药物对家兔离体肠管的作用

教学时数 2学时

实验原理

一、 离体实验

1、所用组织：心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验

2、特点：实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间，可进行大量

药物的筛选。

3、要求：离体实验需在一定生理环境下进行，模拟体内环境。

（1）温度：38±0.5℃

（2）通氧气：1－2气泡/s

（3）营养液：含有一定离子和葡萄糖的溶液，不同的组织所选用的营养液不同。

二、离体肠管实验

1、肠管的选择：根据实验目的的不同进行选择

（1）小肠：十二指肠、空肠、回肠

（2）自律性：频率较慢，起博点位于十二指肠，自律性自上而下渐弱。

（3）空肠多做定性实验，回肠多做定量实验

2、肠内受体及作用原理

（1）受体：家兔小肠平滑肌上存在α、β、M 受体。

（2）作用：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；M 受体兴奋可使小肠

平滑肌兴奋而收缩。

（3）药品对受体的作用：

1、氯化乙酰胆碱（Ach ）：M 受体激动剂，乙酰胆碱可兴奋M 受体，使小肠收缩

幅度增加，蠕动加强。

2、阿托品(Atro)：M 受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无作用，

可阻断M 受体，对抗乙酰胆碱的M 样作用，使肠管收缩幅度降低。

3、肾上腺素(Ad)：α、β受体激动剂，可激活α、β受体（主要是β2受体），

α、β受体激动可产生与M 受体激动相反的效应，表现为肠管舒张，小肠蠕动减弱。

4、氯化钙（Bacl 2）：①Ba 2+进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩，②Ba 2+

可使细胞膜发生去极化。所以加入Bacl 2肠管会发生强直性收缩，Bacl 2并非作用于受体，所以阿托品不能对抗这一作用。

实验材料

1．动物：家兔

2．药品①5X10-4氯化乙酰胆碱

②0.5％硫酸阿托品

③0.1%盐酸肾上腺素

④20％BaCL 2

3、器材：RM6240多媒体化生物信号记录分析系统、PC80586计算机、张 力传感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“L ”型通气钩、高位吊瓶、量 筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、 注射器、台式营养器。

实验方法

一、首先调试RM6240系统，使进入肌张力测定状态．

1．在主菜单中用鼠标选择中的，选择系统显示。

2．在界面右侧控制参数区选择,〈选择3g 〉, 扫描速度1.0s/div,确定信号输入，选择〈通道2〉，在工具菜单选择快速归零（空载时钩上无任何东西）。

3．在主菜单中选择〈示波〉，进入示波状态。

4．在主菜单中工具栏选择〈网格切换〉对背景网格进行切换为细格，并在选项

中选择波形颜色红色。

此时肌张力测试调试完毕。

二、调节仪器：

将超级恒温水浴温度调至38.5±0.5℃，向麦氏浴槽中加30ml 台氏液，通 入氧气(1～2个气泡／秒) 并制备家兔肠管标本。

三、正式试验：

将肠管标本两端用缝针各穿一线，一端打一空结(约lcm 小套) ，另一端穿

上长线打结，用眼科镊钳住空结固定于通气钩上，放入麦氏浴槽中，将另端长 线的尽端打一空结，挂在张力换能器的小钩上，调节换能器高度，使前负荷为1 g ，稳定标本20分钟。

在主菜单下按键选择〈记录状态〉，先描记一段正常曲线，然后按下列顺序给药。 ①向麦氏浴槽内加入5X10-4MAch0.2ml 同时用标记框在屏幕上作给药标记，观察肠段反应。当反应最明显时，用暂停键，将计算机转入“示波状态”。用台氏液冲洗肠管3遍，稳定标本15分钟，加入下列药物。

②将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加

0．5％阿托品0．2ml 并作标记，观察曲线变化，1分钟后加5X10-4MAch0．2ml 并标记，观察肠段反应。将计算机转入“示波状态“后，用台氏液冲洗肠管3 遍。稳定标本15分钟

