＭＰ．９和ｈｓ．ＣＲＰ的水平显著降低，提示普罗布考可通过其抗炎作用来抑制ＡＳ的进展。本研究还发现普罗布考可诱导斑块内ＨＯ．１的表达及活性，与赵水平、Ｄｅｎｇ等结果一致。ＨＯ．１及其产物具有明确抗氧化效果及较强的抗炎作用。近年研究表明，ＨＯ．Ｉ与心血管疾病有着密切的联系，在ＡＳ的发生和发展中起调节作用。敲除ＨＯ．１基因或者用金属卟啉类抑，，ＪＨｏ活性可促进ＡＳ的发生，而腺病毒转染ＨＯ．１基因或者用激动剂诱导ＨＯ．１的表达可抑制斑块的进展。本课题组的前期研究也发现ＨＯ．１可抑制斑块内炎症反应，进而抑带ＪＪＡＳ进展，增强斑块的稳定性。本研究通过腹腔注射锡原卟啉抑ＮＨｏ一１的表达及活性，促进了斑块的进展。为明确普罗布考抗氧化、抗炎症特性是否部分通过诱导ＨＯ．１产生及在抗ＡＳ方面的意义，我们设立了普罗布考２６

＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组，在普罗布考干预的同时，利用ＳｎＰＰ．ＩＸ抑制体内ＨＯ．１，结果发现普罗布考的抗氧化、抗炎症及抗ＡＳ作用被抵消，表明普罗布考可通过升高ＨＯ．１水平来抑制脂质过氧化及炎症因子产生而发挥其抗ＡＳ作用。

３．４９ＩＪ新点和限制性

３．４．１创新点

（１）在兔腹主动脉粥样硬化模型中，通过口服普罗布考，发现其可诱导斑块内ＨＯ．１的表达及活性。

（２）通过检测血清炎症反应、氧化应激情况及斑块形态构成，发现普罗布考不仅能抑制斑块进展，并能增强斑块稳定性。

（３）在普罗布考干预的同时，注射ＨＯ一１抑制剂锡原卟啉，发现普罗布考通过诱导ＨＯ．１发挥抗ＡＳ作用。

３．４．２局限性

（１）限于条件，未能利用体内或斑块局部转染ＨＯ．１小干扰ＲＮＡ的方法进一步验证ＨＯ．１在普罗布考抗ＡＳ中的作用地位。

（２）由于动物模型和人类Ａｓ的差异，本研究所得出的结论在没有进行大规模的临床试验证实之前，不能应用于临床。

结论

普罗布考具有抗ＡＳ进展及稳定斑块的作用，其效应不仅通过降脂作用，而且与其诱导ＨＯ．１产生，进而发挥抗氧化、抗炎症作用有关。与他汀类调脂药不同，普罗布考副作用较少且轻微，不会引起肌病和肝酶升高，随着研究的深入，普罗布考在防治ＡＳ方面会有一个更广阔的应用前景。此外，ＨＯ．１的心血管保护作用日益引起重视，本研究提示ＨＯ一１是ＡＳ治疗的一个重要作用靶点，深入探索ＨＯ．１基因表达的调节机制，寻找新的ＨＯ．１诱导剂及丌发转ＨＯ．１基因技术，极有可能为临床防治冠心病开辟一个崭新的局面。

山东人学硕十学何论文

附表

表１２６周术，各组兔血脂水平和体重的比较（ｘ４－Ｓ，／７＝１５）

‘≯＜ｏ．０１ＶＳ．对照组。≯＜０．０１ＶＳ．对照组。

表２各组血清指标检测结果（ｘｉｓ．Ｆ／＝１５）

”Ｐ＜Ｏ．０１ＶＳ．对照组；撑肇＜Ｏ．０１ＶＳ．普罗布考组

山东人学硕十学位论文

表３各组兔腹主动脉斑块内ＨＯ．１ｍＲＮＡ、蛋白的相对表达量及ＨＯ活性的比较（ｘ±ｓ．胛＝１５）

＋≯＜０．０１０１。户＜０．ＶＳ对照组。对照组。

ＡＣ匝

零熬髯

图１ＨＯ一１在兔腹主动脉粥样硬化斑块内的表达（免疫组化，×２００）

Ａ：对照组；Ｂ：普罗布考组；Ｃ：卟啉锡组；Ｄ：普罗布考＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组

Ｆｉｇ．１ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＨＯ一１ｉｎｒａｂｂｉｔａｂｄｏｍｉｎａｌａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｐｌａｑｕｅｓ（ＤＡＢｓｔａｉｎｉｎｇ，×２００１

Ａ：Ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ；Ｂ：Ｐｒｏｂｕｃｏｌｇｒｏｕｐ；Ｃ：Ｓｎｐｐｇｒｏｕｐ；Ｄ：Ｐｒｏｂｕｃｏｌ＋Ｓｎｐｐｇｒｏｕｐ．

山东入学硕士学位论文

图２各组兔腹主动脉斑块形态（ＨＥ，×１００）

Ａ：对照组；Ｂ：普罗布考组；Ｃ：卟啉锡组；Ｄ：普罗布考＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组Ｆｉｇ・２Ｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆａｂｄｏｍｉｎａｌａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｐｌａｑｕｅｓ（ＨＥ，×１００）

Ａ：Ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ；Ｂ：Ｐｒｏｂｕｃｏｌｇｒｏｕｐ；Ｃ：Ｓｎｐｐｇｒｏｕｐ；Ｄ：Ｐｒｏｂｕｃｏｌ＋Ｓｎｐｐｇｒｏｕｐ．

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图３各组兔腹主动脉斑块内巨噬细胞的鉴定结果（免疫组化，×４００）

Ａ：对照组；Ｂ：普罗布考组；Ｃ：卟啉锡组；Ｄ：普罗布考＋ＳｎＰＰ．ＩＸ组Ｆｉｇ・３Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｉｎｆｉｌｔｒａｔｅｄｉｎｌｅｓｉｏｎｓ（ＤＡＢｓｔａｉｎｉｎｇ，×４００）

Ａ：Ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ；Ｂ：Ｐｒｏｂｕｃｏｌｇｒｏｕｐ；Ｃ：Ｓｎｐｐｇｒｏｕｐ；Ｄ：Ｐｒｏｂｕｃｏｌ＋Ｓｎｐｐｇｒｏｕｐ．

参考文献

１．ＢｒａｕｗａｌｄＥ．ＳｈａｔｔｕｃｋＩｅｃｔｕｒｅ—．ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕＩａｒｍｅｄｉｃｉｎｅａｔｔｈｅｔｕｒｎ

ＥｎｇｌＪｏｆｔｈｅｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ：ｔｒｉｕｍｐｈｓ，ｃｏｎｃｅｒｎｓ，ａｎｄ

３３７：１３６０—１３６９．ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ【Ｊ１．ＮＭｅｄ１９９７；

２．ＦａｌｋＥ．Ｗｈｙｄｏｐｌａｑｕｅｓ

３．Ｄａｖｉｅｓｒａｐｔｕｒｅ【Ｊ】？Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎａｃｕｔｅ１９９２；８６：１１１３０—１１１４２．ＭＪ．ＰａｔｈｏｐｈｙｓｉｏＩｏｇｙｏｆｃｏｒｏｎａｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅｓ【Ｊ】．Ｈｅａｒｔ２０００；

８３：３６１．３６６．

４．ＢｒｇｓｅｎＪＨ，ＫｏｅｎｉｇＫ，ＢａｃｈＨ，ｅｔ

ａｎｄａ１．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｐｒｏｂｕｃｏｌａｔｏｆｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｄｏｓｅｓｏｆｏｎａｌｐｈａ—ｔｏｃｏｐｈｅｒｏｌ，ｕｂｉｑｕｉｎｏｎｅ一１０

ａｔｈｅｒｏｓｃＩｅｒｏｓｉｓｉｎＷＨＨＬｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｒａｂｂｉｔｓ【Ｊ】．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２００２，１６３（２）：２４９—２５９．

５．ＢｒａｕｎＡ．ＺｈａｎｇＳ，ＭｉｅｔｔｉｎｅｎＨＥ．ｅｔａ１．Ｐｒｏｂｕｃｏｌｐｒｅｖｅｎｔｓｅａｒｌｙｃｏｒｏｎａｒｙｈｅａｒｔ

ｄｉｓｅａｓｅａｎｄｄｅａｔｈｉｎｔｈｅｈｉｇｈ－ｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒ

ｄｏｕｂｌｅｋｎｏｃｋｏｕｔｍｏｕｓｅ【Ｊ１．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＳＲ—ＢＩ／ａｐｏＩ．ｐｏｐｒｏｔｅｉｎＥＵＳＡ，２００３，１００（１２）：７２８３－７２８８．

ｏｎ６．ＳａｗａｙａｍａＹ，ＳｈｉｍｉｚｕＣ，ＭａｅｄａＮ，ｅｔａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｒｏｂｕｃｏｌａｎｄｐｒａｖａｓｔａｔｉｎ

ｃｏｍｍｏｎｃａｒｏｔｉｄａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ

Ｃｏｉｌｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ．ＦｕｋｕｏｋａＡｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓＴｒｉａｌ（ＦＡＳＴ）［Ｊ］．ＪＡｍ

Ｃａｒｄｉｏｌ，２００２，３９（４）：６１０—６１６．

７．ＴｅｎｈｕｎｅｎＲ，Ｍａｒｖｅｒ

ＢｉｏｌＨ，ＳｃｈｒｎｉｄＲ．Ｍｉｃｒｏｓｏｍａｌｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｅｎｚｙｍｅ［Ｊ】．Ｊ

８．ＩｓｈｉｋａｗａＣｈｅｍ，１９６９，２４４（２３）：６３８８—６３９４．Ｄ，ＷａｎｇＸ，ｅｔａ１．Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ｉｎｈｉｂｉｔｓａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｌｅｓｉｏｎＫＳｕｇａｗａｒａ

ｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎＬＤＬ—ｒｅｃｅｐｔｏｒｋｎｏｃｋｏｕｔｍｉｃｅ［Ｊ】．ＣｉｒｃＲｅｓ，２００１，８８（５）：５０６・５１２．

９．ＤｕｃｋｅｒｓＨＪ，ＢｏｅｈｍＭ，ＴｒｕｅＡＬ，ｅｔａ１．Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ｐｒｏｔｅｃｔｓａｇａｉｎｓｔｖａｓｃｕｌａｒ

ｃｏｎｓｔｒｉｃｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ【Ｊ】．ＮａｔＭｅｄ，２００１，７（６）：６９３－６９８．

１０．ＹｅｔＳＦ，ＬａｙｎｅＭＤ，ＬｉｕＸ，ｅｔａ１．Ａｂｓｅｎｃｅｏｆｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｓａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ

ｌｅｓｉｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｖａｓｃｕｌａｒ

１１．Ｃｈｅｎｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ【Ｊ１．ＦＡＳＥＢＪ，２００３，１７（１２）：１７５９—１７６１．ＷｊｅｔＹＨ，ＣｈａｕＬＹＣｈｅｎＪａ１．Ｓｅｒｕｍｂｉｌｉｒｕｂｉｎａｎｄｆｅｒｒｉｔｉｎｌｅｖｅｌｓｌｉｎｋｈｅｍｅ

ｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１

ｄｉａｂｅｔｉｃｇｅｎｅｐｒｏｍｏｔｅｒｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎｄｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｔｏｃｏｒｏｎａｒｙａｒｔｅｒｙｄｉｓｅａｓｅｉｎｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．ＤｉａｂｅｔｅｓＣａｒｅ，２００８，３１（８）：１６１５—１６２０．

１２．ＴｉｒｏｃｈＫ，ＫｏｃｈＷ：ｖｏｎＢｅｃｋｅｒａｔｈＮ，ｅｔａ１．Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ｇｅｎｅｐｒｏｍｏｔｅｒｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ

ａｎｄｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｃｏｒｏｎａｒｙｓｔｅｎｔｉｎｇ［Ｊ］．ＥｕｒＨｅａｒｔＪ，２００７，２８（８）：９６８—９７３．

ＰＫ，ＳｔｏｃｋｅｒＲ．Ｐｒｏｂｕｃｏｌｐｒｏｔｅｃｔｓａｇａｉｎｓｔｓｍｏｏｔｈ１３．ＤｅｎｇＹＭ，ＷｕＢＪ，Ｗｉｔｔｉｎｇ

ｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｂｙｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１［Ｊ】．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００４，１ｌＯ（１３１：１８５５—１８６０．

１４．Ｗｕ

ａＢＪ，ＫａｔｈｉｒＫ，ＷｉｔｔｉｎｇＰＫ，ｅｔａ１．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓｐｒｏｔｅｃｔｆｒｏｍａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓｂｙｈｅｒｎｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ｐａｔｈｗａｙｔｈａｔｉｓｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｏｆｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ［Ｊ】．ＪＥｘｐＭｅｄ，２００６，２０３（４）：１１１７—１１２７．

ａｒｔｅｒｉｅｓ【Ｊ】．１５．ＨｅｒｒｉｃｋＪＢ．Ｃｌｉｎｉｃａｌｆｅａｔｕｒｅｓｏｆｓｕｄｄｅｎｏｂｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｏｒｏｎａｒｙ

ＪＡＭＡ１９１２；５９：２０１５—２０２０．

１６．ＣｏｎｓｔａｎｔｉｎｉｄｅｓＰ．Ｐｌａｑｕｅｆｉｓｓｕｒｅｓｉｎｈｕｍａｎｃｏｒｏｎａｒｙ

１９６６；６：１－１７．ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ【Ｊ】．ＪＡｔｈｅｒｏＲｅｓ

１７．ＤａｖｉｅｓＭＪ，ＴｈｏｍａｓＡＣ．Ｐｌａｑｕｅｆｉｓｓｕｒｉｎｇ：ｔｈｅｃａｕｓｅｏｆａｃｕｔｅｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ，

ｓｕｄｄｅｎｉｓｃｈｅｍｉｃｄｅａｔｈａｎｄｃｒｅｓｃｅｎｄｏａｎｇｉｎａ【Ｊ】．ＢｒＨｅａｒｔＪＩ９８５；５３：３６３—３７３１８．ＮａｇｈａｖｉＭ，ＬｉｂｂｙＰ，ＦａｌｋＥ，ＣａｓｓｃｅｌｌｓＳＷ，ＬｉｔｏｖｓｋｙＳ，ＲｕｍｂｅｒｇｅｒＪ，ｅｔａ｜．Ｆｒｏｍ

ｖｕｌｎｅｒａｂｌｅｐｌａｑｕｅｔｏｖｕｌｎｅｒａｂｌｅｐａｔｉｅｎｔ：ａｃａｌｌｆｏｒｎｅｗｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓａｎｄｒｉｓｋａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ：ｐａｒｔ

１９．ＤａｖｉｅｓＩ【Ｊ】．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎａｃｕｔｅ２００３；１０８：１６６４—１６７２．ＭＪ．ＰａｔｈｏｐｈｙｓｉｏＩｏｇｙｏｆｃｏｒｏｎａｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅｓ【Ｊ】．Ｈｅａｒｔ，２０００；

８３：３６１．３６６．

２０．ＦａｌｋＥ．ＭｏｒｐｈｏｌｏｇｙｆｅａｔｕｒｅｓｏｆｕｎｓｔａｂｌｅａｔｈｅｒｏｓｃＩｅｒｏｔｉｃｐｌａｑｕｅｓｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇａｃｕｔｅ

ｃｏｒｏｎａｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅｓ【Ｊ】．ＡＭＪＣａｒｄｉｏｌ１９８９；６３：１１４—１２０．

２１．ＧｅｒｔｚＳＤ，Ｒｏｂｅｒｔｓ

ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃＷＣ．Ｈｅｍｏｄｙｎａｍｉｃｓｈｅａｒｆｏｒｃｅｉｎｒｕｐｔｕｒｅｏｆｃｏｒｏｎａｒｙａｒｔｅｒｉａｌｐｌａｑｕｅｓ【Ｊ】．ＡｍＪＣａｒｄｉｏｌ１９９０；６６：１３６８—１３７２．

２２．ＤａｖｉｅｓＭＪ。ＲｉｃｈａｒｄｓｏｎＰＤ。ＷｏｏｌｆＮ．ＫａｔｚＤＲ。Ｍａｎｎｌ。Ｒｉｓｋｏｆｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｉｎｈｕｍａｎ

ａｔｈｅｒｏｓｃｌｃｒｏｔｉｃｐｌａｑｕｅｓ：ｒｏｌｅｏｆ

ｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｌｉｐｉｄ，ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，ａｎｄｓｍｏｏｔｈｃｏｎｔｅｎｔ【Ｊ】．ＢｒＨｅａｒｔＪ．１９９３；６９：３７７．３８１．

２３．ＢｌａｋｅＧＪ，ＲｉｄｋｅｒＰＭ．Ｃ－ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｏｔｈｅｒｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｉｓｋｍａｒｋｅｒｉｎ

ａｃｕｔｅｃｏｒｏｎａｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅｓ【Ｊ】．ＪＡｍＣｏｉｌＣａｒｄｉｏｌ２００３；４１（４ＳｕｐｐｌＳ）：３７Ｓ一４２Ｓ．２４．ＭａｄｊｉｄＭ．Ｖｅｌａ

ｃａｕｓｅＤｌＫｈａｌｉｌｉ—ＴａｂｒｉｚｉＨ．ＣａｓｓｃｅｌｌｓＳＷ，ＬｉｔｏｖｓｋｙＳ。Ｓｙｓｔｅｍｉｃｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓｅｘａｇｇｅｒａｔｅｄｌｏｃａｌｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｉｎａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｃｏｒｏｎａｒｙａｒｔｅｒｉｅｓ：ｃｌｕｅｓ

ｏｎｔｏｔｈｅｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇｅｆｆｅｃｔｏｆａｃｕｔｅｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓａｃｕｔｅｃｏｒｏｎａｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅｓ【Ｊ】－

ＴｅｘａｓＨｅａｒｔＩｎｓｔｉｔｕｔｅＪ２００７；３４：１１－１８．

２５．ＰｒｅｄｉｍａｎＫ，ＳｈａｈⅧ．Ｐｌａｑｕｅｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎａｎｄｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌｒｏｌｅｏｆ

ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎａｎｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎ【Ｊ】．ＣａｒｄｉｏｌｉｎＲｅｖ，２０００；８：３２—３９

２６．贾伟华，周立春，田桂玲．普罗布考对颈动脉粥样硬化斑块稳定性影响的临床研究．中国新

药杂志．２００７年第０３期

２７．ＢａｒｎｈａｒｔＲＬ，ＢｕｓｃｈＳＪ，ＪａｃｋｓｏｎＲＬ．Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ

ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｐｒｏｂｕｃｏｌｉｎｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｖｉｔｒｏ：ｐｒｏｂｕｃｏｌｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｐｒｅｃｅｄｅｓｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｏｘｉｄａｔｉｏｎ【Ｊ】．ＪＬｉｐｉｄＲｅｓ，１９８９，３０（１１）：１７０３－１７１０．

ｏｎ２８．ＹｉＧＨ，ＭｏＺＣ，ＹｅＹＰ，ｅｔａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｒｏｂｕｃｏｌ

ｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉｃ

２９．ＵｍｅｊｉＫ，Ｕｍ

ｐｒｏｂｕｃｏｌｏｎｅｐａｒａｏｘｏｎａｓｅ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｍｉｃｅ【Ｊ】．ＣｅｌｌａＢｉｏｌＩｎｔ，２００８，３２（２）：６７—７１．ｎｍｏｔｏＳ，ＩｔｏｈＳ，ｅｔＩ．ＣｏｍｐａｒａｔｉｖｅＥｆｆｅｃｔｓｏｆｐｉｔａｖａｓｔａｔｉａｎｄｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓ，Ｃｕ／ｚｎｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＰＰＡＲ｛ｇａｍｍａ），ａｎｄ

ＪＰｈｙｓｉｏｌＨｅａｒｔＣｉｒｃＰｈｙｓｉｏ，２００６，ａｏｒｔｉｃｓｔｉｆｆｎｅｓｓｉｎｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ【Ｊ】．Ａｍ

２５３２．２９１（５）：Ｈ２５２２一Ｈ

３０．ＴｏｓｈｉｙｕｋｉＭ．ＳｈｉｇｅｒｕＨ．１ｗａｏＫ．ｅｔａ１．ＮＦ—ｋＢａｃｔｉｖａｔｉｏｎｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｔｒｅａｔｅｄ

