阻断剂HBR(常见问题)

Heterophilic Blocking Reagent

Frequently Asked Questions

异嗜性抗体阻断剂HBR 常见问答

Q1：你需要HBR 吗？

如果您符合以下描述，HBR值得您一试！

· 正在研发夹心法免疫试剂盒

· 遭遇过假阳性样本的困扰

· 需鉴别样本为真阳性还是假阳性

· 检测结果受到HAMA 或异嗜性抗体干扰

· 需区分假阳性样本的干扰类别

· 需要一个通用阻断剂用于各种检测系统

Q2：什么是异嗜性抗体干扰？

病人血清/血浆中的内源性异嗜性抗体，可结合其他种属的免疫球蛋白，包括作为免疫分析试剂的异源抗体。这些抗体会干扰免疫检验体系，造成与实际分析物浓度无关的虚高检测值，可能导致误诊。

异嗜性抗体可以影响各种检测，但对夹心法免疫检验影响最大。

Q3：异嗜性抗体干扰的原理？

夹心法免疫检测至少使用两种针对抗原不同表位的抗体，捕获抗体包被在固相，标记抗体游离在溶液中。正常情况下，样本中的抗原连接两种抗体，标记抗体结合到固相的量与样本中的抗原浓度成正比（图1）。

异嗜性抗体在抗原不存在的情况下，也可以桥连这两种抗体，使得结合到固相的标记抗体浓度升高（图2），造成假阳性结果。

图

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Q4：HBR如何超越传统的阻断方法？

传统的被动阻断法，使用非特异性物质（鼠IgG，鼠血清，非特异性的单克隆抗体，聚合IgG 等），阻断人类异嗜性抗体的结合。所有方法的阻断效果皆依赖人类异嗜性抗体的亲合力。通常人类异嗜性抗体的亲合力K

56值在10-10 范围内。

HBR 以完全不同的方法来实现阻断。HBR能特异性结合人类异嗜性抗体，产生位阻效应，阻止干扰。HBR

9特异性结合物的亲合力K 值约10 。

HBR 的特异性，加上千倍于传统方法的亲合力，使得HBR 具有以下优点，超越传统阻断方法：

· 使用 HBR，只需少量蛋白质作封闭，不减弱检测信号。

· HBR 比传统方法能阻断更多假阳性。

· HBR 可阻断抗所有种属(anti-rabbit, anti-goat, anti-sheep & anti-mouse)的反应。

· HBR 可阻断抗鼠单克隆抗体的所有亚型（如anti-mouse IgG1, anti-mouse IgG2等）

· 使用HBR，不限定于某些检测。可作为通用试剂使用。

Q5：异嗜性干扰的普遍性？

· 现在已知干扰因素是免疫球蛋白，目前已发现IgG 和IgM 异嗜性抗体。

· 异嗜性干扰发生率很高。依病人人口而别，有高达40%发生率的报道。至少有10%的案例有据可考。 · 不同样本的干扰程度不同，同一病人样本的干扰程度也会随时间而变化。

· 异嗜性抗体并非针对特定种属，可与多种动物抗体结合。

· 异嗜性抗体并非单一和特异的实体，而是一个多成分的现象，包含多种可造成干扰的抗体，因此干扰并不限于基于单抗的检测体系。

· 干扰可能由所用抗体的Fc 片段介导。EIA似乎较 RIA 更易受到干扰。

Q6：异嗜性抗体从何而来？

有许多可诱发病人体内产生异嗜性抗体的因素，其中包括：

· 动物接触（驯兽师，兽医） · 动物辅助治疗（胸腺细胞、羊细胞、胚胎细胞） · 动物产品接触（烹饪） · 特定食物（奶酪）

· 注射疫苗 · 心肌病变

· 输血 · 秘方药物

· 自身免疫性疾病 · 透析

· 母婴传递 · 肠胃炎（E.Coli）

· 类风湿因子也可产生异嗜性抗体效果

Q7：异嗜性抗体和HAMA 的区别?

