常用染色液的配制
附录二: 常用固定液和染色液的配制
常用染色液的配制
1. 番红水液
番红0.1g 溶入蒸馏水, 定溶至100ml 。
2. 番红酒液
番红0.5g 或1g 溶入50%酒精, 定溶至100ml 。
3. 固绿染液
固绿0.1g 溶入95%酒精,定溶至100ml 。
4. 碘-碘化钾染液
碘化钾溶入100ml 蒸馏水,再加入1g 碘,溶解后即可使用。
5. 苏丹Ⅲ(或Ⅳ)染液
将0.1g 苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml 丙酮中,再加入70%酒精50ml 。
6. 改良苯酚品红染液
原液A :将3g 碱性品红溶入100ml 70%酒精,此液可长期保存。 原液B :将10mlA 液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。
原液C :将55mlB 液加入到6ml 的冰醋酸和6ml 的38%的甲醛中。 染色液:取C 液20ml ,加45%冰醋酸80ml ,充分混匀,再加入1g 山梨醇,放置14天后使用,可保存3年。
7. 间苯三酚染液
将5g 间苯三酚溶入100ml 95%酒精(若溶液呈黄色,即为失效)。
8. 中性红染液
将0.1g 中性红溶入100ml 蒸馏水,用时稀释10倍。
9. 钌红染液
将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水,现用现配。
10. 龙胆紫染液
将0.2g 龙胆紫溶入100ml 蒸馏水。现常用结晶紫代替。必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。
11. 铁醋酸洋红染液
先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml 的锥形瓶中煮沸,移去火苗,然后慢慢地分多次加入1g 洋红粉末(切记不可一次倒入)。待全部倒入后,再煮沸1~2min,并悬入一生锈的小铁钉于染液中,过1min 后取出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。静置12h 后过滤于棕色瓶中备用(置于避光处)。
12. 苏木精染液
苏木精的配方很多,常用的有如下3种:
配方Ⅰ:苏木精水溶液
0.5g 苏木精溶入100ml 煮沸的蒸馏水中,静置24h 后可使用。 配方Ⅱ:代氏苏木精(Delarfield’s haematoxylin)
甲液:苏木精1g + 无水酒精6ml
乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g + 蒸馏水100ml
丙液:甘油25ml + 甲醇25ml
分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后,放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天,再加
入丙液,混匀后静置1~2月,至颜色变为深紫色后,过滤备用,可长期保存。
配方Ⅲ:爱氏苏木精(Ehrlich’s haematoxylin)
苏木精1g + 无水或95%酒精50ml + 蒸馏水50ml + 甘油50ml + 冰醋酸5ml + 硫酸铝钾(钾矾)3~5g。配制时,先将苏木精溶于酒精中,然后依次加入蒸馏水、甘油和冰醋酸,最后加入研细的钾矾,边加边搅拌,直到瓶底出现钾矾结晶为止。混合后溶液颜色呈淡红色,放入广口瓶中,用纱布封口,自然氧化1~2月,至颜色变为深红色时即可过滤备用,可长期保存。
13. 席夫试剂(Schiff’s regent)
将0.5g 碱性品红溶入煮沸的蒸馏水,搅拌使其充分溶解。冷却至50℃时,过滤于棕色细口瓶中,加入10ml1mol/L盐酸。冷却至25℃左右,加入1g 偏亚硫酸钾或钠(Na2S2O5或K2S2O5),振荡使其溶解,密封瓶口,置于黑暗低温处过夜。次日检查,若染色液透明无色或呈淡茶色,即可使用。若染色较深,可加入少量优质活性炭(0.5~2g),振荡1min ,置于4℃冰箱中过夜,过滤使用。此液配好后,应塞紧瓶塞,外包黑纸,贮藏于冰箱中。
14. 硫堇染液
将0.25g 硫堇粉末,溶于100ml 蒸馏水中,即可使用。使用此液时。需用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能产生多色反应。
15. 亚甲基蓝染液
0.1g 亚甲基蓝溶入100ml 蒸馏水即可。
16. 詹纳斯绿B (Janus green B)染液
5.18g 詹纳斯绿溶入100ml 蒸馏水,配成饱和水溶液。用时需稀释,稀释倍数应视材料而异。
17. 苏木精-曙红(HE)染液
曙红(Eosin ),酸性染料,为最优良的动物细胞染料,与苏木精配合使用(复染)对动物组织进行对比染色。
苏木精的染液的配方同上。曙红有以下配制方法:
配方Ⅰ:曙红0.5g + 95%酒精100ml
配方Ⅱ:曙红0.5g + 蒸馏水100ml
配方Ⅲ:曙红0.5g + 95%酒精25ml +蒸馏水75ml 【上页】常用固定液的配制