ｗｉｔｈｏｘｉｄｉｚｅｄｈｉｇｈｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ【Ｊ】．ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ，２００３，３０３（２）：３１３—３１９．

３１．ＷｕＴＣ，ＣｈｅＩｌＹＨ，ＬｅｕＨＢ．Ｃａｒｖｅｄｉｌｏｌ，ａｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ，ｉｎｈｉｂｉｔｓｎｅｏｉｎｔｉｍａｌ

ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－２ａｎｄ－９ｉｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．ＦｒｅｅＲａｄｉｃａｌＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＭｅｄｉｃｉｎｅ．２００７年第１ｌ期

３２．ＪｉａｎｇＪＬ，ＺｈａｎｇＸＨ，ＬｉＮＳ，ｅｔａ１．ＰｒｏｂｕｃｏｌＤｅｃｒｅａｓｅｓＡｓｙｍｍｅｔｒｉｃａｌＤｉｍｔｈｙｌａｒｇｉｎｉｎｅＬｅｖｅｌｂｙ

ＡｌｔｅｒｎａｔｉｏｎｏｆＰｒｏｔｅｉｎＡｒｇｉｎｉｎｅ

ｖａｓｅＭｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅＬａｎｄＤｉｍｅｔｈｙｌａｒｇｉｎｉｎｅＤｒｕｇｓＤｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｈｙｄｒｏｌａｓｅＡｃｔｉｖｉｔｙ．ＣａｒｄｉｏＴｈｅｒ，２００６，２０（４）：２８１

３３．Ｚａｐｏｌｓｋｉ－ＤｏｗｎａｌＡ．Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｂｙｐｒｏｂｕｃｏｌｏｆｖａｓｃｕｌａｒｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ－１

（ＶＣＡＭ一１）ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ

１２３．ｉｎｈｕｍａｎｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２００１，１５５（１）：

３４．赵水平，王星，洪绍彩等。普罗布考对动脉粥样硬化兔血红素氧合酶ｌ表达的影响［Ｊ】。

中国动脉硬化杂志，２００８，１６（６）：４４０４４４。

３５．Ｔａｉｌｌ６Ｃ。Ｅｌ—Ｂｅｎｎａｌ。ＬａｎｏｎｅＳ。ＤａｎｇＭＣｔＯｇｉｅｒ—ＤｅｎｉｓＥｔＡｕｂｉｅｒＭ，ｅｔａ１．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ

ｏｆｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ・—１ｉｎｈｉｂｉｔｓＮＡＤ（Ｐ）Ｈｏｘｉｄａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｂｙｄｏｗｎ—ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ

ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅｂ５５８ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｉａｔｈｅｒｅｄｕｃｔｉｏｎｏｆｈｅｍ

Ｃｈｅｍ２００４；２７９：２８６８１－２８６８１８

３６．ＡｂｒａｈａｍＮＧ．Ｋｕｓｈｉｄａ弋．ＭｃＣｌｕｎｇｅａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ【Ｊ】ＩＪＢｉｏｌ１。ＷｅｉｓｓＭ。ＱｕａｎＳ．ＬａｆａｒｏＲ．ｅｔａ１．Ｈｅｉｎｅ

ｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ａｔｔｅｎｕａｔｅｓｇｌｕｃｏｓｅｍｅｄｉａｔｅｄｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｈｕｍａｎｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ【Ｊ】．ＣｉｒｃＲｅｓ２００３；９３：５０７－５１４．

ｅ３７．ＩｓｈｉｋａｗａＫｌＮａｖａｂＭ。ＬｅｉｔｉｎｇｅｒＮ．ＦｏｇｅｌｍａｎＡＭ。ＬｕｓｉｓＡＪ．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｈｅｍ

ｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ｉｎｈｉｂｉｔｓｔｈｅｍｏｎｏｃｙｔｅｔｒａｎｓｍｉｇｒａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｂｙｍｉｌｄｌｙｏｘｉｄｉｚｅｄＬＤＬ【Ｊ】．ＪＣｌｉｎ

３８．ＬｅｅＩｎｖｅｓｔ１９９７；１００：１２０９—１２１６．ＰＣ，ＨｏＩＣ，ＬｅｅＴＣ．Ｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｍｅｄｉａｔｅｓｓｏｄｉｕｍａｒｓｅｎｉｔｅ—ｉｎｄｕｃｅｄ

ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１，ｍｏｎｏｃｙｔｅｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔｐｒｏｔｅｉｎ一１，ａｎｄｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ・６ｉｎｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅ

３９．ＹａｃｈｉｅＡ，ＮｉｉｄａＹ

ｃａｕｓｅｓｃｅｌｌｓ【Ｊ】．ＴｏｘｉｃｏｌＳｃｉ２００５；８５５４１—５５０．ＷａｄａｌＩｇａｒａｓｈｉＮ，ＫａｎｅｄａＨ，Ｔｏｍａｌｅｔａ１．Ｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｅｎｈａｎｃｅｄｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｉｎｊｕｒｙｉｎｈｕｍａｎｈｅｉｎｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ

Ｉｎｖｅｓｔ１９９９；１０３：１２９－１３５．【Ｊ】．ＪＣｌｉｎ

４０．ＰｏｓｓＫＤ，ＴｏｎｅｇａｗａＳ．Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ１ｉｓｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒｍａｍｍａｌｉａｎｉｒｏｎ

ｒｅｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ【Ｊ】－ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ１９９７；９４：１０９１９－１０９２４．

４１．ＣｈｅｎＹＨ，ＣｈａｕＬＹ，ＣｈｅｎＪＷ，ｅｔａ１．ＳｅｒｕｍｂｉｌｉｒｕｂｉｎａｎｄｆｅｒｒｉｔｉｎｌｅｖｅｌｓＩｉｎｋｈｅｉｎｅ

ｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ｇｅｎｅｐｒｏｍｏｔｅｒｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎｄｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｔｏｃｏｒｏｎａｒｙａｒｔｅｒｙｄｉｓｅａｓｅｉｎｄｉａｂｅｔｉｃ

４２．ＴｉｒｏｃｈＫ，Ｋｏｃｈ、Ｍｐａｔｉｅｎｔｓ【Ｊ】．ＤｉａｂｅｔｅｓｙｏｎＣａｒｅ２００８；３１：１６１５・１６２０．ＢｅｃｋｅｒａｔｈＮ，ｅｔａ１．Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ｇｅｎｅｐｒｏｍｏｔｅｒ

ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎｄｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｃｏｒｏｎａｒｙ

９６８．９７３．ｓｔｅｎｔｉｎｇ【Ｊ】．ＥｕｒＨｅａｒｔＪ２００７；２８：

４３．ＴｏｇａｎｅＹｌＭｏｒｉｔａ弋。ＳｕｅｍａｔｓｕＭｅｔａ１．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｒｏｌｅｓｏｆｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｃａｒｂｏｎｌ

ｍｏｎｏｘｉｄｅｉｎｎｅｏｉｎｔｉｍａｌｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｅｌｉｃｉｔｅｄｂｙａｒｔｅｒｉａｌ

ＨｅａｒｔＣｉｒｃＰｈｙｓｉｏｌ２０００；２７８：Ｈ６２３一Ｈ６３２．ｉｎｊｕｒｙ【Ｊ】．ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌ

４４。ＩｓｈｉｋａｗａＫ．ＳｕｇａｗａｒａＤ．ＷａｎｇＸ；ＳｕｚｕｋｉＫ。ＩｔａｂｅＨ。Ｍａｒｕｙａｍａ、Ｉ，ｅｔａ１．Ｈｅｉｎｅ

ｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ｉｎｈｉｂｉｔｓａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｌｅｓｉｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎＬＤＬ—ｒｅｃｅｐｔｏｒｋｎｏｃｋｏｕｔｍｉｃｅ【Ｊ】．Ｃｉｒｃ

４５．ＫａｐｔｕｒｃｚａｋＲｅｓ２００１；８８：５０６．５１２．ＭＨ，ＷａｓｓｅｒｆａｌｌＣ，Ｂｒｕｓｋｏ丁，ｅｔａ１．Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅｌｍｏｄｕｌａｔｅｓｅａｒｌｙ

ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｅｓｐｏｎｓｅｓｅｖｉｄｅｎｃｅｆｒｏｍｔｈｅｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅｌｄｅｆｉｃｉｅｎｔｍｏｕｓｅ

山东入学硕十学位论文

【Ｊ】．ＡｍＪＰａｔｈｏｌ２００４；１６５：１０４５－１０５３．

４６．ＳｏａｒｅｓＭＰ，ＳｅｌｄｏｎＭＰ，ＧｒｅｇｏｉｒｅＩＰ，ＶａｓｓｉｌｅｖｓｋａｉａＴ，ＢｅｒｂｅｒａｔＰ０，ＹｕＪ，ｅｔａ１．

Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ｍｏｄｕｌａｔｅｓｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ

４７．Ｏｒｏｚｃｏａｃｔｉｖａｔｉｏｎ【Ｊ】．ＪＩｍｍｕｎｏｌ２００４；１７２：３５５３—３５６３．ＬＤ，ＫａｐｔｕｒｃｚａｋＭＨ，ＢａｒａｊａｓＢ，ＷａｎｇＸ，ＷｅｉｎｓｔｅｉｎＭＭ，ＷｏｎｇＪ，ｅｔａＩ．

ｏｘｙｇｅｎａｓｅ・１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＨｅｍｅｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｐｌａｙｓａｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｒｏｌｅｉｎａｔｈｅｒｏｓｃＩｅｒｏｓｉｓ【Ｊ】．Ｃｉｒｃ

４８．ＳｏａｒｅｓＭＰｌＳｅｌｄｏｎＲｅｓ２００７；ｉ００：１７０３—１７１１．ＭＰ．ＧｒｅｇｏｉｒｅＩＰ．Ｖａｓｓｉｌｅｖｓｋａｉａ弋．ＢｅｒｂｅｒａｔＰＯ．Ｙｕ３．ｅｔａ１．

Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ｍｏｄｕｌａｔｅｓｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎ【Ｊ】．ＪＩｍｍｕｎｏｌ２００４；１７２：３５５３－３５６３．４９．ＩｓｈｉｋａｗａＫ。ＮａｖａｂＭ。ＬｅｉｔｉｎｇｅｒＮ，ＦｏｇｅｌｍａｎＡＭ，ＬｕｓｉｓＡＪ．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｈｅｍｅ

ｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ｉｎｈｉｂｉｔｓｔｈｅｍｏｎｏｃｙｔｅｔｒａｎｓｍｉｇｒａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｂｙｍｉｌｄｌｙｏｘｉｄｉｚｅｄＬＤＬ【Ｊ】．ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔ１９９７；１００：１２０９—１２１６．

Ｊ５０．ＰａｅＨＯｔＯｈＧＳＣｈｏｉＢＭ．ＣｈａｅＳＣ．ＫｉｍＹＭ．ＣｈｕｎｇＫＲ｜ｅｔａ１．Ｃａｒｂｏｎｍｏｎｏｘｉｄｅ

ｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓＴｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｖｉａｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＩＬ一２ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ【Ｊ】．ＪｌｍｍｕｎｏＩ２００４；１７２：４７４４—４７５１．

５１．ＬｅｅＴＳ，ＣｈａｕＬＹ．Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ｍｅｄｉａｔｅｓｔｈｅａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆ

ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一１０ｉｎｍｉｃｅ【Ｊ】．ＮａｔＭｅｄ２００２；８：２４０—２４６．

５２．ＢｉｌｂａｎＭ，ＢａｃｈＦＨ，ＯｔｔｅｒｂｅｉｎＳＬ，ＩｆｅｄｉｇｂｏＥ，ｄｅＣｏｓｔａｄ＇ＡｖｉｌａＪ，ＥｓｔｅｒｂａｕｅｒＨ，ｅｔａ１．

ＣａｒｂｏｎｍｏｎｏｘｉｄｅｏｒｃｈｅｓｔｒａｔｅｓａｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｒｅｓｐｏｎｓｅｔｈｒｏｕｇｈＰＰＡＲ【Ｊ】．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ２００６；２４：６０１－６１０．

５３．ＢｒＣｉｎｅＢ，ＵＩＩｒｉｃｈＶ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｐｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ

ｂｙａｃｔｉｖａｔｉｏｎｂｙｃａｒｂｏｎｍｏｎｏｘｉｄｅｉｓＰｈａｒｍａｃｏｌ１９８７；ｍｅｄｉａｔｅｄｏｆｇｕａｎｙｌａｔｅｃｙｃｌａｓｅ【Ｊ】．Ｍｏｌ

３２：４９７．５０４．

５４．ＰｅｎｇＬ，ＭｕｎｄａｄａＬ，ＳｔｏｍｅｌＪＭ，ＬｉｕＪＪ，ＳｕｎＪ，ＹｅｔＳＦ，ｅｔａ１．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｈｅｍｅ

ｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｓｐｌａｔｅｌｅｔ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ【Ｊ】．ＡｎｔｉｏｘｉｄＲｅｄｏｘＳｉｇｎａｌ２００４；６：７２９—７３５．

５５．Ｆｕｊｉｔａ弋．ＴｏｄａＫ．ＫａｒｉｍｏｖａＡ．ＹａｎＳＦＪＮａｋａＹ。ＹｅｔＳＦ．ｅｔａ１．Ｐａｒａｄｏｘｉｃａｌｒｅｓｃｕｅ’Ｉｏｍ

ｉｓｃｈｅｍｉｃｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙｂｙｉｎｈａｌｅｄｃａｒｂｏｎｍｏｎｏｘｉｄｅｄｒｉｖｅｎｂｙｄｅｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ【Ｊ】．ＮａｔＭｅｄ２００１；７：５９８—６０４．

山东火学硕士学何论文

５６．ＰｏｓｓＫＤ，ＴｏｎｅｇａｗａＳ．Ｒｅｄｕｃｅｄｓｔｒｅｓｓｄｅｆｅｎｓｅｉｎｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅｌ－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔｃｅｌｌｓ

【Ｊ】．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ１９９７；９４：１０９２５—１０９３０．

５７．ＨｏｒｉＲｌＫａｓｈｉｂａＭ？Ｔｏｍａ弋ｔＹａｃｈｉｅＡ．ＧｏｄａＮｌＭａｋｉｎｏＮ？ｅｔａ１．Ｇｅｎｅｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ

ｏｆＨ２５Ａｍｕｔａｎｔｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ｐｒｏｔｅｃｔｓｃｅｌｌｓａｇａｉｎｓｔｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｉｄｅ—ｉｎｄｕｃｅｄｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ【Ｊ】．ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２００２；２７７：１０７１２—１０７１８．

５８．ＴｕｒｋｓｅｖｅｎＳ，ＫｒｕｇｅｒＡ，ＭｉｎｇｏｎｅＣＪ，ｅｔａ１．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｈｅｍｅ

ｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ｉｎｖｏｌｖｅｓａｎｉｎｃｒｅａｓｅｉｎｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ

ＨｅａｒｄｉｓｍｕｔａｓｅａｎｄｃａｔａｌａｓｅＣｉｒｃＰｈｙｓｉｏｌｉｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ

Ｈ７０１．Ｈ７０７．

５９．Ｅｉｓｅｎｓｔｅｉｎｄｉａｂｅｔｅｓ【Ｊ】．ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌ２００５；２８９：ＲＳ，ＧａｒｃｉａＭａｙｏｌＤ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｆｅｒｒｉｔｉｎａｎｄｈｅｉｎｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ

ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｎｒａｔｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｏｒｍｓｏｆ

１９９１；８８：６８８－６９２．

６０．ＢａｌｌａＧ，ＪａｃｏｂＨＳ．Ｆｅｒｒｉｔｉｎ：ａｉｒｏｎ【Ｊ】．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓｔｒａｔａｇｅｍｏｆ

ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ【Ｊ】．ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ１９９２；２６７：１８１４８—１８１５３．

６１．ＢａｌｌａＪ，ＮａｔｈＫＡ．Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅａｎｄｆｅｒｒｉｔｉｎｉｎｄｕｃｔｉｏｎｉｎｒａｔ

ｌｕｎｇｂｙｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎｉｎ

Ｌ３２１一Ｌ３２７．ｖｉｖｏ【Ｊ】．ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＬｕｎｇＣｅｌｌＭｏｌＰｈｙｓｉｏｌ１９９５；２６８：

３７

致谢

在职研究生的学习生活在这个季节即将划上一个句号，而于我的人生却只是一个逗号，我将面对又一次征程的丌始。大学毕业走出校园，到再次进入到山医开始求学生涯，在师长、亲友的大力支持下，走得辛苦却也收获满囊，在论文即将付梓之际，思绪万千，心情久久不能平静。我要把我的敬意和感激献给一位平凡的人，我的导师郭媛教授。我不是您最出色的学生，而您却是我最尊敬的老师。您治学严谨，学识渊博，思想深邃，视野雄阔，为我营造了一种良好的精神氛围。授人以鱼不如授人以渔，置身其问，耳濡目染，潜移默化，使我接受了全新的思想观念，树立了宏伟的学术目标，领会了基本的思考方式，从论文题目的选定到论文写作的指导，经由您悉心的点拨，再经思考后的领悟，常常让我“山重水复疑无路，柳暗花明又一村”。您将是我工作和学习中的一座灯塔，指引我人生的航向。

感谢我的家人，焉得谖草，言树之背，养育之恩，无以回报，你们永远健康快乐是我最大的心愿。

山东大学齐鲁医院是我成长为一名医生的课堂。在ＩＣＵ团队中有着太多的品格值得我在今后的工作、生活中去学习——崇高的敬业精神，精湛的医学造诣，充满活力的生活热情，正气凛然的处事态度，这些使我深深地爱上了医生这一神圣的职业。我将ＩＣＵ的每一位老师深深地记在心中，你们教给了我一生用之不尽的财富。

感谢在这指导过我、帮助过我的各位老师，以及我的师妹李婷婷、彭洁、蒋婷婷，在我写论文的过程中给予我很多的帮助和建议。感谢各位参与我的论文评阅和答辩工作的专家教授！

攻读学位期间发表的主要学术论文

１．《普罗布考通过诱导血红素加氧酶１发挥抗动脉粥样硬化作用》山东大学学报（医学版）已录用未发表第一作者

２．《人工气道致命性并发症及其预防》山东医药２０１１年５ｌ卷３０期第一作者３．《侵袭性曲霉菌４例报道》中国感染与化疗杂志２０１０年１０卷０１期第二作者

４．《血红素加氧酶．１抑制兔动脉粥样硬化进展与稳定斑块的作用》山东大学学报（医学版）２０１１年４９卷０６期第四作者

５．《机械通气救治一例重症肺炎患儿的经验总结》中国呼吸与危重监护杂志２００９年８卷０４期第五作者

６、《７Ｅ岱：ｃｔｏｆｐｒｏｂｕｃｏｌｏｎｖａｓｃｕｌａｒｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇｄｕｅｔｏａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓｉｎｒａｂｂｉｔｓ：ａｎｉｎｔｒａｖａｓｃｕｌａｒｕｌｔｒａｓｏｕｎｄｓｔｕｄｙ》ＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌ，２０１１，Ｖ０１．１２４Ｎｏ．１２，Ｊｕｎｅ２０第五作者

７（（Ｈｅｉｎｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ｉｎｈｉｂｉｔｓｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｄｅｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｖｕｌｎｅｒａｂｌｅｐｌａｑｕｅｓｉｎａｒａｂｂｉｔｍｏｄｅｌｏｆａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ》ＥｕｒｏｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（２０１１）Ｖｏｌｕｍｅ：６７２，Ｉｓｓｕｅ：１—３，Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒ：ＥｌｓｅｖｉｅｒＢ．Ｖ．，Ｐａｇｅｓ：１４３—５２第六作者３９

学位论文评阅及答辩情况表

姓名专业技术是否博导

（硕导）所在单位总体评价

※

论

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王秀

否嘭投、糍职务又评襁ｊ码石石墨ｌ懒面甲影１域匹劲涯，今ＡＡ阅

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辩

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员

答辩委员会对论

文的总体评价※

备注Ａ答辩秘书嘲答辩日期≯ｐ文冲

※优秀为“Ａ”；良好为“Ｂ”；合格为“Ｃ”；不合格为“Ｄ”。

普罗布考通过诱导血红素加氧酶1发挥抗动脉粥样硬化作用作者：

学位授予单位：张建宁山东大学

引用本文格式：张建宁 普罗布考通过诱导血红素加氧酶1发挥抗动脉粥样硬化作用[学位论文]硕士 2012