人文始祖轩辕黄帝
在SNI痛疼模型中脊髓背角转录PSD95与表达NMDA2B受体及nNOS的不一致性
罗爱林 金小高
华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科教研室 430030
目的：比较在SNI痛疼模型中脊髓背角转录PSD95与表达NMDA2B受体及nNOS是否具有一致性。
方法：选择雌性SD大鼠（150-200g ）12只，随机分为两组，每组6只，I组为对照组， II组制备SNI疼痛模型。术后观测疼痛的变化，于术后第11日灌注大鼠，使用免疫组化检测脊髓NMDA2BR和nNOS表达；断头取4－6段脊髓提取RNA，使用RT-PCR方法PSD95的转录。
结果：II组大鼠于术后第5日后形成稳定的神经病理性疼痛；NMDA2BR和nNOS主要表达于脊髓后角Ⅰ～Ⅱ层，II组表达NMDA2BR和nNOS的吸光度显著高于对照组，差异具有显著性（P
讨论 本文证明在产生痛觉异常和过敏的大鼠脊髓背角表达NMDA2BR和nNOS显著增加，并且它们都主要分布在背角Ⅰ～Ⅱ层。NMDA2BR和nNOS之间存在的协同作用是依赖突触后致密物（the Postsynaptic Density, PSD）中的PSD95来实现的。
突触后致密物是在电镜下发现的位于突触后膜的电子致密物，突触后致密物只存在兴奋性突触后膜，NMDA2BR、PSD95都是组成突触后致密物质的蛋白质。MNDA2BR 、PSD95和nNOS都存有PPZ结构域，PSD通过PDZ结构域的相互作用将NMDA2BR和nNOS联系在一起，这样nNOS就可以迅速利用而被激活，合成NO。在神经元中抑制PSD95的表达，NMDA2B受体激活后胞浆内Ca＋升高的能力没有影响，但nNOS的活性显著下降，合成NO的能力降低。 在本文中，尽管没有检测PSD95蛋白的表达，但PSD95的转录是降低的，所以理论上，PSD95的表达至少是不会升高的。当NMDA2BR和nNOS在脊髓背角的表达均增加时，PSD95的表达并不随之增加，这将导致两种结果。其一，尽管NMDA2BR和表达增加，但是不能够充分利用NMDA2BR开放所内流的
Ca，所以nNOS合成NO的能力并不随其表达增加而增加；其二， PSD95是一种骨架蛋白，它通过PDZ结构域将其它合有PDE区域的锚定在细胞膜上，PSD95减少后本该贴近细胞膜的nNOS将会进入胞浆中，可以与其它不含PDZ结构域的蛋白相互结合，如CAPON、PFK。另外在PSD中存CammKII，该激酶也能通过NMDA2BR激活而产生活性，激活的CammKII通过PSD95可以磷酸化nNOS，降低其活性，但PSD95减少，进入胞浆中的nNOS其活性将不再受Camm K II的调节。nNOS在细胞内所处区域是否引起细胞生理的改变尚不清楚。但是nNOS处于胞膜是有其特殊功能的，nNOS在突触后膜产生的NO将通过胞膜主要弥散在突触附近，影响该神经元附近细胞的功能。所以nNOS进入胞浆将会增加nNOS生理功能的复杂性。关于nNOS在神经病理性疼痛中所起的作用由于PSD95的表达而变得不具有确定性。