中药显微鉴定研究与应用综述
中药显微鉴别研究与应用综述
摘要:系统介绍近现代显微技术的变革,尤其是近些年来显微技术在中药材及中成药的研究及应用,文章从显微组织鉴别、粉末鉴别、化学鉴别、定量研究及现代显微技术发展5个方面展开论述。最后对显微鉴别存在的一些问题提出讨论。
关键词:中药;显微鉴别;研究与应用
中药显微鉴别是指利用显微镜对药材(饮片) 切片、粉末、表面、解离组织或磨片制片,以及含有饮片粉末的制剂观察,并根据组织、细胞或内含物等特征进行相应药材鉴别的一种方法[1]。显微鉴别方法是中药鉴别四大手段之一,通常应用于①性状不易鉴别的药材;②性状相似不易区分的多来源药材;③破碎中药材及粉末中药材;④用饮片粉末制成的制剂,如丸、散、片、胶囊中药材的鉴别;⑤纯度检查等,具有简便、快速、准确的优点。在质量标准中主要有:组织鉴别、粉末鉴别、显微化学鉴别和显微限量检查等。
1 组织鉴别研究与应用
德国学者Schleiden 1838年首次阐明了细胞是植物体的基本单位,根据组织构造的不同各种药材可以在显微镜下准确区别,并于1857年发表了植物性生药学基础著作《Grundniss der
Pharmakognosie des Pflanzenreiches》。从此以后,许多学者开始对药材的显微鉴别进行研究,通过对药材微观特征的观察比较,以鉴别药材的真伪、优劣。《中华人民共和国药典》1977年版依据中药材组织鉴别研究的一些成果,首次收载了中药材与中成药的显微鉴别项目,填补了我国中药显微鉴别项目的空白[2]。
1.1 中药材横切面的组织构造研究与应用
根、根茎、藤茎、皮、叶、果实、种子类中药材等,一般需要制作横切片进行显微观察,必要时制作纵切片;木类药材制作横切片、径向纵切片及切向纵切片三个面进行观察。人参为五加科植物人参的干燥根与根茎,常见的伪品有豆科的野豇豆、商陆科的商陆、茄科的华山参、菊科的山莴苣等植物的根。人参内部构造可见木栓层,韧皮部中有树脂道,栓内层、薄壁及射线细胞中含有草酸钙簇晶。而伪品有的虽有树脂道,但无草酸钙晶体;有的虽有草酸钙晶体却为砂晶或针晶,不是簇晶,且无树脂道;有的伪品还有异型维管束构造等。不同的人参伪品组织特征或细胞内含物不同,显微观察可将人参与伪品准确地进行鉴别。
中药材的显微鉴别,不但可以鉴别中药材的伪品与正品,还可以区分正品多基原植物药材的不同物种。《中国药典》2015年版一部收载的百部来源于百部科百部属三个物种的块根,即直立百部、蔓生百部和对叶百部。三种百部的块根外形极为相似,较难区分,显微鉴别法却可以将这三种百部的区分开[3]。何松春等对五种植物茎的横切面观察。发现维管束排列和韧皮部纤维的有无,区分了药典品肉苁蓉、管花肉苁蓉和非药典品草苁蓉、沙苁蓉及盐生苁蓉[4]。
1.2 中药材表面特征的研究与应用
植物性中药材表面特征的研究与应用多是对植物的叶片、果实或植物茎的表皮组织的观察。可观察表皮细胞形态、气孔类型、毛茸特征和着生情况等。主要有以下两种方法:
整体封藏法 适用于很薄的叶片、萼片和花瓣等样品。方法为:剪取所需部位2小片,约4mm2,一反一正放载玻片上,加水合氯醛试液加热透化完全,盖上盖玻片即可。也可放试管中加水合氯醛试液加热至样品透明,再取样装片。孢子、花粉粒、雄蕊或雌蕊等,也可直接装片观察。以水合氯醛试液整体封藏卷柏属植物的叶片边缘部位,成功地鉴别11种卷柏属植物及其药材[5]。
表面撕离法 较厚的叶片、萼片、花瓣及浆果、茎等,可用镊子将软化好的材料表皮轻轻撕下,将面朝上,放载玻片上,加水合氯醛透化至透明,盖上盖玻片即可进行显微观察。
2 粉末鉴别研究与应用
中药粉末鉴定主要是通过观察中药材的细胞、内含物和颗粒物质的显微特征来达到鉴定药材真伪的目的。通常用于药材粉末、外形较大或组织构造无鉴别特征的药材、破碎药材、含饮片粉末的中成药等。
2.1 中药材粉末鉴别研究与应用
美国Schneider 1921年著粉末植物生药显微分析《The Microanalysis of Powdered Vegetable
Drugs 》,较全面、详细地叙述了研究粉末植物生药的通则、操作方法、显微描述及检索表的编列等,并收载了210种粉末生药的显微特征图,这本书是早期最著名的粉末生药学专著。时至今日,各国药典标准中多有生药的粉末鉴别。
我国中药材显微鉴定前辈徐国钧院士,1951年发表了101种“粉末生药鉴定检索表”,其中包括国产生药40余种;随后1986年出版了《中药材粉末显微鉴定》的研究专著[6],收录了380种中药材粉末鉴定的全文和显微特征图。胡浩彬老师也在2012年出版了《名贵中药显微图鉴》[7]。
中药伪品及误用现象在粉末药材及破碎的药材中容易发生,如川贝母常打成粉末吞服,其粉末颜色为白色,在临床应用中发现川贝粉末中混入粮食类淀粉,有时发现有用半夏粉末伪充,但从粉末的显微特征上,川贝母与伪品则较易鉴别。高敏[8]等以粉末显微鉴别方法对淫羊藿药典品种进行鉴别,发现叶背面非腺毛形态、上表面细胞薄状深度及栅表比,可作为5种药材的鉴定依据。
2.2 中成药粉末鉴别研究与应用
中成药的显微鉴别始于1948年,当时管光地为了论证云南白药包装中附有一粒“保险子”是否由茄科曼陀罗属植物的种子所制成,曾作了保险子的粉末鉴定。1956年徐国钧等将粉末生药学方法应用于“南京灵应痧药”的鉴定,并检出了麝香、天麻、麻黄、大黄、朱砂等组分,开创了中成药显微鉴别的先例。1975年,南京药学院受国家药典委员会的委托,举办了中成药显微鉴别经验交流学习班,共同对全国各地起草的近百种中成药显微鉴别项标准进行复核。随后《中国药典》1977年版首次收载了179种中成药的显微鉴别项目,占收载的全部中成药品种的66.3%,以上这些研究成果被收入了这版药典。
随着中成药检验水平的不断发展,各版药典收载有显微鉴别项的中药成方制剂不断增加。在各