大鼠心缺血再灌注实验设计
题目:不同药物对大鼠心缺血再灌注损伤的治疗作用 目的:观察抑制氧自由基生成药物(5-甲酰尿嘧啶)对大鼠心缺血再灌注损伤的治疗作用。 观察钙离子拮抗剂(硝苯地平)对大鼠心缺血再灌注损伤的治疗作用。
观察抗脂质过氧化制剂(维生素C 或维生素E )对大鼠心缺血再灌注损伤的治疗作
用。
原理:多数情况下,缺血后再灌注可使组织器官功能得到恢复,损伤的结构得到修复,患者
病情好转康复;但有时缺血后再灌注.不仅不能使组织、器官功能恢复,反而加重组织、器官的功能障碍和结构损伤。这种在缺血基础上恢复血流后组织损伤反而加重,甚至发生不可逆性损伤的现象称为缺血再灌注损伤。
心缺血再灌注损伤是指心肌缺血后再灌注期间导致的心机细胞损害,其损害程度较心肌缺血本身严重,常表现为心肌细胞收缩功能减弱和心室顺应性改变,出现心律失常,心功能低下等现象。
心肌缺血再灌注损伤与氧自由基产生增多、钙超载、及白细胞的作用有关。 抑制氧自由基生成药(黄嘌呤氧化酶抑制剂——5-甲酰尿嘧啶)具有抑制氧自由基生成的作用,减少氧自由基生成。钙离子拮抗剂(硝苯地平)可以阻断钙的慢通道,使细胞外钙的内流减少,从而降低胞浆钙离子,可起到减少MIRI 的作用。抗脂质过氧化制剂(维生素C 或维生素E )可以阻断脂质过氧化可1)抗白细胞粘附; (2)保护内皮功能; (3)抗血小板粘附、聚集及脱颗粒反应。有研究证实外源性维生素E 可增加心肌梗死后大鼠血浆、心脏的维生素E 含量,改善心功能,并减少大鼠的再灌注心律失常。
实验对象:大鼠4只,120-200g ,体格健康雌雄不限。 器材和药品:手术刀,动脉夹4个,棉线,剪子,镊子2把,玻璃分针2个,注射器及针
头2个,动脉插管器械,BL-420生物机能实验系统
药品:20%氨基甲酸乙酯0.5ml/g,5-甲酰尿嘧啶注射液,硝苯地平注射液,
维生素C 或维生素E 注射液,肝素。
方法步骤:1、大鼠心再灌注损伤再灌注模型的制备
(1)取大鼠,称重,用20%氨基甲酸乙酯0.5ml/g腹腔注射麻醉,仰卧位固定。
(2)1%肝素0.2ml/100g从尾静脉注射。
(3)前胸,上腹部剪毛,沿肋缘下剪开腹前壁皮肤皮下筋膜,肌肉,纵向剪开
胸前壁和横向剪开胸前壁暴露心脏。
(4)经主动脉插管
(5)找到左冠状动脉用动脉夹夹闭1分钟。打开动脉夹,血液重新供应,用BL-420
实验技能系统记录,观察心律心室内压等的改变。
2、药物治疗作用观察
再灌流15分钟后注入5-甲酰尿嘧啶注射液ml, 观察心脏收缩改变。
重复步骤1,分别注入硝苯地平注射液,维生素C 或维生素E 注射液及生理盐水分别观察
变化。
3, 、记录波形
预期结果:实验组大鼠,均有不同程度的心肌细胞收缩功能增强,出现心律失常恢复,心功
能恢复等现象。对照大鼠择不会出现损伤缓解的状况。
可能出现的问题:1、药物作用的最佳时间不同,症状缓解的不明显。
2、实验小鼠较少可能会有抽样误差。