苏丹Ⅲ染色
姓名: 学号:201000232---
学院:生命科学学院 班级:临床医学七年制四班
实验名称:脂类细胞化学-------苏丹Ⅲ染色
实验目的:了解脂类染色原理,操作步骤及脂类标本制片原则。
实验原理:脂类包括的范围很广,有单纯脂、复合脂、衍生物等,脂
肪依其性质可分中性脂肪、脂肪酸、胆固醇、髓磷脂以及
其他类型脂质。通常,各种脂与类脂质在体内不是单独存
在,是以某种程度混合存在。此外,脂肪与类脂质和蛋白
质结合时,往往不易显出,但用重铬酸钾、升汞、硝酸钻
或硝酸铀氧化组织块或切片,可以显现出脂肪及类脂类。
脂类不溶于水,易溶于酒精、苯、乙醚、氯仿,因此脂
肪标本的制作,需用不含酒精或不能溶脂的液体固定,
一般常用甲醛类固定剂。用锇酸固定的脂肪不溶与无水
乙醇、二甲苯等类似的液体,可用于石蜡切片。但是脂
肪的标本一般不用石蜡切片或火棉胶包埋,而用如下方
法:
冰冻切片
明胶包埋冰冻切片
铺片发
脂溶性燃料有:苏丹燃料中的苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ(猩红)、
苏丹黑
实验材料:小白鼠一只,苏丹Ⅲ染液,70%的乙醇溶液,蒸馏水,甲
醛钙,镊子两个,剪刀一把,解剖盘。
实验步骤:1、断头法处死小鼠,并置于解剖盘中。剪开腹腔,用镊
子提取小肠将盖玻片紧贴于肠柔膜,用剪刀连同盖玻
片和其上粘的肠柔膜取下,反扣于已滴加甲醛钙的载
玻片上,固定20分钟。
2、吸取蒸馏水滴入载玻片与盖玻片之间冲洗,用滴管不
断吸去液体,以去除固定液。
3、用70%的乙醇溶液代替蒸馏水重复与步骤2的操作,
再进行一次冲洗。
4、用苏丹Ⅲ染液染色30分钟。
5、吸取溢出的染液擦净盖玻片的表面和周边,在显微镜
下观察。
实验结果: 脂肪细胞是圆球型,内充满橘红色脂类物质,。细胞核
呈指环状靠细胞边缘。
注意事项:
1、 染料溶于脂类而使脂类显色,使用时注意选样溶剂,
要求既要溶解(苏丹)燃料,又不溶掉脂类。
2、 找肠系膜时应尽量小心,以免将肠系膜扯破。
3、 制作装片时尽量用盖玻片撑开肠系膜。