尿素酶活性定性检测
尿素酶的测定（定性）
1. 试剂:
1.1 0.62%苯酚红乙醇溶液
2、测定方法:
将试样粉碎,称0.2g试样转入试管中,加入0.2g结晶尿素,3-5滴苯酚红指示剂，加20-30mL蒸馏水摇动10秒钟，于30度水浴中观察溶液颜色，记录呈现粉红色时的时间。
3、尿素酶活性的结果表示：
1min内呈粉红为:活性很强;区
1-5 min内呈粉红为:活性强;
5-15 min内呈粉红为:有点活性;
15--30 min内呈粉红为: 无活性;
美国大豆协会方法：
1、 原理：在有指示剂酚红存在的条件下，豆粕中的尿素酶活性可按尿素转变成氨
的方法定性测定。
2、试剂 ：
2.1 稀硫酸（H2SO4）0.2N或更稀些，带滴管。
2.2 尿素—酚红试剂 ：
a、将1.2克酚红溶解于30毫升0.2N的NaOH中；
b、用蒸馏水将之稀释至300毫升；
c、加入90克尿素并溶解之，用蒸馏水稀释至2升；
d、加入14毫升1.0N的H2SO4（或0.2N的H2SO4），用蒸馏水稀释至3升； e、溶液应具明亮的琥珀色。
3、测定步骤：
3.1 在一个150毫升的烧杯中到入少量试剂，注意溶液必须呈明亮的琥珀色。若溶液
已转为深橘红色，滴入稀硫酸溶液并搅拌之，直至溶液再度呈琥珀色。
3.2 量一汤匙粉碎好的豆粕粉，放置于培养皿中，在样品上加入两汤匙试剂，轻轻搅
拌，将样品平铺于培养皿中。若仍有干豆粕斑点，则再加入试剂，直至将豆粕浸湿。
3.3 放置5分钟后观察：
No.1 没有任何红点出现：再任其放置25分钟，若仍无红点出现，说明豆粕过熟。 No.2 有少数红点：少量尿素酶活性，豆粕可用。
No.3 豆粕表面约有25%为红点覆盖：少量尿素酶活性，豆粕可用。
No.4 豆粕表面约有50%为红点覆盖：有尿素酶活性。
No.5 豆粕表面约有75-100%为红点覆盖：尿素酶活性很高，不应该接受这种原
料，因为豆粕过生。