临时切片装片涂片的制作和观察
临时切片装片涂片的制作和观察、指导 ——生科一组 指导途径
1、 做实验前要引导学生认识了解显微镜各部分结构名称与作用,以及熟练操作显微镜,这就要求指导老师更要掌握这方面的技能。同时作为一名合格的老师这也是必备的,这就要求我们要多练。
2、 给同学讲述并演示操作步骤,让他们产生视觉上的感受。
3、 重点细讲关键点。
(1)切片。示范手握刀片与材料的方法以及切片的动作。防止切伤手指同时也能切下需要的薄片。
(2)装片。示范怎样用镊子撕下表皮细胞或用刀片轻轻刮出表皮细胞。
(3)涂片。示范涂片的方法操作以及 引导学生进行染色。
4、 引导学生规范操作进行实验。
5、 实验进行过程中鼓励学生积极提出建议,活动思维。
6、 在显微镜下观察到实验目标后,让学生描述其特点,不用全部说出,每人说一点即可,锻炼学生的自信 心。
7、 给学生留下作业,让其画出看到的目标,并标出各部分的名称,强化知识。
8、 补充:口腔上皮细胞临时装片可能不易一次做成功,看不到目标细胞。这就要求指导老师带领学生多做 几遍,在熟练方法的基础上做成功。
一切片
1 目的要求
用光学显微镜观察的样品必须是薄而透明的,因此,无论是临时装片还是永久制片的玻片标本,制作前都必须先将材料切成薄片。徒手切片法简称手切片法,即以手持刀片将材料切成能在显微镜下观察其内部结构的薄片的方法。
2 材料 空心莲子草、土豆块茎、刀片、培养皿、清水、毛笔、显微镜、纱布、擦镜纸、胶头滴管、载玻片、 盖玻片。
3实验步骤
(1) 擦净载玻片和盖玻片。
(2) 材料的准备。采集空心莲子草的茎作为实验材料同时将它放到清水中以防萎蔫。还有土豆的块 茎作为辅助材料。
(3) 执握刀片和材料的方法。左手大拇指和食指的第一关节指弯夹住材料,用土豆块茎将空心莲子草 夹住,使之固定不动。为防止刀伤拇指应略低于食指并使材料上端超出手指23毫米不可高出过多否则切片时材料容易弯折也不容易切薄。 右手大拇指和食指捏住刀片的右下角刀口向内并与材料切面平行切片前先将材料和刀口上蘸些水使之切时滑润。 4 切片。左手保持不动以右手大臂带动前臂使刀口自外侧左前方向内侧右后方拉切同时观察切片的进展情况。动作迅速切忌中途停下切下数片后用湿毛笔将切片轻轻移入培养皿的清水中备用。 5 制作临时装片。将载玻片上滴一两滴清水选择薄的且厚度均匀的切片放到载玻片上制成临时装片。 6 镜检。用显微镜观察空心莲子草的维管组织。 4实验记录 在显微镜下看到清晰的空心莲子草细胞以及它的维管组织。 改进点在实际实验操作中的效果 1、切片时可以用相对较硬的土豆等夹住空心莲子草。 优点可能更易切出薄片使操作更加简单不过能不能实现还得看实际操作。 实际效果理想很丰满现实很骨干在实际实验操作中不是很成功。当土豆片夹住空心莲子草时另一只手会受到影响从而判断不准反而不容易切割。就好像一只手拿住刀在空中切另一个物体一样掌握不好力度。 2、两个刀片切取刀片中间的那个薄切片。 优点不用快速的切节省实验时间。 实际效果两个刀片之间的薄片大多数比较薄但是基本上都不完整而且容易拉伤不过还是能找到一些在显微镜下观察到维管束细胞还是可以借鉴的。 总结 1、熟练操作显微镜以及学会制作临时装片。 2、在切片时指导老师要规范学生的操作以免发生割伤手指的事情如果发生意外
要保持冷静不要慌张及时给学生进行伤口处理提前准备好酒精纱布药品等。 二装片 1目的 观察玉米叶片下表皮细胞的气孔。 2材料 玉米叶片、清水、刀片、显微镜、擦镜纸、剪刀、胶头滴管、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片。 3实验步骤 1 擦净载玻片和盖玻片。 2 用刀片轻轻刮取玉米叶片的表皮细胞。再用刀片切出一个正方形来防止其折叠。 3 将载玻片上滴上一两滴清水将取下的玉米下表皮放到载玻片的清水上。 4 用解剖针或镊子将其展开平铺到载玻片上。 5 用镊子拿住盖玻片先将一侧盖在水滴上另一侧轻轻放下防止出现气泡制成临时装片。 6 用显微镜观察叶片下表皮细胞及它的气孔。 4实验记录:图片略
观察到清晰的玉米下表皮细胞以及气孔保卫细胞。 改进点 1、可以将玉米叶片直接放到载玻片上再用刀片的中间位置轻轻的刮玉米叶片直至剩下最薄的一层表皮细胞。 优点直接放到载玻片上刮减小了刮破的概率用刀片的中间刮也是同样的道理。 实验效果将玉米叶片直接放到载玻片上省去了转移的过程不容易出现重叠现象较为实用。用刀片的中间位置轻轻刮而不是用镊子撕用力得当很容易刮出只剩下一层细胞也比较成功。 总结 1、刀片危险反复强调。 2、玉米叶片要选比较嫩的。 三涂片 1、目的 观察口腔上皮细胞的形态。 2、材料 消毒的牙签、口腔上皮细胞、蒸馏水、0.9%生理盐水、载玻片、盖玻片、蒸馏水、碘液、吸水纸、显微镜擦镜纸、纱布。 3、步骤 1 擦净载玻片和盖玻片。 2 滴一滴生理盐水在载玻片上。 3 用蒸馏水漱口除去口腔内的杂物。 4 用消毒的牙签轻轻刮取口腔内侧壁两颊。 5 在载玻片的生理盐水滴中均匀涂抹几下。 6 取一块边缘光滑的载玻片作为推片将推片的一段至于生理盐水滴的前方向水滴处移动触碰到水滴液使水滴液迅速均匀分布在推片与载玻片的接触处。 7 将推片与载片呈30-45°角平稳地向载片另一端推出然后再盖上玻片。 8 在玻片的一端滴碘液另一端用吸水纸吸使口腔上皮细胞充分染色染5分钟左右。 9 用同样的方法用蒸馏水洗掉染液。 10 在显微镜下观察。 4、实验记录:图片略
在显微镜下没有观察到口腔上皮细胞实验不是很成功。 改进点 1、 滴半滴生理盐水并加大碘液的浓度。 优点由于涂片是液体的装片用碘液染色时生理盐水过多容易使口腔上皮细胞随液体流走而且生理盐水过多会稀释碘液使染色不明显所以减少生理盐水的同时也可以增大碘液的浓度。 实验效果由于操作的不熟练导致没能在显微镜下看到清晰的口腔上皮细胞所以引用以上改进点应该可以起到一定的效果尤其是对于没有经验的学生来说。 总结 1、 要用纯净水把口漱干净防止取出食物残渣影响实验结果。
2、 注意牙签不要戳伤自己同时也要做好防护措施。 3、 染色时间不能过短影响染色效果。