大肠杆菌O157(显色培养基检测)检测细则
09-17
大肠杆菌O157（CHROMagar 显色培养基检测）检测细则 1、目的
用CHROMagar 公司出产的大肠杆菌O157显色培养基检测沙门氏菌。
2、适用范围
适用于食品和食物中毒样品中的大肠杆菌O157检验。
3、职责
检测人员负责按照本规程对被测样品进行检测；校核人员负责对检测操作人员是否规范以及检测结果是否准确进行审核；授权签字人负责综合管理和检测报告的签发。
4、试剂及器材
4.1 CHROMagar大肠杆菌O157显色培养基
4.2 乳糖胆盐发酵管
4.3 营养肉汤
4.4 肠道菌增菌肉汤
4.5 CHROMagarO157显色培养基
4.6 三糖铁琼脂
4.7糖发酵管（乳糖、鼠李糖、木糖、甘露醇）
4.8 赖氨酸脱羧酶试验培养基
4.9 尿素琼脂（PH7.2）
4.10 蛋白胨水、靛基质试验
4.11 氰化钾培养基
4.12 半固体琼脂
4.13 出血性大肠埃希氏菌诊断血清
5、仪器设备
5.1 恒温培养箱：36±1℃ 42℃
5.2 显微镜
5.3 均质器
6、检测步骤
6.1 增菌：无菌操作取检样25g （ml ）加在225ml 营养肉汤中，于36±1℃培养6小时，挑取1环，接种于1管30ml 肠道菌增菌肉汤内，于42℃培养18小时。
6.2 分离：将增菌液化线接种CHROMagarO157显色培养基于36±1℃培养24小时。
6.3 生化试验：挑取菌落分别接种三糖铁，同时将培养物分别接种蛋白胨水、半固体、PH7.2尿素琼脂、KCN 肉汤和赖氨酸脱羧酶试验培养基，以上培养物均在36±1℃培养过夜。
6.4 血清学试验
7、结果判定
7.1 三糖铁斜面产酸或不产酸，底层产酸，硫化氢阴性，KCN 阴性和尿素阴性的培养物为大肠埃希氏菌。
7.2 血清学试验
8、支持性文件
9、质量记录
9.1 检测原始记录
9.2 检测报告