食用菌多糖提取工艺研究
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（甘肃农业大学食品科学与工程系，兰州７３００７０）（甘肃农业大学园艺系，兰州７３００７０）
史琦云陈德蓉
郭玉蓉
■■：主要讨论了热水浸提法提取茵多糖的工艺流程及工艺条
件。食用茵子实体和茵丝体经热水提取，ｓｅｖａｇｅ法去除蛋白质，乙醇沉淀等处理，得到多糖。从不同方面对茵多糖的分离、纯化条件进行优化研究。通过单因子实验。提出了影响茼多糖得率的几个主要因素，并通过正交实验进一步优化提取工艺条件，确定影响茵多糖得率的主次因素分别为乙醇浓度、浸提比和提取时间，实验表明，杏鲍菇在原料／水＝ｌ：２０，提取时间３．５ｈ。乙醇浓度为７５％时提取效果最佳。用此工艺条件，可得到较为理想的结果。关■诩：茵多糖，多糖得率，主次因素，工艺条件
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中图分类号：髑２０１．１
文献标识码：Ａ
文章编号：１００２－０３０６（２００４）０２－００９８－０３
菌多糖提取时的工艺参数不同，多糖得率差异很大，为提高多糖得率，进行提取工艺参数的筛选是很重要的。本研究拟采用不同的食用菌为原料，进行不同提取工艺参数的筛选，并用正交实验进行主次因素分析，以期筛选出多糖提取的最佳工艺条件。
１材料与方法
１．１材料与仪器
金针菇、双孢菇、香菇、平菇、木耳由兰州市安
收稿日期：２００３一０７一０７
作者简介：史琦云，女，高级实验师，研究方向：食品分析与检验。
宁区桃海市场购得；阿魏菇、杏鲍菇、茶树菇由定
西金城食用菌开发中心提供；９５％乙醇、３３％Ｈ２０２、氯仿、正丁醇、丙酮均为国产分析纯试剂。
７６６型远红外辐射干燥箱，电热水浴锅，离心机，分析天平等。
１．２工艺流程
原料一烘干至恒重一粉碎一准确称量一复水一热水浸提一离心分离一上清液脱色一去除蛋白质一醇析一离心一干燥一菌多糖成品１．３操作要点
１．３．１原料的处理食用菌中的多糖存在于细胞壁
中，粉碎处理子实体多糖得率大。较细的颗粒有利于多糖的浸出，但给后面的分离过滤造成困难，使粗多糖溶液大量流失，造成多糖得率不高【Ｉ】。
在实验中先将原料洗干净，切成小块放入盘中，在６０℃条件下干燥至恒重，经２４ｈ后取出，烘干后放在研钵里磨成粉末，用纸包好待用。
１．３．２原料的复水在分析天平上准确称取２９粉末放人大试管中，加适量的水浸泡３０ｍｉｎ，使粉末充分吸水膨胀，便于多糖的浸出，减少蒸煮的时间。１．３．３
多糖的浸提从食用菌中提取多糖的提取剂
有酸液、碱液、酶及热水。不同提取液多糖得率差异较大，如用酸处理降低了多糖的含量；用碱处理使多糖量增加，但寡糖含量则相对减少，且提取后液体需中和，程序繁琐；水提取成本低，方便实用，因此在实
验中用水作提取剂闭。
将复水的浆体里加入蒸馏水，使浸提比分别为１：１０、ｌ：２０、１：３０，将大试管放入沸水浴中蒸煮ｌ、２、３ｈ，使菌多糖被充分浸提出来，然后冷却，将浸提液倒入离心管离心。１．３．４离心与脱色将蒸煮液置于离心机中以４５００∥ｍｉｎ的速度，离心１５ｍｉｎ，然后将上清液加热浓缩。直至滤液体积降为原来的ｌ／４～ｌ／５，再将浓缩液转人大试管中，加３倍体积的１０％Ｈ２０２加热脱色，使淡黄色褪去。１．３．５多糖的纯化食用菌子实体蛋白质含量较
不同浸提比对多糖得率的影响（％）
一—————————————————————————————————————————————————二＿—二二二二－—二——一．
