关于"缺血再灌注损伤的防治"的设计性实验
第五组设计性实验报告
专业:XX 班级:XX 组数:XX 成员:XX
实验内容:缺血—再灌注损伤的防治
实验目的:探究清除自由基对缺血再灌注损伤的防治作用即不同浓度GSH对缺 血再灌注损伤的防治作用及给药时机的选择
实验原理:心肌缺血再灌注损伤(MRI)是指心肌细胞因缺血发生可逆的、可存 活的损伤,在缺血纠正时,这种损伤反而加重,继而引起细胞死亡或 进一步功能障碍。所有器官都能耐受一定时间的缺血,超过一定时间 后,则会发生再灌注损伤。自由基的作用是缺血再灌注损伤的重要发 病学环节。缺血再灌注时,自由基生成增多,将使膜脂质过氧化增强、 蛋白质功能抑制、核酸及染色体破坏,因此清除过多的自由基,可减 轻缺血再灌注损伤。还原型谷胱甘肽(GSH)能提供电子使自由基还 原,从而清除自由基。
实验对象:5只健康成年家兔,2.0~3.0kg 实验药品和器材:
1.药品:生理盐水、3%的戊巴比妥钠、1g/kg GSH的生理盐水、
0.5g/kgGSH的生理盐水、0.1g/kg GSH的生理盐水 2.器材:BL—420E生物功能实验系统、二道生理记录仪、压力换能 器、多用电源插座、缝线、注射器、手术器械一套 实验方法:1.将5只家兔分别记为A、B、C、D、E
2.耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠1ml/kg全身麻醉,仰卧位固定于兔台 上
3.进行气管插管,从左侧颈总动脉逆行插管至左心室,经压力换能器 与生物功能实验系统相连,以观察记录心功能变化。在左股动脉插 管经压力换能器与二道生理记录仪相连,以观察血压。左股静脉连 输液装置,输注生理盐水(10ml/(kg·h))和给药
4.沿胸骨左缘切断第2、3、4肋软骨,小心剪开心包膜,在不损伤胸 膜情况下暴露心脏,辨认左冠脉左室支,用医用无创缝合针线在左 室支中点下穿线备用阻断。术后稳定20分钟,双活结结扎冠脉左 室支,造成急性心肌缺血,40分钟后松开结扎线,再灌注120分 钟,以复制缺血再灌注模型
5.观察指标,将结果记录于下面的表中:
分别于缺血即刻及缺血后20分钟、40分钟,再灌注后20分钟、 40分钟、60分钟、120分钟,在生物功能实验系统同时记录以下 心功能指标(血压在二道生理记录仪上记录) (1)心率和血压
(2)左室收缩功能指标:左室内收缩压力峰值(LVSP)和左室内压 力最大上升速率(+dp/dtmax)
(3)左室收缩功能指标:左室内舒张压力峰值(LVDP)和左室内压 力最大下降速率(—dp/dtmax)
6. A兔:在再灌注即刻以10ml/(kg·h)速度输注39.4℃生理盐水120 分钟
B兔:在再灌注即刻以10ml/(kg·h)速度输注39.4℃1g/kg GSH的 生理盐水120分钟
C兔:在再灌注即刻以10ml/(kg·h)速度输注39.4℃0.5g/kg GSH的 生理盐水120分钟
D兔:在再灌注即刻以10ml/(kg·h)速度输注39.4℃0.1g/kg GSH的 生理盐水120分钟
E兔:在分析了不同浓度的GSH的治疗作用后选择最佳浓度,在缺 血前120分钟以10ml/(kg·h)速度输注39.4℃最佳浓度的 GSH 的生理盐水120分钟,然后再进行缺血再灌注处理 注意事项:1.为防止结扎过紧影响再灌注时缝线的剪断,在结扎处置1.5mm的凹 槽塑料管,一同结扎,心肌缺血到达时间后,从塑料管凹槽处剪断 结扎线
2.手术防止出血,结扎冠脉放松后腰确保冠脉已再通
实验结论:XX
结果讨论与分析:XX