观察DNA和RNA在细胞中的分布
实验三：观察DNA 和RNA 在细胞中的分布
一、实验原理：
1、真核细胞的DNA 主要分布在细胞核内，RNA 主要分布在细胞质中。
2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA 和RNA 的亲和力不同，甲基绿对DNA 亲和力强，使DNA 显现出绿色，而吡罗红对RNA 的亲和力强，使RNA 呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色，可同时显示DNA 和RNA 在细胞中的分布。
3、盐酸的作用
① 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输；
② 盐酸使染色体中的DNA 与蛋白质分离，便于DNA 与染色剂的结合
二、实验材料：人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞
三、实验用具：大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、 石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜
四、方法步骤：
1、取材
① 滴：在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl 溶液；
② 刮：用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下；
③ 涂：将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中；
④ 烘：将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。
2、水解
① 解：将烘干的载玻片放入装有30ml 质量分数为8%的盐酸的小烧杯中，进行材料的水解； ② 保：将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟。
3、冲洗涂片
① 冲：用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟；
② 吸：用吸水纸吸去载玻片上的水分。
4、染色
① 染：用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色5分钟；
② 吸：吸去多余染色剂；
③ 盖：盖上盖玻片。
5、观察
① 低：在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰； ② 高：转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。
五、考点提示：
1、取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质；
2、取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞；
3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗；
4、用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂；
5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟。