硝酸盐含量测定方法
硝酸盐测定
1 原理
样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，溶液通过镉柱，或加入镉粉，使其中的硝酸根离子还原成亚硝酸根离子，在弱酸性条件下，亚硝酸根与对氨基苯磺酸重氮化后，再与N－1萘基乙二胺偶合形成红色染料，测得亚硝酸盐总量，由总量减去亚硝酸盐含量即得硝酸盐含量。 2 试剂
2.1 氯化铵缓冲溶液(pH9.6～9.7)：同2.1。
2.2 硫酸镉溶液(0.14mol/L)：称取37g硫酸镉(CdSO4·8H2O)，用水溶解，定容至1L。
2.3 盐酸溶液(0.1mol/L)：吸取8.4mL盐酸，用水稀释至1L。
2.4 硝酸钠标准溶液：准确称取500.0mg于110～120℃干燥恒重的硝酸钠，加水溶解，移于500mL容量瓶中，加50mL氯化铵缓冲液，用水稀释至刻度，混匀，在4℃冰箱中避光保存。此溶液每毫升相当于1mg硝酸钠。
2.5 硝酸钠标准使用液：临用时吸取硝酸钠标准溶液1.0mL，置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，临用时现配。此溶液每毫升相当于10μg硝酸钠。
2.6 亚硝酸钠标准使用液同2.8。
2.7 镉柱：
2.7.1 镉粉还原效率的测定：镉粉使用前，经盐酸浸泡活化处理，再以水洗两次，用水浸没待用。用牛角勺将镉粉加入25mL带
塞刻度试管中，至5mL刻度；用少量水封住。吸取2.0mL硝酸钠标准使用液，加入5mL氯化铵缓冲液。盖上试管塞，振摇2min，静止5min，用漏斗颈部塞有少量脱脂棉的小漏斗过滤，滤液定量收集于50mL容量瓶中，用15mL水少量多次地洗涤镉粉，洗液与滤液合并。加5mL乙酸(60%)后，立即加10mL显色剂，加水稀释至刻度，混匀，暗处置25min。用1cm比色杯，以标准零管调节零点，于550nm波长处测吸光度，根据亚硝酸盐标准曲线计算还原效率。
2.7.2 计算
式中：X2——还原效率，%；
20——硝酸盐的质量，μg；
m3——20μg硝酸盐还原后测得亚硝酸盐的质量，μg；
1.232——亚硝酸盐换算成硝酸盐的系数。
3 分析步骤
3.1 样品处理
称取约10.00g(粮食取5g)经绞碎混匀样品，置于打碎机中，加70mL水和12mL氢氧化钠溶液(20g/L)，混匀，用氢氧化钠溶液(20g/L)调样品pH＝8，定量转移至200mL容量瓶中加10mL硫酸锌溶液，混匀，如不产生白色沉淀，再补加2～5mL氢氧化钠，混匀。置60℃水浴中加热10min，取出后冷至室温，加水至刻度，混匀。放置0.5h，用滤纸过滤，弃去初滤液20mL，收集滤液备用。
3.2 测定(用镉粉法还原硝酸盐为亚硝酸盐)
3.2.1 镉粉法：准确吸取5.1的样品滤液10.0mL，置于盛有高度5mL镉粉的25mL带塞刻度试管中。自“加入5mL氯化铵缓冲液…”按2.7.1依法操作。
注：蔬菜、腌菜类食品中硝酸盐含量较高，可根据样品中硝酸盐的实际含量，将样品溶液稀释至适当浓度。
4 计算
式中：X3——样品中硝酸盐的含量，mg/kg；
m4——样品的质量，g；
m5——经镉粉还原后测得亚硝酸钠的质量，μg；
m6——直接测得亚硝酸盐的质量，μg；
1.232——亚硝酸钠换算成硝酸钠的系数。
V3——样品处理液总体积，mL；
V4——测定用样液体积，mL。
结果的表述：报告算术平均值的两位有效数。
5 允许差
相对相差≤10%。