· 异嗜性抗体是一个通称，用于描述能够结合动物抗体从而干扰免疫分析的所有人源抗体。

· HAMA 是异嗜性抗体中的一种，结合鼠源抗体。

Q8：怎样确认异嗜性干扰？

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将样本倍数稀释后再检测，若测值呈非线性，说明存在干扰物 同一样本采用不同检测方法，若结果大相径庭说明存在干扰物。 同一样本添加阻断剂与未添加阻断剂的检测结果不一致，说明存在干扰物。 用亲和色谱法去除样本中的目标分析物，再常规检测，若检测信号未消失，说明存在干扰物。

Q9：什么是阻断剂？

阻断剂是一种生物制剂，加入免疫检验体系中，可结合异嗜性抗体，从而有效防止非分析物介导的抗体桥连。

目前有两种主要的阻断剂：

· HAMA 类阻断剂(Human Anti-Mouse Antibodies)

HAMA 类阻断剂只阻断一种人抗特定动物抗体的活性（如人类抗鼠抗体），通常为非针对目标分析物的正常血清、正常IgG、单克隆抗体等。

这类“被动阻断剂”被过量地加入样本中，使得样本中的种属特异性抗体优先于低浓度的分析物与之结合。 这类试剂用途有限，因为仅能排除异嗜性干扰的一部分，而异嗜性干扰涉及许多成分。人们经常发现，鼠IgG 在一个双单抗夹心法检测体系中，只能纠正部分异嗜性干扰。

· 真正的异嗜性抗体阻断剂(HBR)

这种制剂可排除各种异嗜性干扰

内含“主动阻断剂”，对造成干扰的异嗜性抗体具特异性结合力

只需低浓度即可高效阻断，将影响减到最低。

Q10: 理想的异嗜性抗体阻断剂的特点

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必须能够纠正任何样本中的干扰，不管干扰是种属特异性抗体还是类风湿因子造成的。 必须是低浓度、高效能的，不会产生剂量-反应曲线 不应影响真阳性样本的稀释线性 必须有很好的重复性，无批间差 必须长期稳定 必须经济实用 必须简便易用，可直接添加到免疫试剂中，无需额外试剂或样本处理步骤

Q11：Scantibodies的HBR 的特性？

· Scantibodies HBR 是专为对抗免疫检测中异嗜性干扰问题设计的卓越产品，是用来特异性中和异嗜性抗体的具有独特结构的免疫球蛋白。纯度高于95%。

· 不同于其他厂家供应的非特异性“被动阻断剂”（过量使用以确保优先于分析物结合异嗜性抗体），Scantibodies HBR是靶向针对异嗜性抗体的“主动阻断剂”，有效中和其干扰。

· 可阻断的假阳性类型包括：

a， 人抗鼠抗体（HAMA）

b， 人抗山羊抗体

c， 人抗绵羊抗体

d， 人抗兔抗体

e， 类风湿因子

· 广泛特异性使得 Scantibodies HBR 可作为“通用试剂”，在各种常见的双抗体试剂盒中均可使用 · Scantibodies HBR 为高特异性高纯度的试剂，极低浓度即够使用（只需正常小鼠IgG 用量的百分之一或千分之一），对检测信号无不良影响。

· Scantibodies HBR 不干扰人血清中分析物的加入或还原。

· Scantibodies HBR 不干扰真正阳性病人样本的稀释线性。

· Scantibodies HBR 批间重复性极高。

· Scantibodies HBR 效期五年，品质稳定。

· Scantibodies HBR的使用成本低于鼠IgG 或鼠血清。

· Scantibodies HBR 可直接加入到检测缓冲液或结合液等。

Scantibodies 的HBR 是高纯度的IgG 制剂，以液体形式供应，不含防腐剂。产品附以下说明：纯化方法、纯度（SDS-PAGE）、缓冲液组分、保存条件、效期、外观等。

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