料：水——
表ｌ
金针菇
０．６７１．４３０．８０
堡里堕
香菇
０．６５１．３３
平菇
１．２４１．６４１．０４
双孢菇
１．５７０．９３１．２５
木耳
０．７６０．６４０．９４
杏鲍菇
１．３５１．７２１．２４
阿魏菇
０．７３Ｏ．８４０．６２
茶树菇
Ｏ．９０１．０３１．２４
１：１０ｌ：２０１：３０
１．４６
表２提取时间对多糖得率的影响（％）
高，不除去蛋白质，导致粗多糖含量升高，产生偏差，所以在醇析之前，必须除去蛋白质。
将脱色液倒入分液漏斗中，用Ｓｅｖａｇｅ圈法除去蛋白质，即加入氯仿和正丁醇（５：２）０．５倍量，振荡萃取，取上层液，反复萃取２—３次至游离蛋白质完全去除，并用茚三酮检验。
１．３．６多糖的醇析和干燥将萃取液倒人大试管中，加入９５％乙醇至５０％、６０％、７０％、８０％饱和度，使多糖与乙醇生成水不溶性化合物，静置过夜，以３０００ｒ／ｍｉｎ，离心１５ｍｉｎ，并用丙酮漂洗沉淀两次，除去其中的脂类和色素。干燥采用烘箱干燥法，将沉淀物转入铝盒中，放入干燥箱７０℃干燥１５ｈ。１．３．７多糖的测定和多糖得率计算多糖测定用ＤＮＳ法。多糖得率（％）＝多糖含量／干粉重×１００％
３。由表３可看出，乙醇沉淀中，多糖得率随乙醇浓
度的升高而升高，但当乙醇浓度大于７０％以后，多糖得率增加缓慢，所以乙醇浓度为７０％～８０％时效果最佳。
表３不同乙醇浓度对多糖得率的影响（％）
２．４提取时间、浸提比和乙醇浓度与多糖得率的
关系
从以上实验得出，影响多糖得率有三个主要因素，即提取时间、浸提比和乙醇浓度。以杏鲍菇为原
２结果与分析
２．１
料进行了蹦３４）正交实验，确定提取时间、浸提比和乙
醇浓度与多糖得率的关系，正交实验设计及结果分析见表４。
表４极差分析结果表明，影响多糖得率的因素主次顺序为乙醇浓度＞浸提比＞提取时间；多糖提取最佳因素组合为浸提比１：２０、提取时间３．５ｈ、乙醇浓
表４
不同浸提比对多糖得率的影响
采用沸点温度、２ｈ，以不同的浸提比提取多糖，比较不同浸提比对多糖得率的影响，见表１。表１表明，不同菇类的最佳浸提比不同，一般最佳浸提比在１：２０～ｌ：３０之间，如金针菇、平菇、杏鲍菇、阿魏菇的最佳浸提比为１：２０；香菇、茶树菇、木耳的最佳浸提比为１：３０，仅双孢菇的浸提比在ｌ：１０。
因此，在浸提过程中应考虑加水量，若浸出液太多，不利于以后的分离；若太少，提取液粘稠，提取不彻底。
Ｕ３’实验方案及实验结果分析
２．２不同提取时间对多糖得率的影响
采用沸点温度、１：２０的浸提比、不同时间提取多糖，比较提取时间对多糖得率的影响，见表２。结果表明，随着提取时间的延长，多糖得率增加。对大多数菇来说，提取时间应在２ｈ以上，但不同的菇类有差异，如金针菇，双孢菇、茶树菇提取２ｈ最佳，而平菇、香菇、木耳、阿魏菇和杏鲍菇提取３ｈ效果最佳。
２．３乙醇浓度对多糖得率的影响
醇析多糖时，乙醇浓度对多糖得率的影响见表
食用菌多糖提取工艺研究
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
史琦云， 郭玉蓉， 陈德蓉
史琦云,郭玉蓉(甘肃农业大学食品科学与工程系,兰州,730070)， 陈德蓉(甘肃农业大学园艺系,兰州,730070)
食品工业科技
SCIENCE AND TECHNOLOGY OF FOOD INDUSTRY2004,25(2)23次
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