细菌放线菌的观察与革兰氏染色实验报告
实验一:细菌、放线菌的形态 观察与革兰氏染色
姓名:陈虹邑 学号:[1**********]2 系别:生物科学与生物技术 班级:周二第一组
试验日期:2011年9月13日 同组成员:邢悦婷 呼波
一、
实验目的及意义 1、巩固油镜的使用;
2、掌握细菌形态观察的基本方法; 3、了解细菌的基本形态和结构。 4、了解革兰氏染色的原理; 5、初步掌握细菌涂片的方法; 6、掌握革兰氏染色的方法; 7、掌握放线菌的涂片方法;
8、观察基内菌丝、气生菌丝和孢子丝。
二、
实验材料与方法 【实验材料】
菌种:溶血链球菌(Strptococcus haemolyticus),螺菌(Spirillum sp.) ,巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium), 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis), 普通变形菌(Proteus vulgaris), 丙酮丁酸梭菌(Clostridium acetotylicum), 褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)等细菌永久装片,放线菌5406,金黄色葡萄球菌(staphulococcus aureus),大肠杆菌(E. coli)
试剂:香柏油、无菌水、结晶紫、番红或沙黄、95%酒精、碘液
仪器及用具:显微镜、擦镜纸、吸水纸、小滴管,接种环、载玻片、盖玻片、酒精灯
【实验方法】 细菌的观察
1、在载玻片上滴一小滴水,用接种环,采用无菌操作,将细菌挑起,涂到载玻片上,盖上盖玻片。
2、用显微镜对细菌进行活体观察。观察时先用低倍镜,再用高倍镜,有必要的话,再用油镜观察。
3、观察细菌的永久装片,观察时先用低倍镜,再用高倍镜,有必要的话,再用油镜观察,找到细菌的各种结构。
放线菌的观察
1、玻璃纸法:用剪刀,剪下小块的玻璃纸,压片,放在显微镜下观察放线菌的基内菌丝、气生菌丝。
2、印片法:将盖玻片在火焰上稍加热,然后盖到培养基的玻璃纸上,稍用力压一下。取下盖玻片,放到载玻片上,进行镜检,主要观察放线菌的孢子丝。
革兰氏染色
三、
实验结果
1、观察到各种细菌的形态,以及一些细
菌的特殊的结构。如苏云金芽孢杆菌的芽孢、伴胞晶体;固氮菌的荚膜等。具体实验结果见附图。
2、枯草芽孢杆菌被染成紫色,可以清楚看见细菌里芽孢,也有芽孢已经释放出来。变形杆菌和金黄色葡萄球菌均被染成紫色。
3、混合的大肠杆菌部分被染成粉红色,
枯草芽孢杆菌(40×10)
是大肠杆菌,另外染成了紫色的菌是污染菌。
4、玻璃纸观察发观察到了放线菌的基内菌丝、气生菌丝。气生菌丝较粗,颜色较深,基内菌丝较细,颜色较浅。
5、用印片法看到了放线菌的孢子丝。
四、
实验分析与讨论
1、看细菌形态的时候,要注意调节倍数显微镜的倍数以及光线,来看清一些特殊的结构,如:鞭毛等。
2、取菌的时候要注意量一定要少,而且要涂开。否则,在视野里看到的菌都重叠在一起,看不清楚。
3、染色的时候要主要把握好染色和脱色的时间,否则会对结果产生影响。在染色巨大芽孢杆菌的时候,由于脱色时间过长,被染成了粉红色,产生了假阴性的结果。
4、观察放线菌的基内菌丝和气生菌丝的时候要主要调节细准焦螺旋钮,细看。因为它们的结构是立体的。不在一个平面上,所以要调节焦距,以便更好观察。 五、
参考文献
《微生物学实验指导》,黄秀梨,辛明秀,高等教育出版社2008.12,