③将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后向麦氏浴槽中加0．01 ％Adr0.1ml 并作标记，观察曲线变化。将计算机转入“示波状态”下冲洗肠管，稳定标本，加下列药物。

④将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加 20％BaCl 2 0．2ml 并作标记，观察曲线变化。

在主菜单下选择“结束实验”，激活工具栏，系统进入分析状态。

实验结果处理

在主菜单下分析项可选择区域测量、标记查询、开始反演、鼠标捕捉，测量后按工具栏中取消标志线，测出正常曲线，加Ach 后，加阿托品回复后，加Adr 后加BaCl2后肠管的收缩张力，分别求出加Ach 、Adr 、BaCl2所引起的张力变化值及

Atro 对Ach 拮抗的张力回缩值，以全班数据进行统计，作t 检验，并判断各药的作用是否显著。

在主菜单下打印项进行打印模式设置，可倒入测量信息、学生实验、实验信息后，预览、打印。

注意事项

1、操作时应避免牵拉肠管，造成肠管活性不好。

2、肠管两端穿线采用十字交叉法，肠管不易扭曲，便于营养液的流通。

3、每次给药前均应冲洗肠管3次，中间间隔1分钟。

4、BaCl 2可使肠管产生强直性收缩，不能恢复，所以最后加BaCl 2。

5、给药时将药液直接加入药液，不要碰线，也不要碰壁。

【目的要求】 观察药物对离体肠平滑肌作用，掌握用离体器官分析仪测试药物对离体器官作用方法。

【原理】 动物的离体肠管在适宜的营养液环境中可保持较长时间的自动节律性收缩。肠管平滑肌上分布M 受体、? 受体和? 受体，向营养液中加入受体的激动剂或阻断剂，可引起肠管的收缩或松弛。

【材料】

1. 动物：家兔1只。

2. 药品：盐酸毛果芸香碱注射液、硫酸阿托品注射液、盐酸异丙肾上腺素注射液、盐酸普萘洛尔注射液、台氏液。

3. 器材：手术剪、手术刀、止血钳、缝针、缝线、注射器、烧杯、“L”形玻璃钩、离体器官分析仪。

【实验实训步骤】

1. 将离体器官分析仪安装好，打开进液按钮，向浴槽内加入适量台氏液，设置温度在38.5～39.5℃，调节气量调节阀使气泡排出数为每秒1～2个。

2. 将家兔处死，剖腹，剪取十二指肠约2～3cm ，放入盛有台氏液的烧杯中，剥离肠系膜，用不带针头的注射器吸取台氏液将肠内容物冲净，备用。

3. 将肠管两端对角单臂穿线，上端连接拉力换能器，下端系于L 形玻璃钩上，放置于盛有台氏液的浴槽内。

4. 待肠管稳定后，观察离体肠管正常收缩曲线。

5. 用注射器依次加入下列药液，观察并记录肠管的收缩曲线变化。

第一组为盐酸毛果芸香碱注射液、硫酸阿托品注射液；第二组为盐酸异丙肾上腺素注射液、盐酸普萘洛尔注射液。药液要逐滴加入，当肠管收缩显著时，立刻加入另一药液。加完第一组药液后，将浴槽内的台氏液排出，用台氏液冲洗三次，再加入台氏液，描记一段正常收缩曲线后加入第二组药液。见图。

【注意事项】

1. 家兔在实验前24h 内禁食，但不禁水，以使肠腔无粪便。

2. 制作肠管标本时，动作要轻柔而迅速，且尽量在38.5～39.5℃的台氏液中操作，以维持肠管的正常功能。肠管悬吊不宜过松或过紧，不可与浴槽壁贴住。

3. 加药时不要碰连接线，药液须滴入台氏液里，不可滴在肠管上或沿浴槽壁滴入。

4. 通过调节台氏液温度、空气速度以及分析仪的微调旋钮和量程，使肠管活动处于最佳状态。