ATP 荧光检测仪原理及进展
ATP荧光检测仪原理及进展
ATP检测原理
ATP(Adenosine Triphosphate,三磷酸腺苷)是各种生命活动能量的直接来源,存在于所有活的动植物细胞、细菌和食物残渣中。ATP荧光检测法是根据萤火虫发光原理开发的快速检测技术。即有氧条件下,虫荧光素酶催化虫荧光素和ATP之间发生氧化反应形成氧化荧光素并发出荧光,其强度与微生物数量呈比例关系。
其作用机理如下:
荧光素+ATP+O2 —————— 氧化荧光素+AMP+PPi+CO2+hν
BioLum-II ATP快速检测卫生监控系统(以下统称为ATP荧光检测仪)即是通过检测荧光信号的强度从而得知待测目标被细菌、食物残渣等污染的程度,因此ATP的检测可以作为判断是否洁净的指标。
与其它评估方法相比,ATP快速监控具有以下明显优势:
1). 实时监控:荧光素酶/荧光素/ATP反应为即时反应,读数可以在数秒之内得到。因此可根据结果立即采取纠正措施。
2). 良好的可靠性和一致性:ATP荧光检测仪可以确定出各种有机物和/或微生物残渣的存在。另外由于它使用BioLum-II独有的液体稳定试剂,因而检测结果准确、重复性好,为真实的洁净程序评估提供了可靠依据。
3). 直接和间接危险性评估:ATP检测的是表面已有的生物物质和有生物残留物、易滋生微生物的潜在危险区域。食物残留区域是最易受到微生物污染或最易发生交叉污染的地方。
4). 使用简便:非专业技术人员也可轻松使用ATP荧光检测仪、拭子和软件,这使得日常使用趋于简单化。
5). 结果易于判读:标本检测结果以相对发光单位(RLU)来显示,它代表了污染物产生的光总量。检测结果可以直接与通过(Pass)/不通过(Fail)数值进行比较,通过则屏幕上显示为对号(√);略微超出期望值的则显示警告符号(!),即介于通过和不通过之间的数值;结果超出最高限量值则显示叉号(×)。RLU‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐‐荧光素酶+Mg2+
读数越小表示表面越洁净。
ATP荧光检测仪应用进展
ATP生物发光技术产生于20世纪70年代中期。1983年,Moyer[1]等最早提出细胞内源性ATP的含量可以反映细胞的活性和活细胞的数量。同年Gronroos[2]等也证实该技术是一种可靠、灵敏度高的确定细胞活性度的检测方法。20世纪80年代,英国人首先研制出ATP检测仪检测系统,随后发展到欧洲、美国和日本。应用范围涉及食品加工、超市和饮食行业,检测内容包括微生物和食品残渣。1998年,日本国会颁布了《关于食品制造过程管理高度化临时措施法》,其中即包含了应用ATP检测仪检测系统的内容。1999年,日本还成立了ATP涂抹检查研究会,专门研究该方法的使用效率和应用领域,其内容之一就是在食品卫生监测领域中,解决现场微生物的检测问题。20世纪末,一些ATP检测仪检测系统及技术被引进我国,到目前为止,除个别省级卫生监督检测单位装备外,主要是在一些外资或合资企业中自行检测使用。2002年,我国卫生部颁发了食品加工企业HACCP实施指南,鼓励食品加工企业引入ATP检测系统。近年来,虫荧光素酶已通过基因工程生产,价格大幅度降低,而且ATP生物发光法在检测食品微生物时简单、快速且灵敏度高, 随着相关仪器的小型化,ATP生物发光技术必将会在国内相关行业得到迅速普及[3] 。
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