黄芪注射液对早期糖尿病肾病纤溶酶原激活物抑制物-1表达的影响

　　王　宏　孙喜明　程宇甫

　　摘要：目的　通过检测黄芪注射液治疗前后糖尿病肾病病人血清纤溶酶原激活物抑制物－1(PAI－1)表达的变化，探讨其与糖尿病肾脏病变之间的关系，以及黄芪治疗糖尿病肾病的机制。方法92例糖尿病病人，根据尿白蛋白排泄率分为糖尿病无肾病组(45例)与早期糖尿病肾病组(47例)，早期糖尿病肾病组接受黄芪注射液治疗，另设23名健康者作为对照组，应用ELISA方法检测血清PAI－1表达。结果　早期糖尿病肾病病人血清PAI－1表达为(5.51+0.31)μg／mL，较对照组、糖尿病无肾病组明显升高，使用黄芪注射液治疗后，早期糖尿病肾病组血清PAI－1表达降低为(3.41±0.21)μg／mL(P　　关键词：糖尿病肾病；纤溶酶原激活物抑制物－1；黄芪注射液

　　中图分类号：R587.1　R289.5　文献标识码：B　文章编号：1672-1349(2007)07-0581-02

　　糖尿病肾病(DN)的发病是多种细胞因子、生长因子以及激素对高血糖的综合反应的结果。近年研究发现，糖尿病肾病病人的纤溶酶原激活物抑制物－1(PAI－1)在血浆中浓度有显著变化，从而提示PAI－1可能参与了DN的发生与进展。本研究通过观察黄芪注射液临床治疗前后，早期糖尿病肾病病人血清PAI－1表达的变化，探讨其与糖尿病’肾脏病变之间的关系，以及黄芪注射液治疗糖尿病肾病的机制。

　　1　资料与方法

　　1．1　临床资料　选择我院2005年―2006年糖尿病病人92例，糖尿病元肾病组(NDN组)45例，年龄36岁～71岁(41.5岁±12.7岁)，均符合WHO诊断标准，24h尿微量白蛋白　　

　　1．2　治疗方法　DN组及NDN组病人进入实验前餐后2h血糖控制在10.0mmol／L以下，凡血压超过135／85 mmHg(1mmHg=O.133kPa)者给予抗高血压药物治疗(用钙离子拮抗剂，应用血管紧张素转换酶抑制剂者不在人选之列)，控制血压于135／80mmHg以下；并在原降血糖、降血压治疗的基础上加用黄芪注射液30mL加入5％葡萄糖注射液250mL、胰岛素3U静脉输注，每日1次，共应用4周。

　　1．3　检测项目　进入实验前以及黄芪注射液治疗4周末，于晨起空腹抽取静脉血，按试剂盒要求分离血浆，一30℃冰箱保存待测。采用双抗体夹心ELISA法(大连泛邦科技实业有限公司提供试剂盒)。操作严格按说明进行，应用芬兰生产的Well／seanMK-3型酶标仪测OD492值，根据不同浓度标准血清的OD492值作校正曲线，计算待测标本血清PAI－1浓度。24h尿白蛋白测定：收集24h的尿，准确记录尿量，标本搅匀，采用磺柳酸比浊法测定24h尿白蛋白含量，仪器用721分光光度计。受试期间保持用药前的生活方式与饮食习惯，不用影响血脂代谢的药物。

　　1．4　统计学处理　计量资料以均数±标准差(x±s)表示，采用SPSS 12.0软件进行方差分析及q检验，P　　

　　2　结果

　　对照组和NDN组治疗前后24h尿白蛋白和PAI－1的表达均无统计学意义(P>0.05)；DN组24h尿白蛋白和PAI－1的表达在治疗前较对照组和NDN组显著增高。治疗4周后与治疗前比较均有明显下降，但仍较对照组和NDN组高(P　　表1各组尿岛蛋白排泄率及PAI－1水平的比较(x±s)

　　3　讨论

　　DN是糖尿病常见而严重的并发症之一，糖尿病引起肾损害的确切机制并不完全清楚，DN的基本病变是肾小球体积增大、基膜增厚及足突融合、细胞外基质(ECM)增多、肾小管－间质纤维化，从而导致肾小球硬化。肾脏微血管病变的发生发展与血管内皮细胞的损伤及纤溶活性降低有着密切的关系。

　　PAI－1是一种丝氨酸蛋白酶抑制物，是调节纤溶活性的关键因子，PAI－1是纤溶系统的关键酶，主要来源于血管内皮细胞，亦来自于活化的血小板α颗粒及增生的平滑肌细胞。测定PAI－1的血浆活性，可反映体内纤溶系统的功能状态，纤溶系统的主要功能是清除沉积在血管壁上的纤维蛋白，以保持血流畅通。高糖可直接引起PAI－1的增多(在体外葡萄糖能促进人血管内皮细胞和平滑肌细胞PAI－1的合成和分泌，促进PAI－1的转录的启动)，糖基化终末产物可刺激系膜细胞PAI-1基因表达和生物学活性，白细胞介素－1(IL－1)、血管紧张素Ⅱ(angⅡ)、氧化低密度脂蛋白(OX－LDL)均可引起血浆PAI－1升高。PAI－1不仅抑制纤溶酶活性，并抑制对细胞外基质(ECM)有降解作用的基质金属蛋白酶(MUPs)的活性。本实验观察到糖尿病肾病病人PAI－1的表达明显高于无糖尿病肾病的病人，因而PAI－1在DN的发生、发展中具有重要作用，提示PAI－1可作为早期DN的一个诊断指标。

　　中医学认为，糖尿病肾病属于中医“消渴”“水肿”范畴，其主要病因中病机为消渴日久，耗气伤阴，气阴两虚，气虚行血无力致血瘀，阴虚致根本之阴亏损，肾阴不足，阴损及阳，阳虚不能行气化水，水湿潴留，发为水肿。故临床治疗当扶正祛邪并举，以益气养阴、化瘀通络。黄芪属扶正固本，补中益气类中药。黄芪注射液是中药黄芪的提取物，含有黄芪皂苷类、黄芪多糖、氨基酸类及微量元素等多种成分，临床上广泛用于治疗各种原因引起的蛋白尿。黄芪的主要作用是降低血小板的聚集性，增强红细胞的变形能力，缓解高凝状态，并能改变血瘀时的血流状态，使毛细血管保持开放，血流加快，总血流量增加，疏通微循环。高凝聚高黏状态造成组织缺血缺氧，缺氧造成内皮细胞脂质过氧化的损伤，引起内皮功能紊乱。黄芪注射液通过抗脂质过氧化的过程，加强氧自由基的清除，对缺氧内皮细胞产生细胞保护作用。陶少平等研究认为黄芪治疗糖尿病肾病的机制可能是通过抑制血转化生长因子一鱼(TGF－β1)的表达实现的。本研究观察到，黄芪注射液能显著降低DN病人尿白蛋白排泄率，降低PAI－1的表达水平。提示黄芪可通过抑制DN病人PAI－1的过度表达，改善肾脏细胞外基质蛋白代谢异常，发挥抗纤维化的作用，有效地保护肾脏。

　　PAI－1在DN的发生、发展中具有重要作用，PAI－1可作为早期糖尿病肾病的一个诊断指标，黄芪可通过抑制DN病人PAI-1的过度表达，改善肾脏细胞外基质蛋白代谢异常，发挥抗纤维化的作用，有效地保护肾脏。

　　(本文编辑　王雅洁)