血小板抗体检测试剂盒(固相凝集法)使用操作说明
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血小板抗体检测试剂盒（固相凝集法）使用操作方法
1、平衡室温
取出血小板抗体检测试剂盒（固相凝集法）、血小板抗体检测用指示红细胞（固相凝集法）、血小板抗体筛检细胞（冻干粉）放在室温中平衡至室温。
2、检测样本准备
将血浆（血清）3000转离心5-10分钟。
3、配制浓缩洗涤液
将浓缩洗涤液以1：24比例与蒸馏水混合（满瓶20ML 浓缩洗涤液兑480ML 蒸馏水）。
4、配制血小板抗体筛检细胞（冻干粉）
将冻干粉依比例与生理盐水混合（冻干粉0.5ML 与0.5ML 生理盐水混合），混合后放置5分钟，使用前轻轻摇匀。
5、标识
由包装内取出一条反应板，平衡至室温。标记阳性对照、阴性对照、检测样本序号。
6、加血小板
向反应板孔中各加入1滴（约50µl）混匀的血小板悬液，轻摇反应板约10秒钟。
7、固着
将反应板用平板离心机以50g 离心5分钟（专用血小板离心机用程序1）。
8、洗涤
将反应板用洗涤液洗3至4次，洗涤过程中轻摇微孔板，然后再轻轻甩掉洗涤液。最后一次洗涤后将残余液体蘸干。
9、加样
先向各孔中加入2滴（100µl）低离子强度溶液，再分别滴加1滴（50µl）阳性对照、阴性对照、检测样本。
10、孵育
将反应孔用封口胶纸封好，轻摇混匀后置湿盒中37℃孵育30分钟（或气浴孵育35至40分钟）。
11、洗涤(同步骤8) 反复洗涤5至6次。
12、加指示物
立即向上述各孔加入1滴抗人IgG （50µl）和1滴（50µl）混匀的血小板抗体检测用指示红细胞悬液，轻轻振荡混匀。
13、离心
将反应板以200g 离心5分钟（专用血小板离心机用程序2）。
14、结果判定
观察并记录实验结果。阳性反应为指示红细胞黏附在反应孔底部表面，而阴性反应为指示红细胞在离心力的作用下聚集于反应孔底部中央，弱阳性反应格局介于两者之间。